①研磨不充分，色素未充分提取出来。
②称取绿叶过少或加入95%的乙醇过多，色素浓度小。
③未加碳酸钙或加入过少，色素分子部分被破坏。
(2)色素带呈弧形的原因是滤纸条未剪去两角。
(3)滤纸条上只有两条色素带，原因是使用的叶片中叶绿素被破坏或不含叶绿素。
(4)滤纸条上看不见色素带的原因
①忘记画滤液细线。
②滤液细线接触到层析液，且时间较长，色素全溶解到层析液中。
[错混诊断]
1．用纸层析法提取菠菜绿叶中的色素(2014·四川，4C改编)( × )
2．在25°C的实验条件下可顺利完成光合色素的提取与分离(2014·北京，5A)( √ )
3．叶绿体色素在层析液中的溶解度越高，在滤纸上扩散就越慢(2014·重庆，1C)( × )
4．利用纸层析法可分离出4种叶绿体色素(2012·海南，9C)( √ )
5．叶绿素a和叶绿素b主要吸收红光和蓝紫光(2012·海南，9A)( √ )
题组一 从色素提取与分离的原理进行考查
1．下列是关于绿叶中色素的提取和分离实验的说法，其中正确的是(双选)( )
A．色素提取的原理是色素在层析液中的溶解度不同
B．研磨叶片时加SiO2的作用是使研磨更加充分
C．实验材料叶子要新鲜，颜色要深绿，目的是提取到较多的色素
D．层析液可用丙酮代替
答案 BC
解析 本实验的原理有两项：一是色素提取的原理，即叶绿体中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中，可以用其提取叶绿体中的色素；二是色素分离的原理，即绿叶中的色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快，溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢，A错误；SiO2可使研磨得更充分，B正确；层析液由20份在60～90℃下分馏出来的石油醚、2份丙酮和1份苯混合而成，也可用93号汽油代替，但不能用丙酮代替，丙酮可以作为色素的提取剂，D错误。
2．提取光合色素，进行纸层析分离，对该实验中各种现象的解释，正确的是( )
A．未见色素带，说明材料可能为黄化叶片
B．提取液呈绿色是因为含有叶绿素a和叶绿素b
C．滤纸条由上到下第3条带呈现黄绿色
D．胡萝卜素位于滤纸条的最上方，是因为其在提取液中的溶解度最低