体细胞杂交技术在马铃薯遗传育种研究中的应用———袁华玲，金黎平，谢开云，等 ３５７
2FGHI：Ｓ５３２，Ｓ３３０LMNOP：Ａ（２００５）０６－０３５７－０５LQRI：１６７２－３６３５
no
!"#$%&’()*+,-./012345
袁华玲，金黎平，谢开云，屈冬玉＊
（2789:;<=>?@01A，CD１０００８１）
‘a：体细胞杂交技术是打破有性杂交不亲和障碍，将野生种优良性状引入普通栽培种，丰富马铃薯遗传
基础，创造新种质的有效手段。本文在原生质体的分离融合、融合体的筛选、杂种的鉴定等方面对马铃薯体细胞杂交技术进行综述的基础上，介绍了近年来马铃薯体细胞杂交技术的研究进展，并就体细胞杂交技术在马铃薯遗传研究育种上的应用进行了阐述。
bcd：马铃薯；体细胞杂交；遗传育种
我国是马铃薯生产大国，近年来生产面积和产量逐年上升，但是生产上所用的马铃薯普通栽培种遗传基础比较狭窄，存在着抗病抗逆性差、品质性状有待于提高等问题［１］。在新品种选育过程中，用遗传基础狭窄的普通栽培种进行种内杂交，后代的遗传异质性差，优势不明显，难以选育出突破性的品种。此外在马铃薯普通栽培种中特别缺乏抗病和抗逆的基因，因此丰富育种材料的遗传基础，创造新种质资源是品种选育跨上新台阶的关键。
马铃薯的种质资源十分丰富，国际马铃薯中心收集的马铃薯种质有２３５个种，其中７４％为野生种和近缘种，在这些野生种和近缘种中存在着许多优良性状，如抗病虫性、抗逆性，优良品质等，将这些基因引入马铃薯普通栽培种中，丰富马铃薯普通栽培种中的遗传基础，创造新的种质用于马铃薯品种改良有着重要意义。但是马铃薯普通栽培种是同源四倍体植物，基因分离复杂，具有丰富遗传基础的野生种质资源大多数是二倍体，马铃薯普通栽培种与野生种杂交时存在着杂交不亲和性，难以成
TUVW：２００５－０７－２８
（１９６５－），女，博士研究生，研究方向：马XYZ[：袁华玲铃薯体细胞杂交。
“８６３”计划项目“马铃薯高效育种技术及\]^_：国家十五
优质高产多抗专用新品种选育”（２００４ＡＡ２４１１３０）资助；国家十五“８６３”重大专项“优质抗病马铃薯倍性技术育种与利用”（２００２ＡＡ２０７０１１）资助。
功，限制了野生种质资源中优良基因的利用。通过体细胞杂交可以打破有性杂交不亲和障碍，在近缘的种内或种间，甚至远缘的科属间产生体细胞杂种，扩大遗传变异范围。
１
１．１
马铃薯体细胞杂交技术的研究
efg!3Ghijk
体细胞杂交第一步是分离有活力的原生质体并
有效地再生出植株，在许多的已发表的报道中，引用较多的是Ｓｈｅｐａｒｄ等［２］，Ｂｉｎｄｉｎｇ等［３］，Ｈａｂｅｒｌａｃｈ等［４］报道的原生质体分离和培养条件。所用的原生质体起始培养基、愈伤组织形成培养基、以及诱导分化培养基都是ＭＳ、Ｂ５、ＫＭ、ＶＫＭ、Ｖ４７等基本培养基或略加修改，有研究表明，对外植体进行黑暗培养前处理有利于提高原生质体的产量，基因型的不同对原生质体的再生能力有影响［５］。
在已知的诱导原生质体融合的方法中，最经常使用的是聚二乙醇（ＰＥＧ）诱导和电融合。在马铃薯体细胞研究早期，较多采用ＰＥＧ化学诱导方法进行细胞融合，由于操作复杂，技术性要求较高，目前多采用电融合的方法。
１．２jk!3lm
原生质体融合目前还难以达到一对一特异性融
合，融合后的产物包括融合亲本以及同核体、异核体，有必要通过选择将所需要的异核体筛选出来。已知的很多选择体系在马铃薯异核体的选择上均有
＊通讯作者：Ｅ－ｍａｉｌ：ｐｏｔａｔｏｖｉｆ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