? 特征 革兰阳性 革兰阴性 ? 肽聚糖层次 15 ～50 1～2 ? 化学组成 肽聚糖 外膜 磷壁酸 肽聚糖
? 厚度 厚 薄 (20~80nm) (10~15nm)
? 外膜 无 有
? 周浆间隙 存在于某些菌种 存在于全部菌种 ? 孔蛋白 无 有 ? 分子渗透性 高渗透性 低渗透性
细菌的测量单位 微米(μm)
? 细菌L型 即细胞壁缺陷细菌， 油煎蛋样菌落 染色性发生改变，多为革兰阴性。
形态发生改变，呈多形性。仅能在高渗环境中存活 中介体
部分细胞膜折叠形成的向内陷入细胞质中的囊状物 ， 为细菌提供大量能量。 ? 外毒素（exotoxin）： 活的革兰阳性菌合成分泌化学成分为蛋白质，不耐热 毒性强，对组织有选择性作用 抗原性强，可脱毒为类毒素。
? 内毒素（endotoxin）： 革兰阴性菌死亡后释放化学成分为脂多糖，耐热 毒性作用大致相似（发热、白细胞
反应、内毒素血症、DIC）抗原性弱，不可脱毒为类毒素
? 侵袭性酶类： 透明质酸酶 血浆凝固酶 卵磷脂酶
霍乱弧菌pH在8.4～9.2生长最佳 疑似霍乱患者，镜下观察到来回穿梭似流星状运
动的细菌，制动试验阳性，可初步推断为“疑似O1群霍乱弧菌”。
细菌群体生长繁殖--生长曲线图 ? 延缓期:：准备阶段
? 对数期： 细菌形态、染色性生理活性典型，对外界因素敏感 ? 稳定期：合成代谢产物
? 衰亡期：细菌形态改变呈多形态的衰退形
噬菌体是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的病毒 溶原性噬菌体具有溶菌性及溶原性二个周期。
? 细菌基因转移和重组的方式：
转化 （transformation)；接合 (conjugation)；
转导 (transduction)；溶原性转换 (lysogenic conversion)； 原生质体融合（protoplast fusion)
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SS琼脂使致病的沙门菌、志贺菌容易分离到 伊红美蓝/麦康凯用于筛选革兰阴性杆菌。 1．氧化酶试验
主要用于肠杆菌科细菌与假单胞菌的鉴别。 2．过氧化氢酶试验（触酶试验） 用于革兰阳性球菌的初步分群。 3．硝酸盐还原试验
铜绿假单胞菌、嗜麦芽假单胞菌等假单胞菌可产生氮气 4.七叶苷水解试验
主要用于D群链球菌与其他链球菌的鉴别。 5．甲基红试验
主要用于鉴别大肠埃希菌与产气肠杆菌。 6．V―P试验
本试验常与甲基红试验一起使用，因为前者阳性的 细菌，后者通常为阴性。 CAMP试验
在链球菌中，只有B群链球菌CAMP试验阳性，故可作为特异性鉴定。 杆菌肽试验
用于A群链球菌与非A群链球群的鉴别。 奥普托欣（Optochin）试验
主要用于肺炎链球菌与其他链球菌的鉴别
生物芯片技术
1. 通过微加工技术和微电子技术在固体芯片 表面构建微型生物化学分析系统。
2. 对细胞、蛋白质、DNA以及其他生物组分的 准确、快速、大信息量的检测。
3. 常用的生物芯片分为二大类：即基因芯片和 蛋白芯片。 界（Kingdom ）门（Division）纲（class ）目（Order ）科（Family ）属（Genus ）种（Species ）
金黄色葡萄球菌
直径6~8mn，金黄色或橙色，菌落周围出现或不出现透明溶血环
血琼脂平板上菌落周围有透明溶血环。能在含10%~15% NaCl琼脂中生长 生化反应活泼、能分解多种糖类和蛋白质， 触酶阳性
肠毒素是一组对热稳定的可溶性蛋白质，耐热100 ℃30min ,分子量为26～30kDa，能
够抵抗胃肠液中蛋白酶的水解作用
? 脓液、分泌物等接种于血琼脂平板
? 有污染的标本如粪便等应接种在选择平板上，如甘露醇高盐平板 ? 血液标本则用肉汤增菌培养基
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? 根据链球菌属各种细菌在血平板上的溶血现象
? 菌落周围呈现透明溶血环的为β溶血性链球菌，菌落直径大于0.5mm或小于0.5mm。
草绿色溶血环的为α溶血性链球菌。有些菌落灰白色不出现溶血环
? 甲型（α）溶血性链球菌 包括肺炎链球菌、草绿色链球菌群
? 乙型（β）溶血性链球菌 A群的化脓性链球菌 ? 不出现溶血的丙型（γ）链球菌
? 根据Lancefield抗原血清分型
? 分为A、B、C、D、……等20群
? 血清群与溶血特性没有相关性。对人类致病的主要是A群
肺炎链球菌
? 荚膜多糖使菌落呈粘液状
? 产生自溶酶，培养48h后出现“脐窝状”菌落 ? 荚膜肿胀试验用于检查肺炎链球菌
? 革兰染色为革兰阳性球菌，链状或短链状排列 ? 触酶试验阴性，6.5%NaCl不生长者 ? 可确定为链球菌属细菌
与B群抗血清凝集的菌株可直接确认为无乳链球菌是新生儿菌血症和脑膜炎的常见菌 与F群抗血清凝集并且菌落直径＜0.5mm可确定为米勒链球菌
