中国生物制品学杂志2012年5月第25卷第5期Chin J Biologicals May 2012，Vol.25No.5
噬菌体（Bacteriophage ）是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等的微生物的总称，以细菌为宿主进行
复制和繁殖。噬菌体裂解酶（Bacteriophage lysins ）是噬菌体在感细菌后期表达的一类细胞壁水解酶，该酶通过水解氨基糖之间的糖苷键、细胞壁肽聚糖上的酰胺键或肽内氨基酸残基间的连接键，达到裂解细菌的目的，然后释放出子代噬菌体，用于感染其他细菌。
1.噬菌体及其裂解酶
噬菌体是一种特异性感染细菌的病毒，在地球上分布非常广泛，分别由英国的Twort 和法国的D ′Herelle 在1915年和1917年独立发现［1-2］。噬菌体根据核酸的特点，可以分为单链RNA 噬菌体、双链RNA 噬菌体、单链DNA 噬菌体和双链DNA 噬菌体。噬菌体在宿主菌体内复制产生子代噬菌体，为了释放子代噬菌体，在数百万年间，噬菌体进化出了高效裂解细菌系统。小分子噬菌体（ssRNA 和ssDNA ）通过编码噬菌体相关蛋白作用于肽聚糖合成酶，从而干扰宿主菌的细胞壁的生物合成；大分子噬菌体（dsDNA ）则进化出高效的裂解酶系统，特异性地作用于细胞壁上的肽聚糖，破坏细胞壁，从而导致细菌裂解。但
是裂解酶通常没有信号序列，需要另一种蛋白质———穴蛋白去达到作用位点，从而发挥裂解作用。多数
噬菌体具有编码3种细胞壁水解酶的的基因，分别为溶菌酶（Lysozyme ），水解氨基糖之间的糖苷键；酰
胺酶（N -acetylmuramoyl -L -alanine amidase ），水解N -乙酰胞壁酸和L -丙氨酸之间的酰胺键和内肽酶（E n －dopeptidases ），水解肽交联桥。噬菌体裂解酶在结构上具有相似性，均含有两个结构域，即一个决定该酶催化活性的N -端结构域（催化域）和一个决定细胞结合位点的C -端结构域，它们之间由一个小片段连接［3］。同一类裂解酶的催化域高度保守，而细胞结合域可变。2.
已克隆的裂解酶及其分类近年来，抗生素的滥用导致耐药性菌株不断出现，且耐药性也在不断增强，因此，寻找除抗生素治疗以外的方法来治疗耐药菌感染的疾病已成为近年来研究的热点。噬菌体作为细菌的天敌，在预防和治疗细菌性疾病方面具有先天优势，噬菌体裂解酶治疗便成为一个非常经典的方法，具有较高的研究价值。近年来，国内外很多科研工作者通过克隆，表达出部分裂解酶蛋白，研究比较多的一些噬菌体裂解酶见表1。3.
裂解酶的重组研究
裂解酶作为一种新型的抗菌物质，具有广阔的
·综述
·噬菌体裂解酶的研究进展
张瑞安1，2，刘军2，冯书章1，
2，3
【摘要】噬菌体裂解酶是噬菌体在感染细菌后期表达的一类细胞壁水解酶，具有酶活性和底物特异性。多数噬菌体具有编码3种细胞壁水解酶即溶菌酶、酰胺酶和内肽酶的基因。本文综述了噬菌体裂解酶重组及其应用的研究，并探讨了近年来重组裂解酶的研究进展。
【关键词】噬菌体；裂解酶类；种属特异性
【中国图书分类号】Q939.48【文献标识码】A 【文章编号】1004-5503（2012）05-657-04
Progress in research on bacteriophage lysins
ZHANG Rui -an *,LIU Jun,FENG Shu -zhang （College of Animal Science and Technology,Jilin Agricultural Uni －versity,Changchun 130118,China ）
【Abstract 】Bacteriophage lysins are cell wall lytic enzymes expressed in the late phase of bacterial infection,with enzyme ac －tivity and substrate specificity.Most of bacteriophages contain the genes encoding three kinds of cell wall lytic enzymes,i.e.lysozyme,N -acetylmuramoyl -L -alanine amidase and endopeptidases.This paper reviews the recombination and application of bacteriophage lysins as well as the progress in research on recombinant lysins in recent years.【Key words 】Bacteriophage;Lysins;Species specificity
作者单位：1吉林农业大学动物科学技术学院（长春130118）；2军事
医学科学院军事兽医研究所（长春130122）；3吉林省人兽共患病控制与预防中心（长春130122）．
通讯作者：冯书章，E-mail ：shuzhangf＠yahoo．com
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中国生物制品学杂志2012年5月第25卷第5期Chin J Biologicals May2012，Vol.25No.5
应用前景。如果采用常规的方法制备，存在工序复杂且操作条件难以控制等问题，不适宜大规模生产，且成本较高。因此可利用基因重组技术，在基因工程菌中表达外源目的蛋白，是目前大量获得目的蛋白的主要方法，从而解决高效制备裂解酶的问题，且成本较低。表2是国内外应用的部分重组裂解酶。
表1国内外研究较多的噬菌体裂解酶
Tab1.Bacteriophage lysins as focuses of study in the world
来源裂解酶基因长度（bp）裂解活性参考文献分支杆菌LysA1155裂酯酶4
LysB1146裂酯酶5
Gene1049136裂酯酶6
大肠杆菌E276裂解酶7
肺炎球菌Cpl-11017酰胺酶8
Ejl溶菌酶9
Ejh穴蛋白9
李斯特菌PlyPSA870内肽酶10
Ply118846内肽酶10
金黄葡萄球菌Lysp954753溶菌酶11
LysK溶菌酶12
Ply1871887酰胺酶3
炭疽杆菌PlyG702酰胺酶13
乳酸杆菌Hyb5465穴蛋白14
Lyb51257溶菌酶14
布鲁菌LzA882溶菌酶15
链球菌PlyC1608溶菌酶16
LySMP1446糖苷酶17
Schuch等［18］首次报道了噬菌体裂解酶在治疗细菌感染方面的应用。Vasala等［19］将乳酸杆菌噬菌体LL-H中的一段基因克隆到大肠杆菌中，表达出具有溶解细胞壁作用的酶。Kikkawa等［20］研究炭疽杆菌裂解酶PlyG，经克隆、表达和纯化裂解酶后，利用ELISA定性和定量检测发现，裂解酶PlyG具有裂解B类炭疽杆菌的作用，其裂解谱比较狭窄。Nelson 等［21］用纯化的链球菌裂解酶C1体外感染链球菌和大肠杆菌，结果对部分链球菌具有很强的杀灭作用，而对大肠杆菌没有作用，表明链球菌裂解酶具有种属特异性。Djurkovic等［22］利用链球菌裂解酶Cpl-1和几种抗生素共同作用于青霉素抗性的链球菌菌株，结果发现裂解酶Cpl-1与青霉素发挥出了协同作用，提示我们可以利用重组裂解酶与抗生素共同作用，杀灭细菌。
我国自2004年起有关于噬菌体裂解酶的报道，多以综述的形式对噬菌体裂解酶进行探讨。近几年开始了研究利用噬菌体裂解酶基因进行克隆并表达裂解酶。表2国内外应用的重组裂解酶