肿瘤细胞侵袭和迁移研究的实验技术改进(2)

2021-05-13 09:54

2.实验技术改进建议

在肿瘤细胞的侵袭性与迁移性研究中,以上的几种实验技术,在一定程度上都能对侵袭性和迁移性做出较为准确的评价,针对其优点进行改进,使得实验结果更为可靠。

Western blot实验可定量检测蛋白表达水平,但是此种方法无法定位蛋白在细胞中的位置,如果一旦蛋白在细胞内表达的部位发生变化,研究者无法获得相应的结果。因此可用免疫组化的方法定位蛋白的位置,作为Western blot的补充实验,两种实验技术相结合不仅可量化目标蛋白的表达水平,还能在细胞中定位目标蛋白的表达位置。

Transwell小室要严格按照实验步骤,认真仔细的操作,要求在实验设计时,应当考虑全面,如培养基中小牛血清等物质会诱导肿瘤细胞迁移,所以在实验中,小室内部应当使用无血清培养基,小室外使用含少量血清的培养基,肿瘤细胞的趋化性会诱导其向小室外迁移。为了模拟肿瘤细胞在体内的状态,在接种肿瘤细胞之前,在小室内铺上一层基质胶模拟人体内的细胞外基质,肿瘤细胞需要分泌一些侵袭和迁移相关的蛋白将基质胶溶解,才能迁移到小室外。Transwell小室测定法在改进之后,肿瘤细胞发生迁移时所处的环境更加近似人体内部,得到的实验结果更为可靠。

与以上几种实验技术相比,划痕实验对设备仪器的要求较低,为了提高划痕实验可靠性,实验人员首先要对整个实验过程熟悉,还应注意以下几点,在划痕时用枪尖靠着直尺划线,得到的划痕较为均匀和笔直;同一个样本的不同位置重复划线,计算迁移距离时多取几个点,降低实验的误差。

肿瘤细胞的侵袭和迁移特性的研究对于肿瘤的临床治疗有着重要的现实意义,而实验技术对于基础研究的发展是非常重要的,对实验技术进行改革,可有效的推动基础研究的进展。研究肿瘤细胞侵袭和迁移特性的几种实验技术各有其优缺点,在实际工作中,科研工作者可根据自身的实际情况,将几种常用的实验技术结合起来,取长补短,得到的结果的可信度会更高。

【参考文献】

[1]Chen W,et al.Cancer statistics in China,2015[J].Ca A Cancer Journal for Clinicians,2016.66(2):115

[2]樊代明.论医学基础研究对临床工作的重要性[J].中华内科杂志,2006.45(7):531-532

[3]徐小艳,徐宪伟,王慧,等.肺腺癌中CD147、MMP-9和VEGF的表达及临床意义[J].临床与实验病理学杂志,2017(4):384-387

[4]李超,陈力,沈学远.Hsp70与肿瘤转移相关蛋白MMP-9,VEGF,E-cadherin和CD44v6对非小细胞肺癌转移的诊断价值分析[J].中国现代医学杂志,2014.24(15):30-34

[5]Huang Y F, et al. Association of MMP-2 and MMP-9 expression with recurrences in primary spontaneou

pneumothorax.[J].Kaohsiung Journal of Medical sciences, 2017.33(1):17

[6]张又枝,黄琦,任平.在Transwell小室中分离培养人脐静脉内皮细胞的研究[J].湖北科技学报(医学版),2015.29(2):96-97

[7]Fei Y,et al.Cathepsin L knockdown enhances curcumin-mediated inhibition of growth,migration, and invasion of glioma cells[J].Brain Research,2016.1646:580

[8]张凌志,邸菁,王运杰,等.Transwell小室筛选高侵袭性C6细胞MMP-2和TIMP-2的表达[J].中华肿瘤防治杂志,2005.12(10):742-745

肿瘤细胞侵袭和迁移研究的实验技术改进(2).doc 将本文的Word文档下载到电脑 下载失败或者文档不完整,请联系客服人员解决!

下一篇:政工师在妇女思想工作中的作用

相关阅读
本类排行
× 注册会员免费下载(下载后可以自由复制和排版)

马上注册会员

注:下载文档有可能“只有目录或者内容不全”等情况,请下载之前注意辨别,如果您已付费且无法下载或内容有问题,请联系我们协助你处理。
微信: QQ: