使用说明
VITROS 免疫诊断产品
总人绒毛膜促性腺激素 ??亚单位试剂包
?-hCG
176-4877
用途
用于体外定量测定人血清和血浆（EDTA 和肝素抗凝）样本中人绒毛膜促性腺激素 (hCG) 及其 ? 亚单位的含量。
实验摘要及说明
临床上，在末次月经后的 3 到 4 周内检测尿液或血液中人绒毛膜促性腺激素 (hCG) 的浓度是确定妊娠最可靠的指标。人绒毛膜促性腺激素 (hCG) 最初是由滋养层分泌，后来由绒毛和胎盘分泌。在妊娠头三个月，hCG 的浓度增大并达到高峰；在妊娠中、后期 hCG 形成平台。测定人绒毛膜促性腺激素 (hCG) 还可应用于对异位妊娠、先兆流产、多胎妊娠的诊断。1-4 hCG 浓度升高还可见于滋养层细胞肿瘤和非滋养层细胞肿瘤，如：小肠癌、肺癌、睾丸癌、乳腺癌和前列腺癌、葡萄胎、绒毛膜癌及其脑转移等。5-7 测定外周血循环中 hCG 的浓度对上述患者的疗效监测十分有意义。
实验原理
在 VITROS 免疫诊断系统上使用 VITROS 总人绒毛膜促性腺激素 ? 亚单位试剂包和 VITROS 免疫诊断产品总人绒毛膜促性腺激素 ? 亚单位定标品来进行 VITROS 总人绒毛膜促性腺激素 ? 亚单位实验。本实验应用一种免疫测定技术，即样本中的人绒毛膜促性腺激素与生物素化抗体（绵羊 hCG 抗体）以及辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗体酶结合物（小鼠单克隆 hCG 抗体）之间同时发生的反应。抗原-抗体复合物被反应杯中的链霉亲和素捕获，且通过洗涤除去未结合的物质。
辣根过氧化物酶（HRP）结合物的化验原理是基于一种化学发光反应。8在反应杯中加入一种含发光底物（一种鲁米诺的衍生物和一种过氧酸盐）及一种含电子转移物的试剂。酶结合物中的辣根过氧化物酶 (HRP) 催化鲁米诺衍生物发生氧化反应，并产生光。电子转移物（三氯四羟基乙酰苯胺）增强了光产生的强度水平，延长发光时间。最后由 VITROS 系统读取光信号。HRP 结合物的量与样本中存在的 hCG 含量成正比。
警告与注意事项
仅用于体外诊断 警告：
潜在传染性物质
须小心处理人源性材料。所有样本均应视为具有潜在传染性。没有任何一种实验方法能够绝对确保不存在乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）、人类免疫缺陷病毒（HIV 1+2）或其它传染物质。样本和分析组分的处理、使用、储存及固体和液体废弃物的处置，均应按照国家生物危害安全指南或规程的相应措施处理（如 NCCLS 指南 M298）。
含有凯索恩 (Kathon)
警告：
试剂中含有凯索恩 (Kathon)。R43：与皮肤接触可能引起过敏。R52/53：对水生物有害，在水环境中可能引起长期的不利影响。S24：应避免与皮肤接触。S37：配戴合适的手套。
版本 1.0 出版物编号 GEM1075_ZH 1
?-hCG
使用说明
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显示的文字。
提供的材料
一个试剂包包含：
? 100 个包被好的反应杯（链霉亲和素，可结合 ?3 ng 的生物素/反应杯）。
? 6.2 mL 酶结合物试剂（HRP-鼠单克隆 hCG 抗体，可结合 ?1 250 mIU hCG/mL），溶于含有抗微生物剂的缓冲液中。 ? 11.7 mL 生物素化的抗体试剂（生物素-绵羊 hCG 抗体，可结合 ?312 mIU hCG/mL），溶于含有抗微生物剂的缓冲液中。 注释：
含有牛血清和牛血清白蛋白。
自备材料
VITROS 免疫诊断系统和下列 VITROS 免疫诊断产品：总人绒毛膜促性腺激素 ? 亚单位定标品（包含批次定标卡和实验方案卡）、信号试剂、通用洗液试剂、高倍样本稀释液 B 和带有干燥剂的诊断试剂盒储存盒（可选）。
试剂的准备和储存
VITROS 免疫诊断产品试剂包含有均质的液体试剂，装载入 VITROS 系统之前无需震荡和混合。与所有免疫测定蛋白质基质溶液一样，对试剂包处理不当可导致在试剂表面产生泡沫。 所提供的试剂包即开即用。未开封的试剂包储存于 2–8 °C 环境下，不可冻存。装载到系统的开封试剂包可使用 8 周；但不可在超过有效期后使用。将开封的试剂包载入系统中储存，或在 2–8 °C 温度下放入带有干燥剂的密封试剂包储存盒中储存。 VITROS 总人绒毛膜促性腺激素 ??亚单位 (?-hCG) 定标品以冻干形式供应。将未开封的定标品储存于 2–8 °C 下。超过有效期后切勿使用。用 1 mL 蒸馏水进行复溶。复溶后，可在 2–8 °C 下最长保存 13 周，或在 -20 °C 下最长保存 13 周（不超过一个冻融循环）。
