沙门氏菌检验(2)

2020-07-28 10:47

作业指导书 文件名称:沙门氏菌检验方法 文件编号:YCCDC/BZFF06-2016 第6页共7页 第 1 版第 0 次修改 生效日期:2016年6月6日 无 无 2 5,z15 2,5 无 无 6,w,x 无 A B B C1 C2 D(不产气的) D(产气的) E1 E4 E4 a g,f,s i,b,d k,v,r,c b,d,r d g,m,p,q h,v g,s,t i 不常见的菌型,先用8种多价H血清检查,如有其中一种或两种血清凝集,则再用这一种或两种血清所包括的各种H因子血清逐一检查,以第1相和第2相的H抗原。8种多价H血清所包括的H因子如下:

H多价1 a,b,c,d,i

H多价2 eh,enx,enz15,fg,gms,gpu,gp,gq,mt,gz51 H多价3 k,r,y,z,z10,lv,lw,lz13,lz28,lz40 H多价4 1,2;1,5;1,6;1,7;z6 H多价5 z4z23,z4z24,z4z32,z29,z35,z36,z38 H多价6 z39,z41,z42,z44 H多价7 z52,z53,z54,z55 H多价8 z56,z57,z60,z61,z62

每一个H抗原成分的最后确定均应根绝H单因子血清的检查结果,没有H单椅子血清的要用两个H复合因子血清进行核对。

检出第1相H抗原而未检出第2相H抗原的或检出第2相H抗原而未检出啊第1相H抗原的,可在琼脂斜面上移种1~2代后再检查。如仍只检出一个相的H抗原,要用位相变异的方法检查其另一个相。单相菌不必做位相变异检查。

位相变异试验方法如下:

小玻管法:将半固体管(每管约1mL~2mL)在酒精灯上溶化并冷至50℃,取已知相的H因子血清0.05mL~0.1mL,加入于溶化的半固体内,混匀后,用毛细吸管吸取分装于供位相变异试验的小玻管内,俟凝固后,用接种针挑取待检菌,接种于一端。将小玻管平放在平皿内,并在其旁放一团湿棉花,以防琼脂中水分蒸发而干缩,每天检查结果,待另一相细菌解离后,可以从另一端挑取细菌进行检查。培养基内血清的浓度应有适当的比例,过高时细菌不能生长,过低时同一相细菌的动力不能抑制。一般按原血清1:200~1:800的量加入。

小倒管法:将两端开口的小玻管(下端开口要留一个缺口,不要平齐)放在半固体管内,小玻管的上端应高出于培养基的表面,灭菌后备用。临用时在酒精灯上加热融化,冷至50℃,挑取因子血清1环,加入小套管中的半固体内,略加搅动,使其混匀,俟凝固后,将待检菌株接种于小套管中的半固体表层内,每天检查结果,待另一相细菌解离后,可从套管外的半固体表面取菌检查,或转种1%软琼脂斜面,于37℃培养后再做凝集试验。

简易平板法:将0.35%~0.4%半固体琼脂平板烘干表面水分,挑取因子血清1环, 滴在半固体平板表面,放置片刻,待血清吸收到琼脂内,在血清部位的中央点待检菌株,

作业指导书 文件名称:沙门氏菌检验方法 文件编号:YCCDC/BZFF06-2016 第7页共7页 第 1 版第 0 次修改 生效日期:2016年6月6日 培养后,在形成蔓延生长的菌苔边缘取菌检查。 5.5.4.3 Vi抗原的鉴定

用Vi因子血清检查。已知具有Vi抗原的菌型有:伤寒沙门氏菌,丙型副伤寒沙门氏菌,都柏林沙门氏菌。 5.5.4.4 菌型的判定

根据血清学分型鉴定的结果,按照GB 4789.4-2010中附录A或有关沙门氏菌属抗原判定菌型。

6. 结果与报告

综合以上生化试验和血清学鉴定的结果,报告25g(mL)样品中检出或未检出沙门氏菌。


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