7. 激发态分子将能量转变为热能而回到基态，这一无辐射失能过程称为 。
8. 荧光分析中，溶剂分子吸收光能后，跃迁到 能级，在极短时间内返回到原来的振动能级而发射出和 相同波长的光，这种光称瑞利散射光。
9. 测定荧光强度时，只有在 时，溶液的荧光强度才与溶液浓度呈线性关系。
10. 在溶液中，处于激发态的溶质分子与 碰撞，把一部分能量传递给环境，在短时间内回到 态的最低振动能级，这一过程称为振动驰豫。
11. 处于激发态的分子可以通过 、 、 等不同途径回到基态，称为 。
12. 受溶液pH影响的荧光物质一般是 或 物质。
13. 当溶液中存在能吸收一部分激发光或荧光的其它物质时会使荧光强度下降的现象称为 。 14. 在荧光分析中常遇到 发射的瑞利散射光和拉曼散射光。 15. 荧光分析中，F=K'C，在 条件下成立。
16. 荧光的发生是由第一电子激发态的 能级开始的，与荧光物质分子激发至哪一个能级 。
17. 荧光波长比激发光波长稍长的原因是 。
18. 鉴定荧光物质的参考依据是荧光物质的 和产生的 ，也是定量测定时，最灵敏的条件。
19. 荧光的产生是由于荧光物质分子 后，分子中某些电子从 能级跃迁到 能级，再经过 跃迁下降至 最低振动能级，最后由这一能级降至 并发出荧光。
20. 荧光分析中，其它实验条件不变，当温度升高时，该荧光物质发射出的荧光强度 。 21. 荧光定量分析公式为F=KΦI02.3abC，应用此公式的限制条件是 。 22. 在分子荧光分析中， 光谱是选择激发光波长的依据，而 光谱是选择荧光波长的依据，测定的物理量是 ，应在其 方向进行检测。 23. 测定荧光的仪器需有两个 ，第一个放在光源和液槽之间，其作用是 ；第二个放在液槽和检测器之间，以滤去 ，让 通过。
24. 进行荧光测定时，要选择两个不同波长的光，一个是物质 的光，称为 ，另一个是物质 后发出的光，称为 。 25. 影响荧光测定的因素有 。
26. 要发生荧光，物质分子必须具备 的条件。
27. 荧光分光光度计的主要部件有 。
28. 使用F=2.3?KI0·abC=K?·C时，其条件是 ；影响荧光测定的因素为 。
29. 荧光分光光度法中的“?”表示 ，它的含义是 。
30. 荧光分析法是测定 强度，而不是测定 强度。 光谱是选择激发光波长的依据，而 光谱是选择荧光波长的依据。
31. 荧光分子与共存物质作用，使 显著下降的现象，叫作 ，共存物质如 等，称为 剂。 32. 常遇到的荧光熄灭剂有 、 、 等。 33. 是目前应用最广泛的原子吸收光源。
34. 在荧光分析法中，荧光强度与溶液浓度呈线性关系的前提是 。 35. 将苯、萘、蒽、碘苯按荧光效率大小顺序排列 。 36. 荧光分析法中 光谱是选择激发波长的依据，而 光谱是选择荧光光谱的依据。 37. 荧光分光光度计的基本结构包括 ，其中单色器的作用为 。 38. 荧光量子效率是指 。 39. 荧光分析中，其它实验条件不变，当温度升高时，该荧光物质发射出的荧光强度 。
三、名词解释
1. 单线激发态 2. 三线激发态 3. 振动弛豫 4. 荧光激发光谱 5. 荧光光谱 6. 荧光效率? 7. 荧光熄灭剂 8. 磷光 9. 荧光
10. 瑞利散色光 11. 光谱通带
12. 拉曼散色光 13. 荧光发射光谱 15. 荧光的熄灭
14. 注明（荧光分析法）荧光强度计算式F=2.3?I0abC中和种符号所代表的意义