患者准备
患者不需做特殊准备。
样本的收集、准备和储存
血清或血浆（EDTA 或肝素抗凝）均可使用。请采用标准操作收集血液样本。血清和血浆样本在 2–8 °C 下最长可保存 7 天，或在 -20 °C 下最长保存 4 周。避免反复冻融。EDTA 抗凝血浆样本与相应的血清样本相比较大约有 10% 的正偏差。
据报道，样本收集装置有时会损害某些分析物的完整性，而且会对某些方法技术产生干扰。9有关进一步详情，请参阅定标品使用说明。建议每位使用者确保所选装置是按照制造商的指导说明进行使用的，并且适合于本 VITROS 实验。
质控和操作注意事项
? 处理试剂包时应小心，避免出现以下情况：使试剂包上形成浓缩物、使试剂起泡、震摇试剂包。如果 VITROS 试剂包跌
落或被搅动，可能会产生 VITROS 系统无法检测出的少量细小泡沫。当试剂包含有细小泡沫，而 VITROS 系统无法检测出时，结果可能会产生负偏差。如果必须使用一个跌落或搅动过的试剂包，在应用之前，应该把这个试剂包装载入 VITROS 系统后，通过重复检测高值和低值质控样本来验证其检测性能。
? 定标品是批次特异的；试剂包和定标品通过批号相匹配。同一批次的试剂包可采用相同的定标，该定标必须使用同一批
号的定标品执行。
? 使用前，通过翻转充分混匀样本、定标品和质控品，并使其温度平衡到 15–30 °C。
? 应在有盖容器中处理样本、定标品和质控品，避免污染和蒸发。为避免蒸发，应限制样本、定标品和质控品装载到
VITROS 系统上的时间。有关详情，请参阅《VITROS 系统操作指南》。使用后尽快放回 2–8 °C 温度下储存，或只装载足够单次测定的用量。
? 定期检查试剂清单以帮助管理试剂，并确定有足够的 VITROS 信号试剂、VITROS 通用洗液以及定过标的试剂批次可用于
计划的实验。当对单个样本执行一组分析时，请确保样本量足够分析用量。
? 好的实验室操作需要运行质控品以确认分析的性能。VITROS 生殖内分泌激素 (RE) 质控品或 VITROS 肿瘤学质控品共有
3 种不同浓度的 hCG 质控品（低、中、高）。建议在执行定标后运行质控品，且随后至少每 24 小时及在执行特定维修程序之后运行一次质控（请参阅《VITROS 系统操作指南》）。如果您实验室内的质控操作需要更频繁地使用质控品，则请按上述步骤操作。有关更详细的信息，请参阅《VITROS 系统操作指南》。
2 出版物编号 GEM1075_ZH 版本 1.0
使用说明
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?-hCG
? 在患者报告单上显示的实验默认名称是 Total ?-hCG。在实验选择菜单上以及实验室报告单上显示的实验默认名称的缩写
是 ?-hCG。若需要，可重新设置这些默认值。结果可以用 mIU/mL 或 IU/L 的形式表示。这些选项可在 Options & Configurations - Configure Analytes（选项和配置 — 配置分析物）屏幕中进行配置。
? 稀释步骤：样本的原始浓度值在该项化验的定标范围内时（?1 000 mIU/mL）则无需稀释，除非怀疑有高剂量挂钩效应。
请参阅“实验的局限性”部分。
? 由于 VITROS 高倍样本稀释液 B 中含有少量的非特异性免疫反应性材料（?5 mIU/mL）：
– 当稀释比 ?1/200（如 1/50）时，不报告浓度值 ?1 000 mIU/mL（乘以稀释系数后的值）的稀释后样本的化验结果。
采用未稀释的样本重新化验。
– 当稀释比更高（即 >1/200）时，不报告浓度值 ?5 000 mIU/mL（乘以稀释系数后的值）的稀释后样本的化验结果。采
用较小的稀释系数或未稀释的样本重新化验。
操作步骤
对于每一次独立的化验，VITROS 总人绒毛膜促性腺激素 ? 亚单位 (?-hCG) 实验需要 25 μL 样本、定标品或质控品。该体积没有考虑所选样本容器的最小样本量。
