Invitrogen公司
pcDNA=CMV; pEF=EF-1a; pUb=Ub;-TOPO=TOPO克隆,/Gateway;-His/V5/myc tagged;抗性Neo/Zeo/Hyg/Bsd
载体名称 pcDNA5/FRT/V5-His-TOPO pEF5/FRT/V5-DST
pEF5/FRT/V5-D-TOPO pSecTag/FRT/V5-His-TOPO pcDNA5/FRT
分子增强内含
启动子 量 子 子 5.2 CMV 7.5 EF-1a
V5
5.8 5.2 CMV
/
/
/
V5,6*Igk信号,分泌表达
His 融合蛋白
RNA聚合酶
N端Tag C端Tag V5,6*
His
特殊序列
中止poly抗性检测表达方
复制起始 克隆 纯化
序列 A 筛选 方法 式
TOPO
Ni
稳定
Bsd Neo Bsd
备注
有
BGH pUC
Gatewa
抗V5y
抗体
Hyg
检测
TOPO
Ni
酶切 Neo
形成相同基因的细胞;必须和Fip重组表达载体pOG44共转染Fip细胞
pcDNA3.2/V5-G
W/D-TOPO pcDNA6.2/V5-G
W/D-TOPO pcDNA3.2-DEST
CMV / / T7 V5 attB1,attB2 / TK pUC
CMV /
pcDNA6.2-DEST
/ T7 V5
attR1,attR2;ccdB;C
/
mR f1,pUC,SVTK
40 瞬时/稳定
pcDNA3.1/nV5-DEST
pcDNA3.2-DEST40 pDEST26 pDEST27
7.1 V5
attR1,attR2;ccdB;CmR;TEV用于切割V5抗原
BGH
pUC SV4f1,pUC,SV0 40
Neo
7.1 7.6 8.1
V5,6*
His attR1,attR2;ccdB;C
6*His mR
GST
Ni Ni GST
无需酶切,连接即可完成基因克隆
pcDNA3.1-E, pcDNA4/HisMAX-E 载体在原来基础上增加了 -E pcDNA4/HisMax
pcDNA4/HisMax-TOPO pcDNA3.1[+/-] pcDNA3.1/Zeo[+/-]
pcDNA3.1/Hyg[+/-] Echo
f1,pUC,SVBGH Zeo
40
5.3 CMV 5.3 5.4
SP16
/ 3
T7
6*His,
Xpress
EK /
XpresNi s
瞬时/有多种ORF
稳定
TOPO
5 CMCMV /
V
5.6
T7 /
/
/
Neo
f1,pUC,SVBGH
40 Zeo
Hyg
瞬时/
无tag的载体
稳定
pcDNA3.1,4,6/Hi5.5-5s A,B,C .0
CM
CMV /
V pcDNA3.1,4,6/V5.5-5
5-His A,B,C .0
T7
6*His,
Xpress
EK /
V5,6*
有
His
3.1=
f1,pUC,SVNeo, BGH
40 4=Ze
o,6=
共22个载体,分
瞬时/
别具有不同启动
稳定
子、抗性、抗原tag
pcDNA3.1,4,6/m5.5-5yc-His A,B,C .1 pEF1,4,6/His A,B,C
myc,6*
His
Bsd
pEF1,4,6/V5-His
EF-1a
A,B,C EF-1
同上 a pEF1,4,6/myc-Hi
s A,B,C pUB/V5-His A,B,C pRc/CMV2
Ub
f1,ColE1,S
Neo
V40
f1,ColE1,S
Neo
V40
瞬时/稳定
瞬时/稳定
5.5 CMV / T7 / / / BGH
稳定
MCS处有2个
BstXI酶切位点
pRc/RSV 5.2 RSV LTR / / / / / BGH
增加了转化和转
染效率,与
瞬时/pcDNA3.1相同的稳定 MCS, 较pZeoSV
去除了Sp6启动子
pZeoSV2(+/-) 3.5 SV40 /
T7代
/ 替T3
/
BGH pA代替SV40 pA,避
/ 免与Zeo下游的SV40 pAf1,ColE1 Zeo
混淆重排
pBudCE4
CMV/4.6 / EF-1a
/ /
V5-His
/myc-H is SV4
0/BGpUC H Zeo 稳定
同时表达两个目的基因 pCMV/Zeo,pSV40/Zeo和pCMV/Bsd,pEF/Bsd,pUB/Bsd分别是用于在一新载体上构建Zeo/Bsd抗性 Xpress-tagged表达载体融合部分可切;V5/BioEase/His/myc-His/Xpress-tagged表达载体在western Blot实验时低背景;myc-His-tagged的表达载体可有效检测的常用抗原,可免疫沉淀;His-tagged的表达载体可有效免疫沉淀;BioEase-tagged的表达载体可有效检测的常用抗原,可免疫沉淀
Stratagene公司
载体名称
分子增强内含
启动子 量 子 子
RNA聚合酶
N端
Tag C端Tag
特殊序列
中止poly抗性检测表达方
复制起始 克隆 纯化
序列 A 筛选 方法 式
有
SV4f1,colE1,
无
0 SV40
SV4
f1,colE1, Neo0早
SV40 上游期
b-lac
抗体FLA筛选 G/c-m
WB,免疫沉淀, 免疫荧 光, pull down实验, 亲和
层析;核酸探针,功能筛选, 抗体筛选
备注
pExchange-1 core
3.6
vector pExchange-2 pExchange-3A,3B,3C pExchange-4 pExchange-5 pExchange-6 pCMV-Script
4.3 CMV
/
早期 4.3 CMV
/
早期 4.3
/
FLAG,c-myc kozak T7,
T3 FLAG
c-myc
FLAG
c-myc
有
c-myc,
FLAG kozak(gcca/gccatgg) 有2套MCS+终止子
A,B,C三型;有3个ORF,易错;须在克隆目的片断后插入Neo/ Hyg/Pur
有2套MCS+终止子
/
T7, T3
pCMV-Tag1
pCMV-Tag2 pCMV-Tag3 pCMV-Tag4
FLAG c-myc
FLAG
pCMV-Tag5
兔b-球蛋
T7 / 白基因 T3,T
lac 7
c-myc
启动 子/ SV4 0 ori,下游 TK polyA,Ka n
yc抗体
有3个ORF,易错
pSG5 4.1 SV40 / / / 有 f1 无
在T抗原的细胞
瞬时表
中高表达;可体内/
达
外表达 原核/真核细胞中
噬菌体融合表达;产生一表达 系列exo/ mung删
除
pBK-CMV CMV / / lacZ
SV4
f1,colE1,SKan,0早
V40 Neo 期
抗体探针,
兰白斑
pDual 5.5 CMV
/
突变
/
T7
pDual-GC
6.6
Neo上游
SV4
CBP瞬时/凝血酶酶切位b-lac启动子/ lacO T7 0晚
点,RBS/ kozak 亲和 稳定
期 f1,colE1,SSV40 ori,下兰白原核/真核细胞中
游TK
V40 斑 融合表达
polyA,Kan
c-myc, 抗体 T7 RBS/ kozak 6*His /Ni