2014-2015第二学期细胞工程期中考试试卷
一、名词解释
1细胞工程 2.外植体 3.细胞株 4.愈伤组织 5离体无性繁殖 6.继代培养 7.体细胞杂交 8.细胞分化 9.细胞系 10.细胞再分化
11.人工种子 12.离体受精 13.悬浮培养 14.看护培养 15.生质体
16.传代 17.克隆 18.原代培养 19.有限细胞系 20.永久细胞系 二、填空题
1.实验室的物理防护是由隔离的设备、__________、实验实施等三个方面组成，根据其密封程度的不同，分为____________四个生物安全等级。典型的P4实验室由更衣区、过滤区、________、_________、核心区组成。
2.细胞系是原代培养经初步纯化获得的以_____________为主的、能在体外长期生存的_________细胞群体。
3.细胞株是指从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由_________增殖形成的细胞群。
4.干细胞是一类具有______和_____的细胞。干细胞的增殖特性为_______和_____。 5.培养细胞的生长特点为________、________和_______。 6.植物细胞培养的原理是基于_______________。
7.植物细胞悬浮培养的方法为___________、__________和___________。 8.植物组织培养中培养材料的消毒过程中，消毒的基本原则是_____________________。
9.细胞生长测定的一般方法为：细胞计数、测定__________、____________。 10.体外培养的细胞根据其生长方式主要分为__________和___________。 11.人工种子的组分包括_________、_________和_________。 12.细胞融合主要经过了两原生质体或细胞互相靠近、细胞桥形成、胞质渗透、________几个步骤。其中__________是最关键的一步。
13.花粉单倍体植株的鉴定方法有形态鉴定、细胞学鉴定、__________、___________。
14.胚胎工程主要是对哺乳类动物的_______进行某种人为的工程技术操作，然后让它继续发育， 获得人们所需要的成体动物。
15.培养条件下动物贴壁细胞可分为成_______；_______；_______；_______四种类型。 16.原生质体酶解液中有高浓度的甘露醇，以保持一定的________；同时含_______，以利质膜稳定。
17.根据其分化潜能的大小，干细胞可分为__________；__________；__________。其中_________干细胞培养时最易分化
18.诱变植物发生体细胞变异的方法有_________；_________；________。 19.根据融合时细胞的完整程度，原生质体融合可分为________和_________两大类型。 20.根据包被的程度，可将人工种子分为三大类：_______________；______________；______________________。
三、选择题
1.不适合用胰蛋白酶消化的组织是（ ） A.肝 B.肾 C.上皮组织 D.乳腺
2.下列有关动物细胞培养的叙述不正确的是（ ） A.通过动物细胞培养可获得大量的细胞分泌蛋白
B．动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理，以使细胞分散 C．细胞癌变都发生于原代培养过程中
D．目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内的，以保持其正常核型 3. 尽管各种合成培养基给动物细胞培养带来极大方便，但许多实验表明，单纯使用合成培养基细胞的贴壁增殖效果常常不理想。因此，在使用时通常仍然需要加入一定量的 ( )
A.平衡盐溶液 B. 琼脂糖C. 动物血清D. 甘露醇 4.制备人工种子的关键是控制( )
A.胚状体的同步发育 B.人工种皮的同步发育 C.胚状体的单独发育 D.人工种皮的单独发育
5.细胞融合中使用（ ）方法可以在显微镜下直接定向诱导细胞融合。
A.仙台病毒法 B.PEG诱导 C.电融合诱导法 D.高Ca+和pH诱导法 6.中胚层来源的细胞在体外培养时一般表现为哪种形态（ ）
