第6期叶勇,等正交试验法优选丹参中丹酚酸B的提取工艺
23
提取物得率及其丹酚酸B含量为指标,考察丹参药材提取最佳条件参数。
2.5样品测定
2.6结果
试验重复2次后,结果见表2与表3。方差分析表明,除提取时间外,其它因素对得率的影响均达显著水平,说明提取时的加液量、温度、乙醇浓度是影响得率的主要条件。而对纯度影响因素呈显著的是乙醇浓度和温度,表明它们是影响纯度的主要条件。影响得率因素作用顺序为:加液量>提取温度>乙醇浓度>提取时间;影响纯度因素作用顺序为:乙醇浓度>提取温度>加液量>提取时间。得率和纯度最佳提取参数分别为:A出,C2D:;A,B2C2D:。由于Bz和B,对纯度的影响差异不大,故选用A3B,C2Dz为最佳提取条件,即70%醇浓度,12倍加液量,提取时间1h,提取温度50℃。以此条件提取3批(20051203,
.
.
称取提取干燥物100mg,加水溶解并定容至
100
mL,过滤,滤液再过0.45斗m微孔滤膜,进样高
效液相色谱仪,按标准曲线项下方法测定峰面积,见
图1B,通过标准曲线获得样液浓度C,C×100得干
浸膏中丹酚酸B百分含量。
1
lI)
20051205,20051207),每批1000g,提取得率平均
15
2()
r。’。’。。1。。。。。’。'。。。。。’1’。’。’’。’,__--_。 -______’■‘————_。-。- ---一
n
510J52()05
7.50%,RSD28.68%,RSD
1.49%(n=3),丹酚酸B含量平均为1.26%(n=3)可见含量和纯度均较高,
(£/min)(£/min)B.提取物
A.对照组
图1
说明提取条件最佳。
丹参中丹酚酸B的HPLC图谱
表2丹参中丹酚酸B正交试验结果
得率(%)
丹酚酸B含量(%)
序号
l23456789K1K2K3R
ABC
D
-_●____一_-_●_l---____________________--_●_____-________________________●--_-_______________-_--_-________-●_____l____●____--_______-_●-__--___________—_—-————————————一
11l222333
37.52/141.2239.84/163.9341.70/170.700.70/4.91
l23l23l23
35.25/155.1541.40/162.5742.41/158.131.19/1.24
l232313l2
39.70/157.8940.65/159.3038.71/158.66O.32/o.24
1233l2231
36.76/153.2942.44/164.5639.86/158.00O.95/1.88
∑Y=119.06.CT=787.523
∑Y=475.85.CT=12579.62
5.2546.9786.6476.0346.5737.7666.8637.5097.53l
4.8027.3396.50l6.1425.9777.3446.1507.0276.622
23.0626.3224.6326.2527.8328.5329.2629.3627.33
20.8424.2822.0927.2626.3727.6928.4828_4l27.86
表3方差分析表
本试验是丹酚酸提取试验,产品中丹酚酸B的含量不高。只有经过精制,才能获得较高纯度的丹酚
酸B。
实验结果显示,乙醇浓度提高有利于提高丹酚酸的得率和含量,但是温度过高则不利,这与丹酚酸B的不稳定相关。
参考文献:
【l】李认书,李永强.丹酚酸研究进展【J].时珍国医国药,2003,14
(6):37l一373。
【2】张荣泉,王德仁,张蓉.丹参水溶性成分提取工艺研究[J】.中药
注:m.05(2,9)=4.26,冈.01(2,9)=8.02。4P<0.05,8+P<0.Ol。
3讨论
丹酚酸在HPLC测定过程中具有明显拖尾现象,故在流动相中添加少量甲酸,pH3.0,具有较好
抑制拖尾效果。
材,2004,24(11):818—819.
【3】李静,何丽一,宋万志.丹参中水溶性酚酸类成分的薄层扫描
测定法【J].药学学报,1993,28(7):543—547.