生命科学与技术系 生化技术综合实验报告
设计（论文）题目鸡蛋中卵磷脂的提取与鉴定
姓 名 学 号 所 属 系 专业年级 电子邮箱
指导教师 电子邮箱
年 月
摘 要
卵磷脂是 甘油、胆碱、磷酸、饱和及不饱和脂肪酸组成的一种磷脂类物质，
它是构成细胞膜、核膜、质体膜等生物膜的 本成份 、研究发现卵磷脂具延缓衰老、促进神经传导、提高大脑活动、增强记忆力，促进脂肪代谢、防止出现脂肪肝、降低血清胆固醇等方面的作用。被英国科学家喻为“健脑的黄金、养心的极品”。在西方国家卵磷脂被誉为与蛋白质、维生素并列的“第三营养素”。卵磷脂在动植物体内分布广泛．其中以蛋黄中含量最为丰富。
卵磷脂按照其纯度的高低，一般分为 PC50、PC 60 、PC 70、PC80、PC 90、PC95等产品形式。最高可以提纯到98%，因为其纯度越高，氧化性能越强，故提纯到98%的卵磷脂需要做氢化处理。然后保存。未经过氢化处理的卵磷脂，一般要求在充氮的密封容器中。
纯净的卵磷脂常温下为一种无色无味的白色固体，由于制取或精制方法、储存条件不同而呈现淡黄色至棕色。
利用95％乙醇在蛋黄溶液里进行浸提取，再加入乙醚过滤，加入一定量的丙酮在旋转干燥仪器中把乙醇蒸发出来，取溶胶性的物质，加入丙酮冲洗除杂，冲洗多次取得粗品，让后再加入无水乙醇溶解，加入金属沉淀剂进行精提取，取出少量精品，在碱性条件下溶解，分别用钼酸铵，斐林试剂，滤纸，氢氧化钠，对卵磷脂进行定性检测
关键词：蛋黄卵磷脂；提取；纯化 ；鉴定 。
卵磷脂的提取与鉴定
卵磷脂(lecithin) 是一种含磷的类脂类生理活性物质, 同时又是一种天然表面活性剂 [1～2], 化学名称为磷脂酰胆碱，它是构成细胞膜、核膜、质体膜等生物膜的基本成份，空间结构的卵磷脂分子是由一个极性的“头部”(甘油和胆碱磷酸脂部分) 和两条非极性的 “尾巴”(两个依附于甘油主框架上的脂肪酸) 组成, 它是典型的两性电解质 [3] 主要集中在大脑、神经系统、免疫系统及心、肝、肾、生殖腺等重要器官内) ,是人体必需的胆碱和必需脂肪酸的重要来源 [4] 纯净的卵磷脂常温下为一种无色无味的白色固体，由于制取或精制方法、储存条件不同而呈现淡黄色至棕色。
目前, 我国已经有10余家企业生产大豆卵磷脂, 而且均是小规模的生产装置, 还未形成工业化生产规模, 技术水平也落后于世界先进水平 [5], 生产蛋黄卵磷脂的厂家则更少。国内的卵磷脂产量远远不能满足市场需要, 因此大部分卵磷脂特别是高纯度卵磷脂仍然依靠进口。动物性原料中蛋黄含卵磷脂最多, 达干物质总重的8%～10%。
一． 实验目的意义：
1.1掌握卵磷脂的提取方法及其鉴定方法， 对卵磷脂进行定性检测，了解卵磷脂的性质，
1.2掌握离心干燥技术，熟练应用提纯技术 1.3 掌握抽滤等的基本操作
二． 实验原理
1.1卵磷脂在脑、神经组织、肝、肾上腺和红细胞中含量较多。卵磷脂易溶于乙醇、乙醚等脂溶剂，可利用此溶剂提取。由于卵磷脂不溶于丙酮，可以用丙酮多次冲洗除去一部分杂质，金属离子复合沉淀
法进行精提纯，新提取的卵磷脂为白色蜡状物，新提取的卵磷脂为 白
色，当与空气接触后，其所含不饱和脂肪酸会被氧化而使卵磷脂呈黄褐色。卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、胆碱和磷酸盐。
甘油与硫酸氢钾共热，可 生成具有特殊臭味的丙烯醛；磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵作用，生成黄色的磷钼酸沉淀；胆碱在碱的进一步作用下生成无色且具有氨和鱼腥气味的三甲胺。这样通 过对分解产物的检验可以对卵磷脂进行鉴定。
三． 实验材料和方法
1试验材料与试剂
新鲜鸡蛋、无水乙醇、95％乙醇、乙醚、丙酮、甲醇.会属沉淀剂(ZnCI2)、丙酮、蒸馏水、溴的四氯化碳、氢氧化钠、红色石蕊试纸、钼酸铵、硫酸氢钾
2试验仪器
三角瓶、烧杯、试管、真空冷冻干燥箱、磁力搅拌器、玻璃棒、
电子天平、冷冻干燥器、 冰箱、离心机、 水浴锅 试管夹、量筒、滤布、漏斗。
3试验方法
（1） 蛋黄卯磷脂的粗提、
首先将鸡蛋打破，称量鸡蛋300克 除去蛋白，，将蛋黄放人洁净的带塞的三角瓶中．在称量蛋黄
加入95％乙醇(用量12m]，g)浸取，于磁力搅拌器搅拌60min后，静置15min．然后加
人乙醚(用量为乙醇用量的1／3)，搅拌15min后静置15min，过滤三次，将 滤液收集放旋转蒸发器中低温、减压浓缩 ．
加入一定量的丙酮除杂．卵磷脂即沉淀出来．过滤，用丙酮冲洗几次，至冲洗液无色．即得蛋黄卯磷脂粗晶存放于冰箱里保存。[6]
图一，过滤除杂
图二，卵磷脂的粗提取
(2) 蛋黄卵磷脂的纯化
金属离子复合沉淀法
把卵磷脂粗品溶于无水乙醇中．加入金属沉淀剂40％的zncl2水
溶液．待生成沉淀后，分离出沉淀物．而后加入丙酮洗涤，然后放于真空中冷冻干燥仪中干燥．最终得到精制的卵磷脂．[7]
更改试剂，由于实验室里没有zncl2，所以用znso4代替，由于丙酮不能除去znso4，所以在过滤后采用氯仿把卵磷脂溶解沉淀的方法，离心除去znso4，然后在真空冷冻干燥仪中干燥得到纯品。