实验程序Ⅴ 实验程序Ⅴ(鞭毛染色的方法和步骤) 鞭毛染色的方法和步骤) 菌液的制备及涂片：菌种应预先连续传代 菌液的制备及涂片：菌种应预先连续传代5—6代。 代 1. 接种：先在斜面底部加入 接种：先在斜面底部加入0.5—1mL无菌水，取活化的枯草 无菌水， 无菌水 杆菌1—2环菌苔，接种于无菌水中，300C 培养 环菌苔， 培养15—18h。 杆菌 环菌苔 接种于无菌水中， 。 2. 制备菌液：挑取斜面底部近水面处菌苔数环，移入 制备菌液：挑取斜面底部近水面处菌苔数环，移入1mL与 与 菌种同温的无菌水中， 温箱中保温10min。 菌种同温的无菌水中，在280C温箱中保温 温箱中保温 。 3. 鞭毛涂片：先用悬滴法观察其运动性，若运动性很强，即 鞭毛涂片：先用悬滴法观察其运动性，若运动性很强， 可涂片。涂片后自然干燥、固定。 可涂片。涂片后自然干燥、固定。
染色：染色液必须新配制，涂片必须充分晾干才能染色。 染色：染色液必须新配制，涂片必须充分晾干才能染色。
1. 先用刚过滤的鞭毛染色液 染7.5—8min左右。 先用刚过滤的鞭毛染色液A染 左右。 左右 2. 倾去 液，再加鞭毛染色液 液染 倾去A液 再加鞭毛染色液B液染 液染3—5min,水洗，自然干 ，水洗， 燥。 3.用C液石炭酸复红复染2min,水洗、晾干、镜检。 用 液石炭酸复红复染2 ,水洗、晾干、镜检。 油镜下观察鞭毛的数目及着生情况(示范镜)并绘图 油镜下观察鞭毛的数目及着生情况(示范镜) 菌体与鞭毛都呈红色，周生鞭毛)。 (菌体与鞭毛都呈红色，周生鞭毛)。