每换用一个新批号试剂或定标间隔时间超过 28 天时，进行 VITROS 总人绒毛膜促性腺激素 ? 亚单位 (?-hCG) 实验都需要重新定标。在每次对系统维修保养操作后或质控结果失控时，进行 VITROS 总人绒毛膜促性腺激素 ? 亚单位 (?-hCG) 实验也需要重新定标。
有关诊断系统操作的详细说明，请参阅《VITROS 免疫诊断系统操作指南》第 4 章至第 7 章。概述如下：
1. 扫描实验方案卡以将新实验方案载入系统。然后会在 Sample Programming（样本编程）屏幕上显示实验选择按钮。对于
每个新试剂批次，扫描其批次定标卡以输入批次特异的定标和有效期信息。
2. 打开锡箔袋，然后取出试剂包。从自动装载口装载试剂包，或使用 Reagent Management - View by Reagent（试剂管理
－按试剂查看）屏幕上的 Unload/Load（卸载/装载）按钮装载试剂包。 注释：
请不要使用损坏或密封不严的产品。
3. 将样本装载到通用的样本架，需要时使用适配器（若需要，样本可使用条码）。在每个样本旁边放置一个一次性吸头，
然后将样本架装载到系统中。使用 Sample Programming（样本编程）屏幕定义样本编程。启动取样操作，所有样本处理步骤将自动执行。
4. 按照与处理样本相同的方式处理定标品。将分装的定标品移入样本容器（考虑容器的最小容积），贴上提供的标识条
码。如果使用了条码标签，则无需编程定标品；以任意顺序装载定标品后，将自动启动定标。
结果
修改的四参数罗吉斯曲线拟合函数用于建立批次定标卡上编码的 Master（总）定标曲线。定标过程就是通过 Master（主）定标曲线来重建一个有效的、存储于系统内的标准曲线。有关进一步详情，请参阅定标品使用说明。VITROS 系统会自动计算结果。
质量控制
? 进入 Options & Configuration - Review/User Calibrations（选项和配置－查看/用户手工定标）屏幕，然后根据 View Cal
Parameters（查看定标参数）中详细描述的一系列质量参数来评估定标结果。如果不满足任何已定义性能参数范围都将在定标报告上注明。有关定标失败之后要采取的操作，请参阅《操作指南》第 8 章“结果查询”。
? 对于超出参考范围的患者样本值，将显示“LO”或“HI”。当质控值偏离定义的基线均值 ?2 个标准差时，将对质控值进
行标记。
? 任何单个参数都不能完全描述曲线拟合的性质。定标报告应与质控值一起使用来判断定标的有效性。 ? 如果质控结果超出可接受的范围，请在决定发报告之前分析原因。
版本 1.0 出版物编号 GEM1075_ZH 3
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实验的局限性
? 假如 hCG 结果与临床观察不符并且持续升高，应该进行尿 hCG 实验，或者在其它不同的分析系统上重复血清或血
浆实验，以确证总 hCG 结果的可靠性。10
? hCG 结果的判定必须联系患者的整个临床资料包括其它实验的检测结果、临床表现及症状。
? 血清或血浆样本中的嗜异性抗体（如人抗鼠抗体 (HAMA)）、非特异性蛋白结合物和类 hCG 等物质的存在，会引起测量
结果假性升高。10–15
? 血清或血浆中的嗜异体抗体会对免疫分析产生干扰。1620此类抗体可能存在于经常接触动物者或在免疫治疗中使用动物蛋
白的血液样本中。2122
? 尽管嗜异性抗体的分布情况还不明了，但有报道称 3.4% 的健康人存在嗜异性抗体。23嗜异性抗体对实验的干扰取决于个
体接触动物或动物蛋白质的程度以及免疫分析实验的特性。本试剂盒或任何其它诊断试剂盒的检测结果应用与判定都必须联系病人的整体临床表现。
? 含有甘油三脂 (33.9 mmol/L)、血红蛋白 (0.7 g/L) 或胆红素 (0.684 mmol/L) 的样本对本实验的干扰小于 10%。请勿使用浑
浊的样本。在口服或静脉注射生物素后，血清中生物素的水平会持续升高最久达 24 小时。含有 5 ng 生物素/mL 的样本对实验的干扰小于 10%。
? 样本中的 hCG 浓度大于 300 000 mIU/mL 时会产生因 hCG 浓度过高所导致的钩带效应，使得检测结果反而在定标范围
