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-1-1
为0.5kJ·nm·mol,目的是使均方根偏差(root-mean-squaredeviation,RMSD)变化尽可能小。
HeraldofMedicineVol.31No.12December2012的标准偏差,标准偏差越大,可推测该类中药对于所测
相反,偏差越小反映出该靶点的的抑制作用波动越大,
类中药对于所测靶点都具有相似的作用。
2结果2.1
阳性对照组对接评分结果根据评分情况汇总,
1、JNK-3、P38、IKK、得到阳性对照结果,靶点JNK-LOX、COX-2、LTA4、PLA2平均评分分别为-7.
1.4
分子对接过程以IKK-β为例,选用了PDB序
列号:3rzf。选用了IKK-β与配体复合的三维结构模
型(ID:3RZF)。在参考其活性结合口袋的基础上,加氢、调整键序,选用OPLS_2005进行能量最小化处理对蛋白至RMSD为3nm以减少蛋白空间结构的冲突,
进行相关处理和优化;应用receptorgridgeneration面板生成活性口袋,具体参数设置为:以原配体为中心生成格点,然后取准备好的中药分子配体进行对接。蛋vanderWaals(vdW)范围设定为白和配体间Coulomb-1.0/0.8;标准精度(standardprecision,SP),每个配体进行虚拟筛选工作。最后记录评价得分仅对接一次,G-Score、结合能、氢键指标数据,按照得分高低进行排序,以评价中药分子与IKK-β的结合效应;同时参考文献,选取多个已证明有效IKK-β抑制药分子作为配1、JNK-3、COX-体对照,也进行相同的对接。对于JNK-2和P38采取相同的操作办法,分别选取序列号为2gmx、1pmn、6cox、1a9u的PDB文件,得到评分结果。PLA2,选用PDB序列号为1db4,在进行receptorgridgeneration面板生成活性口袋时,由于口袋中包含金属钙离子,已知钙离子与配体的作用对于酶活性抑制有着显著的相关作用,在此将对对接增加限制,设定所对接成功的配体需与钙离子有键作用,生成活性口袋,其后的对接工作如前。LTA4,选用的PDB序列号为3b7r,该蛋白的活性口袋中金属锌离子的存在对于酶的催化作用非常重要,同样也要在口袋生成过程中LOX,给予限制;5-选用PDB序列号为3o8y,首先对所
包括加氢、调整键构建的蛋白进行相关准备和优化,
序、能量最小化等;然后运用Sitemap寻找蛋白的活性
size,volume,enclosure,contact位点,并应用sitescore,等综合指标对列出的各个结合位点考察其合理性,并
参考文献报道的有关氨基酸残基结合数据,选定结合然后进行下一步的分子对接工作。位点,
在中药对接完毕后,选取各靶点多种选择性抑制药对相应蛋白进行对接,得到评分结果,取平均值后作为阳性对照组。1.5
分子对接结果评价方法对接得到中药与各靶点的初始对接评分,然后将经过处理得到平均评分。为了将没有对接成功的分子考虑在内,笔者引入校正评分。校正评分的定义是将没有对接成功的分子的GlideScore定义为它所属类别的中药在该靶点评分中的最差得分,然后重新计算得出的平均分,评分越是负值其对接结果越好。根据各中药校正评分的分值,算出每类中药评分
-7.60,-6.65,-7.41,-5.60,-9.63,-7.84,-10.44,
12分。
2.23类中药对各靶点评分情况3类中药对各靶点平均评分见图3,校正评分结果见图4,不同清热类中药的校正评分见图5,根据各中药校正评分,得3类中药评分的标准偏差结果见图6
。
Fig.3of
TCM
Theaveragescorewithtargetsofthethreetypes
图4
Fig.4ofTCM
3类中药对各靶点的校正评分
Thecorrectscorewithtargetsofthethreetypes
3讨论
首先由阳性对照评分与3类中药对各靶点的平均评分对比可以肯定该对接结果的可靠性。由3类中药