剂。用硫酸亚铁标准溶液滴定剩余的重铬酸钾,溶液有橙色变为绿色,再变为棕红色即达终点,如果试样滴定所用硫酸亚铁标准溶液的毫升数不到滴定空白所用的硫酸亚铁毫升数的1/3时,则应减少土样称样量,重新测定;
(4) 同时作空白测定:取0.500g粉末状二氧化硅代替土样,其他步骤与样品测定相同。 2.5.3结果计算
土样易氧化碳含量(g/kg)=【(Vo-V)*C2*0.003*1.1*1000】/m 式中:Vo—滴定空白时消耗硫酸亚铁标准溶液体积,ml
V—滴定样品时消耗硫酸亚铁标准溶液体积,ml C2—硫酸亚铁标准溶液的浓度,mol/L 0.003—1/4碳原子的毫摩尔质量,g 1.1—校正系数, m—烘干土样的质量,g 9土壤水溶性有机碳的测定 2.6.1试剂仪器 试剂:蒸馏水。
仪器:容量瓶,振荡器,离心机,抽滤装置,0.45um孔径的滤膜,岛津TOC-Vcph有机碳
分析仪。 2.6.2方法步骤
精确称取10克过1毫米筛孔的鲜土置于100毫升锥形瓶中加入20毫升水振荡30分钟;取样液于10000r/min下离心10min,取上清液过0.45um滤膜,收集滤液。相同条件下以不加土样的蒸馏水作为空白对照,将空白样和测定样在岛津TOC-Vcph有机碳分析仪上进行测定,空白样和测定样每个均做三个重复。 2.6.3结果计算
土样水溶性有机碳含量(mg/L)=TC-IC-M 式中:TC—总碳,mg/L
IC—无机碳,mg/L
M—空白含有的水溶性有机碳量。 2.7土壤水溶性碳水化合物的测定 2.7.1试剂仪器
试剂:蒽酮,硫酸,蒸馏水。
仪器:容量瓶,锥形瓶,滤纸,烧杯,量筒,移液管,可见光分光光度计,水浴锅。 2.7.2方法步骤
称取通过1mm筛孔的风干土10g(精确到0.01g)置于250ml锥形瓶中加100ml水,在850C条件下恒温培养24H。将培养液过0.45um孔径的滤膜,定溶至100ml.。吸取1ml样液在冰浴条件下加入5ml蒽酮试剂,同时放入沸水浴准确加热10分钟后立即取出置于冰浴冷却。放至室温后用可见光分光光度计设定波长在625nm处进行测定。条件相同作标准曲线。 2.7.3 结果计算
水溶性碳水化合物(g/kg)=mg/L/100
10土壤微生物量碳的测定 2.8.1 试剂仪器
试剂:氢氧化钠,盐酸,氯化钡,氯化钾,无乙醇氯仿,硫酸钾,重铬酸钾,氧化汞,双酸溶液,邻啡罗啉指示剂。
仪器:DHP-9052型电热恒温培养箱,真空干燥器,真空,往复式振荡机,冰箱,消煮仪,
广口瓶,电子天平。 2.8.2方法步骤
(1) 氯仿纯化 量取500mL氯仿于1000mL分液漏斗中,加入50mL硫酸溶液[(H2SO4)=5%],充分摇匀,弃除下层硫酸溶液,如此进行3次。再加入50mL去离子水,同上摇匀,弃去上部的水分,如此进行5次,将下层的氯仿转移到蒸馏瓶中,在620C的水浴中蒸馏,馏出液存放在棕色瓶中,并加入约20g无水K2CO3,在冰箱的冷藏室中保存备用。
(2) 土壤熏蒸和提取 称取新鲜土壤(相当于干土25.g)3份分别放入3个100ml的烧杯中,一起放入同一干燥器中,干燥器底部放置几张用水湿润的滤纸,同时分别放入一个装有50mlNaOH溶液和装有约50ml无乙醇氯仿的小烧杯(同时加入少量抗暴沸的物质),用少量凡士林密封干燥器,用真空泵抽气到氯仿沸腾并保持至少2分钟。关闭干燥器的阀门,在250C的黑暗条件下放置24小时。打开阀门,如果没有空气流动的声音,表示干燥器漏气,应重新称样进行熏蒸处理。确认干燥器不漏气后,取出装有水和氯仿的玻璃瓶,擦净干燥器底部,用真空泵反复抽气,直到土壤没有氯仿为止。熏蒸结束后,将土壤转到250ml的三角瓶中,加入100ml硫酸钾溶液,置振荡机上在250C下振荡浸提30分钟,过滤。熏蒸开始的同时,称取等量土壤3份,同上用硫酸钾溶液浸提,浸提液立即测定或在-150C下保存。 (3) 微生物量碳的测定
1.用移液管准确吸取5.0ml浸提液放入消煮管中,各做3个重复。同时做空白做对照; 2.用移液管准确吸取重铬酸钾溶液2.00ml和双酸溶液15.0ml,用电子称称取HgO70.0mg,放入装有浸提液的消煮管中;
3.将装有样品的消煮管放入消煮仪器中,缓慢加热,在1700C~1800C沸腾回流30分钟; 4.待消煮管冷却后加蒸馏水10~20ml;
5.加入1滴邻啡罗啉指示剂,用硫酸亚铁溶液滴定剩余的重铬酸钾。 2.8.3结果计算
微生物量碳的计算公式为:微生物量碳(mg/kg)=(熏蒸的有机碳-未熏蒸的有机碳)/0.38
w(C)=Ec/KEC
式中:w(C) ——微生物生物量碳(BC)质量分数,mg.kg-1; Ec——熏蒸土样有机碳量与未熏蒸土样有机碳量之差, mg.kg-1;
KEC——氯仿熏蒸杀死的微生物体中的碳(C)被提取出来的比例,一般取0.38。
2.4.3结果计算
土样有机碳含量(g/kg)=【(Vo-V)*C2*0.003*1.1*1000】/m 式中:Vo—滴定空白时消耗硫酸亚铁标准溶液体积,ml
V—滴定样品时消耗硫酸亚铁标准溶液体积,ml C2—硫酸亚铁标准溶液的浓度,mol/L 0.003—1/4碳原子的毫摩尔质量,g 1.1—校正系数, m—烘干土样的质量,g