内。某些临床情况（例如葡萄胎、绒毛膜癌、某些睾丸癌）会导致 hCG 的浓度非常高，但在化验未稀释样本时会由于高剂量钩带效应使化验结果反而在检测范围内。hCG 的预期浓度 >300 000 mIU/mL 的样本应进行适当倍数的稀释后化验。对这样的样本进行稀释会导致结果与未稀释的结果不匹配。需要时进行稀释，直到稀释后样本的结果在实验检测范围内。不要报告未稀释样本的结果。
? 对接受外源性 hCG 治疗后 7–10 天内采集的样本，仍可得到可检测性实验结果。当使用 hCG 实验来确定妊娠时，应注意
排除 hCG 分泌性肿瘤的可能性。
? 非常低水平的 hCG 并不能排除妊娠的可能性。如果怀疑妊娠，应在 48 小时以后再次采集样本进行检测。
期望值
每个实验室都应确定其所服务人群的有效参考范围。以下确定的范围区间，仅供参考。在正常、非妊娠个体的血浆中测定的总 ?-hCG 浓度 <6.15 mIU/mL（255 份样本）。
对各个孕龄怀孕妇女血清总 ?-hCG 浓度的检测结果总结如下：
三个月 最初 最初 最初 最初 最初 最初 最初 最初 最初 中间 后 孕周 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13-27 28-40 均值 50584 51517 72671 87943 103486 103783 88250 92463 68216 23700* 17000* 范围 4700-132800 3660-134000 22600-135000 44800-148600 52600-191800 57400-196000 51000-189400 6480-192400 6740-129000 8200-147200 2320-91800 数量 15 15 14 14 14 12 12 14 15 44 45 * 中位值，使用单位 mIU/mL
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?-hCG
实验特性
定标与定标的溯源性
VITROS 总人绒毛膜促性腺激素 ? 亚单位 (?-hCG) 实验的定标范围为 0-1 000 mIU/mL（可溯源至根据第 3 次国际标准 75/537 定标的室内参考定标品）。
精确度
对一组 103 份不同临床类型患者的样本分别使用 VITROS 总人绒毛膜促性腺激素 ? 亚单位 (?-hCG) 实验和一种市售试剂盒 (X) 进行 ?-hCG 检测，并对两者所得结果进行相关性研究。VITROS 总人绒毛膜促性腺激素 ? 亚单位 (?-hCG) 实验的测定结果范围为 1.19 至 997 mIU/mL，市售试剂盒的测定结果范围为 1.66 至 839 mIU/mL。
VITROS 总人绒毛膜促性腺激素 ? 亚单位 (?-hCG) 实验结果 = 1.21 x X +1.60（mIU/mL），相关系数为 0.996。
精密度
精密度按照美国临床实验室标准委员会实验方案 EP5-T224 进行了评估。每天分别对 3种冻干质控血清的两等份样本进行2 次单独的化验，至少化验 20 天。这个实验的执行是使用 2 个试剂批次在不同的系统上完成的。所得数据可代表性地反映产品性能。
表 1：精密度 天内 代表性浓度 mIU/mL 10.8 24.1 199 * 均数平方根 (RMS)
每次定标 变异系数 (%)* 4.0 3.5 4.4 标准差* 0.706 1.31 12.1 变异系数 (%)* 6.7 5.5 6.2 实验室内 标准差* 0.753 1.51 15.1 变异系数 (%)* 6.9 6.1 7.3 标准差* 0.424 0.835 8.73 天内：所有测试中精密度重复检测值的均值。
每次定标：总精密度，含每次测试、测试之间和日间变化的加权值。
实验室内：反映重新定标是否影响总精密度的指标，通过计算同一批次试剂的 4 次定标数据获得。
灵敏度
分析灵敏度定义为：含该分析物的样本通过 20 次的重复测定确定的平均值偏差两个标准差的浓度。VITROS 总人绒毛膜促性腺激素 ? 亚单位 (?-hCG) 实验的分析灵敏度为 0.50 mIU/mL。
特异性
下列潜在的交叉反应性物质对 VITROS 总人绒毛膜促性腺激素 ? 亚单位 (?-hCG) 实验的干扰小于 5%（实际测定浓度在括号内列出）：TSH（250 μIU/mL）和 LH（400 mIU/mL）；FSH（400 mIU/mL）的干扰小于 10%。
版本 1.0 出版物编号 GEM1075_ZH 5