A.成纤维细胞型细胞B. 多形型细胞 C.上皮型细胞D.游走型细胞
7.在每一代贴附生长细胞的生长过程中,哪一个时期的细胞数随时间变化成倍增长,活力最佳, 最适合进行实验研究（ ）
A.稳定期B.衰亡期C.潜伏期 D.对数生长期
8.以下哪种方法或技术适合进行动物细胞的大规模培养？（ ）
A.悬滴培养法 B.培养瓶培养法 C.旋转管培养法 D.多孔载体培养技术 9.单克隆抗体制备选择亲本时应选择（ ） A.骨髓瘤细胞系和免疫动物属于同一品系 B.骨髓瘤细胞系和免疫动物属于不同品系 C.B淋巴细胞和骨髓瘤属细胞属于不同品系 D.B淋巴细胞与骨髓瘤细胞无亲缘关系
10. 下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，正确的是（ ） A．卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加 B．胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割
C．胚胎干细胞具有细胞核大、核仁小和蛋白质合成旺盛等特点 D．胚胎干细胞是一类未分化细胞，可从早期胚胎中分离获取 11.( )的建立是动物细胞规模化培养的前体。
A.原代细胞系B.继代细胞系C.永久细胞系D.有限细胞系 12．细胞平板培养的效果一般用（ ）来衡量。 A.生长率B.分裂率C.再生率D.植板率
13.影响体细胞胚发生的激素因素中，应用最为广泛的是（ ）。 A...IBA ??????????????????? B..IIAA ???????? C.BA D.2,4-D 14.动物细胞培养渗透压的维持一般采用（ ）。
A.平衡盐溶液B.蔗糖溶液C.无机盐溶液D.有机物溶液
15.尽管各种合成培养基给动物细胞培养带来极大方便，但许多实验表明，单纯使用合成培养基细胞的贴壁增殖效果常常不理想。因此，在使用时通常仍然需要加入一定量的( )。
A.平衡盐溶液B.琼脂糖C.动物血清D.甘露醇
16.高压灭菌引起培养基pH变化，一般灭菌后培养基pH将( )。 A.下降0.5左右B.上升0.5左右C.下降1.5左右D.上升1.5左右 17．细胞株的特点是（ ）。
A．遗传物质没有改变，可以无限传代
B．遗传物质发生改变，且有癌变特点，可以无限传代
C．遗传物质没有改变，不可无限传代 D．遗传物质发生改变，不可无限传代 18.不属于干细胞特征的是（ ）
A.多呈圆形或椭圆形B.核/质比大C.具有多能性D.增殖速度极快 19.不能诱导细胞融合的是（ ）
A.PEG B.电激 C.仙台病毒 D.慢病毒 20.不能用于分离外周血中血细胞的方法（ ）
A.自然沉降法B.差异沉降法C.低速离心法D.氯化铵分离法 四．判断题
1、接种器械一般采用照射灭菌。（ ）
2、IAA通常采用湿热灭菌。（ ） 3、紫外照射灭菌的时间为5h。（ ）
4、细胞松弛素B能引起植物原生质体排核，因此可以获得胞质体。（ ） 5、控制细胞内外水的冻结状态是细胞冰冻保存技术的关键。（ ） 6、能被酚臧红花染成红色的细胞为活细胞。（ ）
7、选择性抗生素浓度越高，假转化体比例越低，选择效果越好。（ ） 8、胚培养可用于克服杂种不活性。（ ）
9、分离原生质体的原始细胞状态影响其脱分化的进行。（ ） 10、一般认为原生质体出芽与培养基成分有密切关系。（ ） 11、植物快速繁殖中，繁殖系数越高越好。（ ）
12 、褐变是植物离体组织中的多酚氧化酶被激活造成的。（ ） 13 、继代培养次数越多，变异率越高。（ ） 14、油污严重的器皿应采用酸洗法。（ ）
15、不同来源的原生质体融合需要诱导才能实现。（ ）
16、种质超低温保存成功的关键是降温冰冻过程中避免细胞内脱水。（ ） 17、细胞密度是影响细胞培养的重要因素。（ ）
18、原生质体受体系统是最好和应用最广的遗传转化受体系统。（ ）
19、玻璃化法保存的材料宜采用慢速化冻，以减少次生结冰对细胞的伤害。（ ） 20、原生质体培养是体细胞杂交的基础。（ ）
五．简答题
1.简述DNSO在细胞冻存时的应用。 2.MTT比色法的主要原理是什么？
3.影响细胞生长的因素有哪些？为什么？ 4.胚状体同步发育方法及原理
5.试分析论述利用细胞培养生产植物次生产物时，提高细胞次生产物产量的途径。