植物中I型酪蛋白激酶响应低温胁迫的研究进展

　　摘要低温是植物生长过程中遇到的主要环境胁迫因子之一,而植物响应低温胁迫的机制是一个较复杂的调控网络。综述了I型酪蛋白激酶在低温信号转导过程中发挥的作用并提出了展望,以期完善人们对植物体内低温信号调控网络的认识,为植物耐冷及冷适应提供理论指导。
　　关键词植物;低温;I型酪蛋白激酶;信号转导

　　在自然条件下,植物生长发育不可避免地受到盐碱、干旱、低温等极端环境的影响。其中,温度是影响植物生长、发育,甚至导致植物死亡的最关键的环境因子[1,2]。但植物对低温胁迫的响应并非是完全被动的,在长期的进化过程中,植物本身能够感知和转导逆境信号,启动相关基因的表达,进而激活相应的代谢调控途径,形成了一系列主动的应激和适应机制。
　　
　　1I型酪蛋白激酶响应低温信号
　　
　　近20年来,随着生物技术、蛋白质组学及分子生物学的发展,人们对植物抵御低温胁迫机制的研究越来越深入,认为低温可导致植物发生多种生理生化变化,这些变化直接或间接与低温下许多冷响应基因表达或发生特异性改变有关。目前,分离并鉴定的冷诱导基因主要有拟南芥中的lti140、lti78、cor15a等;大麦中的hva1、blt101和blt14;小麦中的wcs120、wcs200和cor39;以及水稻中的lip15[3]和I型酪蛋白激酶(Casein kinases I,CKI)基因OsCKI1[4]等。这些低温诱导基因除对低温产生应答外,部分还对激素、高盐、水分胁迫等作出响应,通过调控下游相关基因的表达对植物的抗逆性产生影响。
　　根据结构酪蛋白激酶主要分为I型和Ⅱ型两大类。其中,I型酪蛋白激酶是一类具有独特理化特性的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,主要分布在细胞质、细胞膜、细胞核及细胞骨架等部位[5,6]。1978年,Murray[7]等在大豆下胚轴中首次分离纯化得到与染色质相结合的CKI。2003年,Liu等[4]在水稻幼苗中首次分离并证明CKI家族成员OsCKI1参与调控细胞延伸及分裂从而影响水稻根部发育,并参与植物对外源激素的应答。研究指出,CKI主要通过磷酸化底物及自身磷酸化对各种代谢、信号转导、细胞分裂等路径进行调控,也可作为其他蛋白激酶的底物被磷酸化,从而参与蛋白质的级联磷酸化过程,在生命过程中发挥着重要作用[8,9]。而在4℃低温下,Liu研究结果表明OsCKI1表达模式发生改变,基因反义转基因植株电解质渗漏率增大,质膜透性有所增加,受害严重;而脯氨酸、蛋白质等低温相关指标均显示反义转基因植株冷适应及抗寒性低于对照,推测OsCKI1对提高植物冷适应及抗寒性有一定作用,而该基因表达量的降低或缺失导致植株易受低温伤害。应用细胞免疫学的方法,结合微管特异性荧光探针,Liu还对低温下OsCKI1反义转基因植株根部细胞骨架进行了观察,结果显示对照植株根部微管在低温下表现为快速、不可逆的解聚;而转基因植株根部微管未出现植物冷适应过程中微管的瞬时解聚过程,推测反义植株中该基因表达量的减少降低了植物冷适应的能力,而基因OsCKI1可能具有提高植物适应及抵抗低温的能力[4]。
　　
　　2微管结合蛋白与I型酪蛋白激酶在植物冷适应过程中可能的协同性及机制
　　
　　微管结合蛋白(microtubule-associated proteins,MAPs),即植物微管周围存在的一类可直接与微管结合并对微管有调控作用的蛋白[10],在抵御或减弱植物低温伤害、维持微管冷稳定性中发挥了重要作用。Sloboda和Rosenbaum的研究显示[11],离体微管在4℃下的冷稳定性与MAP的存在密切相关,MAP与微管蛋白的比率增加,微管的冷稳定性就提高。Schleicher指出,MAP对微管稳定性的调控与其磷酸化和去磷酸化状态有关,因此易诱发磷酸化的Ca2+和钙调蛋白(CaM)对微管的稳定性有重要的调控作用[12]。较低浓度的Ca2+,直接或通过CaM促进微管的组装[13];但较高水平的Ca2+,会使CaM-磷酸激酶活化,进而磷酸化MAP在微管末端形成的“封帽”并使之解离,从而使微管稳定性减弱,进而解聚[14]。微管结合蛋白可间接参与到植物冷适应及抗寒过程中,而前期试验结果证明CKI在植物抵抗低温寒害中可能也具有一定功能,两者间是否存在互作及可能的作用机制仍未见明确报道。在动物中的研究表明,CKI可通过与MAP相互作用,进而调控微管空间聚合来行使功能。2000年,Behrend等[15]在受损伤的哺乳动物细胞中,检测到casein kinase 1 delta(CK1delta)与间期及分裂期细胞中微管紧密结合,并随损伤程度加大其结合力提高。也有报道指出,tau蛋白作为动物神经细胞中主要的微管结合蛋白,其过度磷酸化会使tau蛋白失去其促微管组装和维持微管稳定的生物学功能,从而导致神经系统微管结构破坏,即发生阿尔茨海默症,而CKI等蛋白激酶与微管结合蛋白间存在互作,蛋白激酶的磷酸化作用可不同程度地抑制tau蛋白的功能,从而维持微管结构的稳定性[16]。