实验三 复方对乙酰氨基酚片的含量测定
一、目的要求
1、掌握复方片剂中各成分含量测定的基本原理和操作方法。 2、掌握复方片剂的分析特点。 二、基本原理
复方对乙酰氨基酚片中含有对乙酰氨基酚、乙酰水杨酸和咖啡因三种主成分。
各成分之间性质差异大。乙酰水杨酸为芳酸类药物，具酸性，Ka＝3.27×10-4，可用酸量法测定；对乙酰氨基酚为芳酰胺类药物，具酰胺基，呈中性，但具潜在芳伯氨基，可将其在酸性条件下水解后用重氮化法测定；咖啡因为黄嘌呤类生物碱，碱性极弱，Kb＝0.7×10-14，不能采用一般生物碱的含量测定方法，但可将其与碘发生定量沉淀以后，剩余的碘用硫代硫酸钠滴定从而求得咖啡因的含量。反应式表示如下：
1、乙酰水杨酸的测定原理
COOHOOC+NaOHCOONaOOCCH3+H2OCH3
等当点时，由于生成物水杨酸钠的水解，溶液呈微碱性，所以选用碱性区域变色的指示剂--酚酞。
2、对乙酰氨基酚的测定原理
3、咖啡因的测定原理
OH3CONNCH3I2(剩余)+2Na2S2O32NaI+Na2S4O6CH3N＋2I+KI+H2SO4NOH3CONNCH3CH3NHINI4+KHSO4
三、实验方法
取本品20片，精密称定，研细备用。 （一）乙酰水杨酸的含量测定
药典规定每片检品中含乙酰水杨酸应为0.219 g～0.242 g。
精密称取上述细粉适量（约相当于乙酰水杨酸0.4g），置分液漏斗中，加水15ml，摇匀，用氯仿振摇提取4次（20 ml，10 ml，10 ml，10ml），提取氯仿液用同一分水10ml洗涤，合并氯仿洗液，置水浴上蒸干，残渣加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml溶解后，加酚酞指示液3滴，用0.1mol/L氢氧化钠液滴定，即得。每1ml 0.1mol/L氢氧化钠液相当于18.02mg的C9H8O4。
按下式计算每片含乙酰水杨酸的克数 g/片＝T?V?f?W平W称样量 均片重其中：T－为滴定度；V－消耗滴定液体积；f-为滴定液浓度校正因子
（二）对乙酰氨基酚的含量测定
药典规定每片检品中含对乙酰氨基酚应为0.120 g～0.132 g。
精密称取上述细粉适量（约相当于对乙酰氨基酚0.25 g），置锥形瓶中，加稀硫酸25 ml，缓缓加热回流60分钟，冷却至室温，将析出的水杨酸滤过，滤渣与锥形瓶用盐酸液(1→2)40ml，分数次洗涤，每次5m1，合并滤液与洗液，加溴化钾3g溶解后，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，在不低于20℃的温度下，用0.lmol/L亚硝酸钠液迅速滴定，随滴随搅拌，至近终点时，将滴定管尖端提出液面，用少量的水将尖端洗涤，洗液并入溶液中继续缓缓滴定，至用细玻棒蘸取溶液少许，划过涂有含锌碘化钾淀粉指示液的白瓷板上，即显蓝色的条痕，停止滴定，5分钟后再蘸取少许，划过一次，如仍显蓝色的条痕，即达终点。 每lml的0.l mol/L亚硝酸钠液相当于15.12mg的C8H9NO2。
按下式计算每片含对乙酰氨基酚的克数：
T?V?fg/片??平均片重?W称0.01512?V?W称样量'MNaNO20.1?W平均片重
' 式中：MNaNO为亚硝酸钠液的实际浓度，0.1为亚硝酸钠液的理论浓度 2
(三)咖啡因的含量测定
药典规定每片检品中含咖啡因应为27.0～31.5mg。
精密称取上述细粉适量(约相当于咖啡因50mg)，加稀硫酸5ml，振摇数分钟使咖啡因溶解，滤过，滤液置50ml容量瓶中，滤器与滤渣用水洗涤三次，每次5m1，合并滤液与洗液，精密加0.l mol/L 碘液25 m1，用水稀释至刻度，摇匀，在约25℃避光放置15分钟，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液25m1置碘量瓶中，用0.05mol/L硫代硫酸钠液滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每lml的0.1 mol/L
碘液相当于5.305 mg的C8H10N4O2·H2O。
按下式计算每片含咖啡因的mg数
mg/片?2??2?T?VI2?fW称样量W称样量?W平均片重
?W平均片重
'T??V空?V样??MNa?202S2O3
四、预习提要
1.采用三种方法分别测定乙酰水杨酸、对乙酰氨基酚、咖啡因含量的原理及有关问题讨论。
2.测定乙酰水杨酸、对乙酰氨基酚、咖啡因时，各自的取样量如何计算? 3.画出乙酰水杨酸提取及洗涤的装置草图。
4.画出对乙酰氨基酚水解回流的装置草图及滴定装置图。 5.测定乙酰水杨酸时，加入中性乙醇的作用是什么？如何配制? 6.测定乙酰水杨酸时，为什么要提取？
7.测定对乙酰氨基酚时，加入KBr的作用是什么?如何控制到达近终点的一次滴定量?
8.外指示剂指示终点的原理、方法及缺点。如何尽可能克服这一缺点？ 9.咖啡因能否采用一般含氮碱的方法测定之，为什么?
10.咖啡因含量测定时，为什么要在滴定近终点时才加入淀粉指示液?过早加入会出现什么现象?如何掌握近终点? 11.测定过程中如何防止碘 (I2)的挥发? 12.计算三成份测定时的滴定度。
13.请比较乙酰水杨酸的中国药典法即直接酸量法 (原料)和两步滴定法 (片剂)与本法提取酸量法的优缺点。
附:复方对乙酰氨基酚片处方 乙酚水杨酸 230 g 对乙酰氨基酚 126 g 咖啡因 30 g 制成 1000片
实 验 指 导
复方对乙酰氨基酚片为一复方制剂。所谓复方制剂指含有二种或二种以上主成份的制剂。在分析复方制剂时，既应考虑赋形剂等附加成份的影响，又要考虑主成份之间的相互影响。复方对乙酰氨基酚片中含有三种主成份，乙酰水杨酸、对乙酰氨基酚和咖啡因 。乙酰水杨酸为酸性，对乙酰氨基酚为中性，含潜在芳伯氨基，咖啡因为弱生物碱。由于性质差异大，可以采用酸量法、水解后重氮化法、碘量法分别测定三者的含量，相互之间互不干扰。通过本实验，应掌握复方制剂分析的特点及三种方法的原理和操作技能。 一、乙酰水杨酸的含量测定 (一)提取酸量法
乙酰水杨酸为酸性物质，采用酸量法测定时对乙酰氨基酚、咖啡因对它无干扰，但是处方中加入酒石酸或枸椽酸为稳定剂影响测定，故用氯仿提取以消除稳定剂的影响。
由于乙酰水杨酸易水解成水杨酸和醋酸，要多消耗氢氧化钠，所以应在中性乙醇中进行分析，并控制滴定温度在5~15℃，以防水解。
(二)操作要点与技能训练
本实验进一步加强提取分离的技能训练。 1.片剂的取样方法 (1) 取样量计算 W取样量?(2) 粉末制备及称量
取15片或20片置称量纸或干燥洁净的小烧怀 (预先称重)里精密称重 (求得平均片重)，置研钵中研细，不允许有大颗粒存在。按取样量的±10%为范围精
0.4W平均片重 0.23