绝大部分先加入至碱性酒石酸铜试剂中,使其充分反应,仅留1 mL左右用滴定方式加入,而不是全部由滴定方式加入,其目的是使绝大多数试样溶液与碱性酒石酸铜在完全相同的条件下反应,减少因滴定操作带来的误差,提高测定精度。 4、试样液中还原糖的浓度不宜过高或过低,根据预测试验结果,调节试样中还原糖的含量在1mg/mL。
5、滴定终点蓝色褪去后,溶液呈现黄色,此后又重新变为蓝色,不应再进行滴定。因为亚甲蓝指示剂被糖还原后蓝色消失,当接触空气中的氧气后,被氧化重现蓝色。
6、还原糖与碱性酒石酸铜试剂反应速度较慢,必须在加热至沸的情况下进行滴定。为防止烧伤及便于滴定工作,可于管尖部加接一弯形尖管,规格及安装如图所示,并戴上手套操作。
7、碱性酒石酸铜甲液和乙液应分别配制,分别贮存,不能事先混合贮存。否则酒石酸钾钠铜配合物长期在碱性条件下会慢慢分解析出氧化亚铜沉淀,使试剂有效浓度降低。
八、实验结果与分析讨论 (一)检测结果及质量评价
说明检测结果,根据检测结果和产品质量标准,对试样质量作出评价。 (二)分析讨论
试分析实验中可能导致误差的因素及应对措施? 九、思考题
(一)判断(下列说法正确的打“√”,错误的打“×” ) 1、直接滴定法测定还原糖的结果代表试样中的总还原糖含量。( ) 2、直接滴定法测定还原糖是根据经过标定的一定量的碱性酒石酸铜溶液( Cu2+量一定)消耗的试样溶液量来计算试样溶液中的还原糖的含量,反应体系中Cu2+的含量是定量的基础,所以在试样处理时,不能用铜盐作为澄清剂,以免试样溶液中引入Cu2+ ,得到错误的结果。( )
3、直接滴定法测定还原糖在碱性酒石酸铜乙液中加入少量亚铁氰化钾的目的是为消除氧化亚铜沉淀对滴定终点观察的干扰,使之与Cu2O生成可溶性的无色配合物,而不再析出红色沉淀。( )
4、碱性酒石酸铜甲液和乙液应分别贮存,不能事先混合贮存。否则酒石酸钾钠铜配合物长期在碱性条件下会慢慢分解析出氧化亚铜沉淀,使试剂有效浓度降低。( )
(二)填空
1、直接滴定法测定还原糖滴定时要保持沸腾状态,目的有三,一是:加热可加快还原糖与Cu2+的
反应速度;二是:上升蒸汽阻止空气侵入滴定反应体系中,防止还原型次甲基蓝遇到空气中的氧时又会被氧化为其氧化型,再变为蓝色;三是:防止氧化亚铜与空气中的氧结合而 被氧化,从而增加还原糖的消耗量。
2、预测定的目的有二,一是本法对试样溶液中还原糖浓度有一定要要求(0.1%左右),测定时试样溶液的消耗体积应该与标定葡萄糖标液的消耗体积相近,通
过测定了解试样浓度是否合适,浓度过大或过小应该加以调整,使测定时消耗试样溶液量在10mL左右;二是通过测定可知道此溶液的大概消耗量,以便在正式的滴定时,预先加入比实际用量少 1mL左右的试样溶液,只留下1mL左右的试样溶液在续滴定时滴入,以便保证在1min内完成续滴定工作,提高预测定的准确度。
(三)简答题:影响直接滴定法测定还原糖测定结果准确度的因素有哪些? 此法中影响测定结果的主要操作因素是反应液碱度、热源强度,煮沸时间和滴定速度。
①反应的碱度直接影响Cu2+与还原糖反应的速度、反应进行的程度及测定结果。在一定范围内,溶液碱度越高, Cu2+的还原越快。因此,必须严格控制反应液的体积,标定和测定时消耗的体积应接近,使反应体系碱度一致。 ②锥形瓶壁厚和热源的稳定程等,对测定精密度影响很大,因此,在标定、预测、测定过程中,其实验条件都应力求一致。
热源温度应控制在使溶液在2min内加热达到沸腾状态,且所有测定均应保持一致。否则加热至沸腾所需时间不同,引起蒸发量不同,使反应碱度发生变化,从而引入误差。
③沸腾时间和滴定速度对结果影响也较大,一般沸腾时间短,消耗还原糖液多,反之,消耗还原糖液少;滴定速度过快,消耗还原糖时多,反之,消耗还原糖量少。 1min内滴定结束;
④整个滴定过程一直保持沸腾状态;继续滴定至终点的体积(mL),应控制在0.5至1 mL以内。