气相色谱分析实验 二、【实验目的要求】
1．掌握内标法定量分析的原理。
2．掌握气相色谱分析实验技术，学会使用气相色谱仪。 3．学会用内标法定量分析测试方法。 三、【实验原理】
（一）气相色谱法 气相色谱法是采用气体作为流动相的一种色谱法。 1. 流程：
由前述可见，气相色谱法是采用气体作为流动相的一种色谱法。在此法中：载气（是不与被测物作用，用来载送试样的惰性气体，如氢、氮等）载着欲分离的试样通过色谱柱中的固定相，使试样中各组分分离，然后分别检测。其简单流程如图1-1所示。
载气由高压钢瓶1供给，经减压阀2减压后，进入载气净化干燥管3以除去载
气中的水分。由针形阀4控制载气的压力和流量。流量计5和压力表6用以指示载气的柱前流量和压力。再经过进样口（包括气化室）7，试样就在进样口注入（如为液体试样，经气化室瞬间气化为气体）。由载气携带进入色谱柱8，将各组分分离后依次进入检测器9后放空。检测器信号由记录仪10记录，就可得到色谱图。
气相色谱仪组成：从色谱流程图可知道，气相色谱仪一般由五部分组成： （1） 载气系统，包括气源、气体净化、气体流速控制和测量。 （2） 进样系统，包括进样口、气化室。 （3） 色谱柱和柱箱，包括恒温控制装置。 （4） 检测系统，包括检测器及控温装置。
（5） 记录系统，包括放大器、记录仪，有的仪器还有数据处理装置。 2．气相色谱法特点：
（1） 分离分析连贯性强，方法简便。 （2） 分离效能高，选择性好。 （3） 分析速度快。 （4） 灵敏度高。 （5） 应用范围广。
（二）气相色谱的定量方法： 1．色谱定量分析的依据：
在一定操作条件下，分析组分i的重量（Wi）或其在载气中的浓度是与检测器的响应信号（峰高或峰面积）成正比的，可写作：
（4）外标法（又称定量进样--标准曲线法）：
所谓外标法，就是用欲测组分的纯物质来制作标准曲线，以响应信号为纵坐标，以百分含量为横坐标绘制标准曲线，分析试样时进样量与绘制曲线时进样量相同。经色谱分析测得该样品的响应信号（如峰面积或峰高），再由所制的标准曲线上查得相应的含量值。
优点：操作简单，计算方便，但结果的准确度主要取决于进样量的重现性和操作条件的稳定性。 本实验采用内标法完成样品定量分析 四、【实验仪器与试剂】
1．仪器 日本岛津GC-9A气相色谱仪；FID检测器；2010双通道色谱工作站；中惠普NHA-300S气源发生器；PEG-20M填充柱；微量进样器。
2．试剂 乙酸正戊酯（分析纯），无水乙醇（分析纯），己酸乙酯（色谱纯），正十二烷（分析纯）。 五、【实验步骤】
1． 样品的配制：称取7.00克乙酸正戊酯，6.00克乙酸乙酯，用无水乙醇定容到100ml，称量样品总重量。准确称取7.00克己酸乙酯（内标），加入到已称重的待测样品中，混合均匀供实验用。 2． 内标物和组分定性分析：
（1） 取纯乙酸正戊酯和己酸乙酯（内标）分别进样进行气相色谱测定，记录其保留时间和峰面积。 （2） 取配好的样品在相同的色谱条件下进样测定，分别记录各谱峰的保留时间。
（3） 将（1）和（2）中测定的保留时间相对照，确定样品中乙酸正戊酯和己酸乙酯（内标）在谱图中的位置。
3． 校正因子的测定：
利用步骤2中（1）测出的峰面积计算乙酸正戊酯的校正因子：
4． 样品中乙酸正戊酯的定量测定：
取实验样品进样做气相色谱测定，记录乙酸正戊酯和内标物己酸乙酯的峰面积。 5． 仪器操作条件： 柱温：100℃ 进样口温度：200℃ 检测器温度：200℃ 载气流速：60ml/min 灵敏档：102×24 进样量：2μl
6． GC-9A气相色谱仪操作步骤：
（1） 开启主机和色谱工作站电源，设置相应参数。
（2） 打开气源发生器开关，旋紧氢气发生器电源开关旋扭，排空运行30分钟后，拧紧排空阀，观察流量和压力显示是否正常。
（3） 待主机ready灯亮后，调节空气和氢气流量至适当值，点燃FID火焰。 （4） 观察记录仪信号，待基线平稳后，开始测试。
（5） 测试完毕后，先关闭主机和色谱工作站电源，然后旋松氢气发生器电源开关旋扭，直至切断电源。打开氮气排空阀，并排除空气泵储气罐中的积液，关闭气源发生器电源。 六、【数据处理】
将实验中测得的内标物己酸乙酯和样品乙酸正戊酯校正因子、峰面积以及内标物、混合样品的量代入内标法定量计算公式中，计算出样品中乙酸正戊酯的百分含量。 七、【实验报告要求】
写清楚实验的目的和原理、实验操作步骤以及实验条件，并正确处理实验数据。 八、【问题讨论】
1． 在内标法定量分析中，内标物的选择是很重要的，你知道内标物的选择原则吗？ 2． 试比较内标法和归一化法定量分析在实际应用中的异同点。