通过凝胶过滤层析达到分离纯化EV71肠道病毒粗提液,以提高EV71的纯度。选用不同的洗脱流速、不同样品上样量、不同的缓冲溶液的pH值和不同盐浓度对EV71肠道病毒粗提液进行连续洗脱。结果表明,凝胶过滤层析的洗脱流速、样品上样量、缓冲溶液的pH值和盐浓度对EV71病毒均能不同程度地影响EV71病毒粗提液的分离效果。在试验范围内,选择洗脱流速为60 cm·h-1、样品的上样量为5%CV、缓冲
第 4卷第9 2期21年9 0 1月
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J u a f rh atAgiutrl iest o r l o te s n No rc l a v ri u Un y
凝胶过滤层析参数对 E 7病毒粗提液分离效果的影响 V1杨永华，邵强 ,皮川真，杨全中，苏志国 ( .南师范大学生命科学学院，河南 1河新乡 4 30: 2华兰生物工程有限公司，河南 507 . lo 9 o l o)新乡 4 30; 50 7 3中国科学院过程工程研究所，北京 .
摘
要：通过凝胶过滤层析达到分离纯化 E 7肠道病毒粗提液，以提高E 7的纯度。选用不同的洗脱流 V1 V1
速、不同样品上样量、不同的缓冲溶液的p H值和不同盐浓度对 E 7肠道病毒粗提液进行连续洗脱。结果表明， V1 凝胶过滤层析的洗脱流速、样品上样量、缓冲溶液的p H值和盐浓度对 E 7病毒均能不同程度地影响 E 7病毒 V1 V1粗提液的分离效果。在试验范围内，选择洗脱流速为 6 m ~、样品的上样量为 5 C 0c h% V、缓冲溶液的 p H为 75 .和
盐浓度为01 o -,对 E 7病毒粗提液的分离效果比较理想。 .t lL o时 V1关键词：凝胶过滤层析；分离；E 7;手足口病 V1
中图分类号：T 2 2 - Q 0 83
文献标志码：A
文章编号：1 0— 3 9 2 1 )9 0 3— 5 0 5 9 6 ( 0 0— 1 6 0 1
Op i ia i n o e - ir t n c r ma o a h a a t z t fg l fta i h o t gr p y p r me e s f rs p r - m o l o t r o e a a t g vr s fO c u e e ta t fEV71Y N o g u’S A i g P C u n i i r m r d x r c s o n u/A G Y n h a, H O Qa’ I h a - n, z e Y h n, ANG a z o g, iu。1 Colg fLf in e, n n N r l v ri, n - Qu n h n’ SU Zhg o ( . l e o i Sce c s He a o ma Un e st Xix e e yin n n 5 0 7 a g He a 4 3 0,Ch n; . aa oo ia En ie r g Ic, n i n
e a 5 0 7 Ch - i a 2 Hu l n Bil gc l g n e i n . Xi xa g H n n 4 3 0, i n
n; .n tueo rc s n i e i, i s c d myo ce c, e i 0 1 0 C i ) a 3 Isi t fPo e sE gn r g Ch e e a e f i e B i g1 0 , hn t e n n A S n j 9 n a
Ab ta t T e if e c fg l la in c rmao rp y f w ae te s mpe weg t b f rp s r c: h n u n e o e t t ho tg a h o rt, h a l ih, u e H l i fr o lv l e n s t c c n r t n o s p r t ero m a c ft e p o en c u e e ta t fEV71 a u a d al on e ta i n e a a i p f r n e o h r t i r d x r c s o o on wer e iv t a e Th e ut h we h ta l h b v ou a t s c l fe t h e a a i er m a c n esi t d. e r s l s o d t a lt e a o e f rf cor oud a c e s p r t g s t on p f or n e o h r de e ta t n ge-ir t n c r m a o r p y b a i s d gr e .I h c pe o h r s t ft e c u x r cs i l l a i h o ft o tg a h y v r ou e e s n t e s o ft e p e en
t s s t e b s ep r t e f r e t, h e ts a a i p ro man e wasa hi ed u ig 60 c 。 r e,% CV a l p 7. u e on c c ev sn m h。at 5 s mpe, H 5 b f ran t 1m o‘s lc n e ta in. d wi 0. h 卜L’ at O c n r t O
Ke o ds g l l r gc r mao r p y s p r t n E 1 h n o n uh ie s yw r: e t i ho t ga h; e a a i; V7; a df t d mo tds a e i fen o o a
人肠道病毒 7型 ( V 1是小 R A病毒科，人 l E 7) N肠道病毒属的成员，主要在肠道内进行复制口 。 ET V 1的病
毒颗粒为二十面体立体对称的球形结构，无包膜和突起，径大约在 2~ 0n直 4 3 m,核酸为
渐流行，从 2世纪 7年代主要在保加利亚，匈牙 O O利等欧洲国家流行，直至 2世纪 9年代起，E T O O VI开始肆虐东南亚地区、日本、马来西亚、中国台湾、中国大陆等地均深受其害。 E T感染主要引起患者手足口病，在临床上 V1与柯萨奇病毒 A1 ( oskeA 6 A6感染所引 6 C xai 1,C 1) 起的手足口病难以区别，儿童感染后部分出现多种与神经系统相关的严重并发症，包括神经源性肺水肿、脑干脑炎和心肌炎心衰等，神经源性肺水肿多
单股正链 R A。病毒粒子的衣壳由 6亚单位构 N 0个成，后者又是由四种衣壳蛋白 V I P装成的 P—V 4拼五聚体样结构。自 16年，第一株 E 7病毒从】 99 V]美国加利福尼亚州一名患有神经系统疾病的婴儿体内分离出来p】此以后，E 7在全球范围内逐。从 V1收稿日期：2 1— 2 3 00 1— 1
基金项目：河南省基础与前沿技术项目( 8 30 5 3 0 0 20 4 0 0 )作者简介：杨永华(9 3 ) 18一，女，硕士研究生，研究方向蛋白质化学与分子生物学。E ma:a gog u6 6 2@13 cm— i ynyn h a6 1 1 6 .o l通讯作者：邵强，教授，研究方向为蛋白质工程研究。E malsaq 9 ia cr - i h o9@sn. o : n