27.（12分）凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶。直接利用动、植物生产凝乳酶受多种因素
限制，培育高酶活力凝乳酶微生物菌种是目前最有前途的发展方向。用紫外线照射芽孢杆菌，分离、培养，并检测各菌株所产生的凝乳酶活力。操作过程如图1所示。请分析回答：
（1）图1所示的b过程的目的是为获得 ，接种用的平板培养基 （是，
不是）选择培养基。
（2）在一定温度下（35℃），一定时间内（通常为40分钟），凝固1mL10%脱脂奶粉
的酶量为一个酶活力单位（U）。凝乳酶活力检测结果如图2所示。
A0 A1 A2 A3 A4 A5 A6 图2
酶 活 力 （U） 紫外线 照射 芽孢杆菌 b 提取 凝乳酶 提取 凝乳酶 提取 凝乳酶 A2 A1 A0 测 定 酶 活 力 图1 提取 凝乳酶 A6 ①据图2所示，酶催化能力最强的是 组。
②A2、A5组酶活力与A0组芽孢杆菌相同，两位同学对此做出了推测：
同学甲：A2、A5组芽孢杆菌未发生基因突变，因为基因突变具有 的特点。
同学乙：A2、A5组芽孢杆菌发生基因突变，但凝乳酶蛋白未改变，其依据的
理由是 。为了验证上述2位同学的假设，可采用 技术检测凝乳酶基因是否发生了突变。
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（3）从牛胃液中分离到的凝乳酶以催化能力强而被广泛应用，研究人员运用基因工程
技术，将编码该酶的基因转移到了微生物细胞中。
① 从牛胃细胞中提取 ，再逆转录形成cDNA。以此cDNA为模板PCR扩
增目的基因，有时需要在引物的5端设计 （限制酶，DNA连接酶，RNA 聚合酶）识别序列，以便构建重组DNA分子。
② 构建重组DNA分子（如图3所示）最好选用________限制酶，理由是 。
Eco RⅠ
抗氨苄青 霉素基因
质粒 抗四环素基因 BamHⅠ PstⅠ
BamHⅠ 图3
EcoRⅠ EcoRⅠ PstⅠ 外源DNA
BamHⅠ ，
③ 工业化生产过程中，最初多采用重组大肠杆菌或芽孢杆菌生产凝乳酶，现多采用重组毛霉生产，毛霉作为受体细胞的优势是 。
④ 研究发现，如果将该凝乳酶20位和24位氨基酸改变为半胱氨酸，其催化能力将提高2倍。通过蛋白质工程生产高效凝乳酶，所需步骤有 。 a. 蛋白质的结构设计 b. 蛋白质的结构和功能分析
c. 蛋白质结构的定向改造 d. 凝乳酶基因的定向改造
e. 将改造后的凝乳酶基因导入受体细胞 f. 将定向改造的凝乳酶导入受体细胞
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北京市西城区2014 — 2015学年度第一学期高三生物期末试卷答题纸
成绩 统计 题号 得分 选择题 （40分） 1-20题 总分 21 22 非选择题（60分） 总分 全卷 27 总分（100） 23 24 25 26 （请在各题的答题区域内作答，超出黑色边框区域的答案无效）
选择题（1~20题，有答题卡的请填涂在答题卡上）
题号 答案 题号 答案 1 11 2 12 3 13 4 14 5 15 6 16 7 17 8 18 9 19 10 20 非选择题（21~27题）
21．（9分） 本题得分： （1） （2） 得分： 得分： 得分： （3） 得分： （4） 高三生物第一学期期末试卷 第 13 页（共16页）
22．（8分） 本题得分： （1） 得分： （2） 得分： （3） 得分： （4）
23．（9分） 本题得分： 得分： （1） （2） 得分： （3） D D （4） 高三生物第一学期期末试卷 第 14 页（共16页）
24．（7分） 本题得分： （1） 得分： （2） 得分： （3）
25．（8分） 本题得分： （1） 得分： 得分： （2） 得分： （3）
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