任务2-2 测定水中总氮含量
——碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法（HJ
636-2012）
一、实验目的
1、了解水中总氮的测定意义和原理； 2、掌握水中总氮的测定方法。 二、实验原理
在 120～124℃下，碱性过硫酸钾溶液使样品中含氮化合物的氮转化为硝酸盐，采用紫外分光光度法于波长 220nm 和 275nm 处，分别测定吸光度 A220和 A275，按下列公式计算校正吸光度 A，总氮（以 N 计）含量与校正吸光度 A 成正比。
A＝A220－2A275
三、实验仪器和试剂 1、实验仪器
（1）紫外分光光度计：具10mm石英比色皿。 （2）高压蒸汽灭菌器：最高工作压力不低于1.1～1.4kg/cm；最高工作温度不低于120～124℃。
（3）具塞磨口玻璃比色管：25mL。 2、药品
除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为无氨水。
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（1）盐酸溶液：1+9。 （2）氢氧化钠溶液：20g/L。
（3）碱性过硫酸钾溶液：称取40.0g过硫酸钾溶于600mL水中（可置于50℃水浴中加热至全部溶解）；另称取15.0g氢氧化钠溶于300mL水中。待氢氧化钠溶液温度冷却至室温后，混合两种溶液定容至1000mL，存放于聚乙烯瓶中，可保存一周。
（4）硝酸钾标准贮备液：ρ（N）=100mg/L
称取0.7218g硝酸钾溶于适量水中，移至1000mL容量瓶中，用水稀释至标线，混匀。也可直接购买市售有证标准溶液。
（5）硝酸钾标准使用液：ρ（N）=10.0mg/L
移取10.00mL硝酸钾标准贮备液至100mL容量瓶中，用水稀释至标线，混匀，临用现配。
四、实验步骤 1、校准曲线的绘制
分别移取0.00、0.20、0.50、1.00、3.00和7.00mL硝酸钾标准使用液于25mL具塞磨口玻璃比色管中，加水稀释至10.0mL，再加入5.00mL碱性过硫酸钾溶液，塞紧管塞，用纱布和线绳扎紧管塞，以防弹出。将比色管置于高压蒸汽灭菌器中，加热至顶压阀吹气，关阀，继续加热至120℃开始计时，保持温度在120～124℃之间30min。自然冷却、开
阀放气，移去外盖，取出比色管冷却至室温，按住管塞将比色管中的液体颠倒混匀2～3次。（若比色管在消解过程中出现管口或管塞破裂，应重新取样分析）
每个比色管分别加入1.0mL盐酸溶液（1+9），用水稀释至25mL标线，盖塞混匀。使用10mm石英比色皿，在紫外分光光度计上，以水作参比，分别于波长220nm和275nm处测定吸光度。零浓度的校正吸光度Ab、其他标准系列的校正吸光度As及其差值Ar按下列公式计算。以总氮（以N计）含量（μg）为横坐标，对应Ar值为纵坐标，绘制校准曲线。
Ab=Ab220?2Ab275As=As220?2As275Ar?As?Ab
式中：Ab——零浓度（空白）溶液的校正吸光度；
Ab220——零浓度（空白）溶液于波长 220nm 处的吸光度； Ab275——零浓度（空白）溶液于波长 275nm 处的吸光度； As——标准溶液的校正吸光度；
As220——标准溶液于波长 220nm 处的吸光度； As275——标准溶液于波长 275nm 处的吸光度；
Ar——标准溶液校正吸光度与零浓度（空白）溶液校正吸光度的差。
2、样品测定
量取 10.00mL试样于25mL具塞磨口玻璃比色管中，按照上述步骤进行测定。如果试样中的含氮量超过 70μg 时，
可减少取样量并加水稀释至10.00mL。
3、空白试验
用10.00mL水代替试样，按照水样的操作步骤进行测定。 样品中总氮含量按下式进行计算：
TN(mg/L)?(Ar?a)?fbV
式中：Ar——标准溶液校正吸光度与零浓度（空白）溶液校正吸光度的差；
a——校准曲线的截距； b——校准曲线的斜率； V——试样体积，mL；
f——稀释倍数。
五、数据处理
1、标准色列数据记录表
硝酸钾标准使用溶液（mL） 总氮含量 1 2 3 4 5 6 （μg) A220 A275 Ab As Ar 2、实验室分析记录
查得样品A220 样品A275 的总Ab As Ar 氮质量（μg)
水样体积（mL） 水样中总氮含量（mg/L）