与A、C、G群抗血清凝集的菌株不能确定种类，还需根据菌落大小和生化反应进一步鉴定
? 杆菌肽（bacitracin）敏感试验
? 化脓性链球菌为阳性，有别于其他PYR阳性的β溶血性细菌（猪链球菌、
海豚链球菌）和A群小菌落β溶血性链球菌（米勒链球菌）
菌 种 肺炎链球菌 草绿色链球菌 牛链球菌
肠球菌
? 临床标本中分离的80%~90%是粪肠球菌 ? 屎肠球菌约占5%~10% 菌属的鉴定
? 肠球菌属细菌革兰染色阳性，卵圆形，单个、成双或短链排列。 ? 触酶阴性、胆汁七叶苷和PYR阳性、6.5% NaCl肉汤中能生长
? 革兰阴性双球菌 氧化酶阳性，触酶阳性 对青霉素敏感
形似双肾或咖啡豆样，凹面相对 无动力，无芽胞，某些菌种形成荚膜
血琼脂平板或巧克力琼脂平板上呈光滑、湿润、 透明或半透明、直径1~2mm的不溶血、圆形、灰兰色菌落
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optochin敏感试验 胆汁溶菌试验 S R R + — — 胆汁七叶苷试验 — — + 卵黄琼脂平板上为无色、光滑、湿润奶油状菌落 在液体培养基中呈轻度或中度混浊生长，无菌膜
脑膜炎奈瑟菌于孵育24h后在培养基上发生自溶
? 可疑菌落 灰褐色、光滑、半透明的菌落
革兰染色后显微镜下见白细胞内外的革兰阴性双球菌，可报告“检出革兰阴性双球菌，疑似脑膜炎奈瑟菌”。有助于流行性脑脊髓膜炎早期诊断
? 初步确定为奈瑟菌属
? 直径1~2mm，灰褐色、光滑、半透明、稍扁的菌落 ? 涂片革兰染色见阴性双球菌 ? 氧化酶试验阳性
? 进一步进行葡萄糖和麦芽糖发酵试验阳性、其他糖 类发酵阴性可确定为脑膜炎奈瑟菌
淋病奈瑟菌
将菌落涂片，革兰染色见革兰阴性双球菌
氧化酶和触酶试验阳性
葡萄糖发酵试验阳性，其它糖类阴性
肠杆菌科的共同特性 革兰阴性杆菌
生化反应活泼 发酵葡萄糖，氧化酶阴性，触酶阳性，还原硝酸盐为亚硝酸盐，O/F试验为发酵型。
志贺菌属分为A、B、C、D 4群：A群为痢疾志贺菌（S. dysenteriae），B群为福氏志贺菌（S. flexneri），C群为鲍氏志贺菌（S. boydii），D群为宋内志贺菌（S. sonnei）。 IMViC试验
大肠埃希菌为++--
肠杆菌属细菌大多为--++
根据典型的迁徙现象,迅速分解尿素，苯丙氨酸脱氨酶阳性，KIA为KA++，IMViC为-/++--，可鉴定为变形杆菌
假单胞菌属 氧化酶阳性
人类不发酵菌感染中，假单胞菌占70％～80％，主要为铜绿假单胞菌，其他较为常见的菌种有嗜麦芽窄食单胞菌、鲍曼不动杆菌等
? 铜绿假单胞菌血平板上毛玻璃样，金属光泽，生姜味 嗜血杆菌属卫星现象
百日咳鲍特菌对青霉素不敏感，大多数菌株对四环素耐药
? 霍乱弧菌 氧化酶阳性 发酵蔗糖， 动力阳性
? 新从患者标本中分离出的细菌革兰染色阴性，弧形或逗点状
? 在患者“米泔水”样便中，可呈头尾相接的“鱼群”样排列 ? 菌体一端有鞭毛，悬滴观察时呈“穿梭”样运动 ? 有普通菌毛和性菌毛
? O139群有荚膜，还有O1和非O1型
? H抗原为共同抗原，，O抗原分群和分型的基础
? 在pH8.2~9.0的碱性胨水或碱性平板上生长迅速，其他杂菌被抑制生长
? 在pH8.5的碱性胨水中经35℃4~6h增菌后可在液体表面大量繁殖形成菌膜
硫代硫酸盐-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖 (TCBS)琼脂平板霍乱弧菌发酵蔗糖产酸，菌落呈黄色
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副溶血性弧菌 具有嗜盐性，主要引起食物中毒和急性腹泻
? 在无盐培养基上不能生长，最适合生长的氯化钠浓度为3.5%，超过8%不能生长 ? 最适pH为7.7~8.0，但pH9.5时仍能生长，最适生长温度为30~37℃ ? 在碱性胨水中经6~9h增菌可形成菌膜
神奈川现象（KP）从腹泻患者中分离到的菌株95%以上在我妻（wagatsuma）琼脂上产生β溶血现象，
弯曲菌属鉴定要点：氧化酶阳性，革兰阴性，菌体弯曲或呈S形，生长温度 (25℃、37℃、42℃)试验；马尿酸盐水解试验阳性
幽门螺杆菌是引起胃炎的病原体，营养要求较高，在微氧环境中分离培养。可以产生大量脲酶。通过快速测定脲酶的活性或代谢产物可以临床诊断
革兰阳性需氧杆菌 炭疽芽胞杆菌致病菌中最大的G+杆菌，两端平切、竹节状，有毒株可有明显荚膜
李斯特菌 G+短小杆菌 粪-口途径传播，倒伞形的生长，4℃冷增菌
触酶 动力 马尿酸盐水解 产单核李斯 + + - B群链球菌 - - +
棒状杆菌
? G+杆菌、一端或两端膨大成棒状 ? 染色不均匀，两端浓染或有异染颗粒 ? 无鞭毛、无芽胞
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