四、是非题
1. 荧光分析的定量方法之一 ───直接比较法的定量公式是：Cx=Cs?Fx/Fs。 2. 三线激发态的能级比单线激发态的能级能量稍高。
3. 荧光测量时溶剂分子吸收光能后，电子返回到比原来能级稍高或稍低的振动能级而发射的光称为来曼散射光。
4. 由于分子在荧光发射前和发射后都存在振动驰豫，故荧光波长比激发光的波长长。 5. 荧光物质的分子型体和离子型体，各具有自己特殊的荧光光谱和荧光量子效率。
6. 荧光分析法比紫外可见分光光度法定性能力强的原因是有激发光谱和荧光光谱两个特征光谱可供比较。
7. 苯甲酸的荧光强度比苯酚的强。
8. 激发态分子与溶剂分子或其它溶质分子相互作用，使能量转移，这一过程称为内部转换。 9. 对于具有???*共轭结构的荧光物质，其荧光强度随溶剂的极性增加而减小。 10. 为了提高荧光光度法的灵敏度，合适的办法是增加待测液的浓度。 11. 硫酸奎宁在0.05 mol/L H2SO4中，分别用320nm和350nm波长的光激发，所制得的两个荧光光谱形状不同，荧光强度相同。
12. 一般荧光物质的溶液随着测量温度的降低而荧光效率提高。
13. 同一种荧光物质，在任何溶剂中，其荧光光谱的位置和强度都相同。 14. 一种荧光物质的荧光能量比激发光能量高。 15. 荧光分光光度计的光源是氢灯。
16. 用分子荧光分析法测定时，必须在溶液浓度极低的情况下进行，这是因为在高浓度下荧光物质将产生自熄灭和自吸收。
17. 用荧光分析法测定时，必须用稀溶液，因溶液浓度较高时偏离朗伯-比耳定律。
18. 荧光的发生是由第一电子激发态的最低振动能级开始的，而和荧光分子被激发至哪一能级无关。无19. 论电子被激发至哪一能级，多余的能量都首先以热的形式被消耗。 20. 随着温度升高，物质溶液的荧光效率增高，荧光强度增大。 21. 随着温度降低，物质溶液的荧光效率增高，荧光强度增大。 22. 荧光物质分子在光照射下激发到较高能级，在很短时间内首先因碰撞而下降到第一电子激发态各振动能级，然后下降至基态能级，从而发射出荧光。
23. 同一种荧光物质在任何溶剂中，其荧光光谱的位置和强度都相同。 24. 荧光物质的荧光光谱不随激发光波长的改变而改变。 25. 荧光分析中，发射单色器放在与激发光垂直的方向。
26. 利用微量氟离子对铝—桑色素配合物的荧光熄灭作用，可测定氟离子的含量。 27. 用荧光熄灭法进行定量分析时，溶液荧光强度和待测离子浓度成正比。 28. 荧光分析法既可用于测定有机化合物，也可用于测定无机元素。
29. 在荧光分析中，应在一定的时间内，避光的条件下进行荧光强度的测定。
五、简答题
1. 试解释为什么荧光分析法的选择性和灵敏度均优于紫外—可见分光光度法。 2. 简述影响荧光效率的因素。
3. 试述荧光分光光度计和可见紫外分光光度计比较，在组成部件和测量光强度的布局上有何不同？ 4. 试解释为什么增大入射光强度（光源强度）能提高荧光测定的灵敏度，而不能提高紫外—可见分光光度法的灵敏度？
5. 说明荧光发射光谱和荧光激发光谱两者的差别，哪一种类似于吸收光谱。 6. 试述能发射荧光的物质在分子结构上有哪些特点？ 7. 画出荧光计结构示意图，并写出定量分析公式。
8. 一般无机化合物不发荧光，可以通过哪两种途径用荧光分析法测定无机物？ 9. 作荧光强度测量时，标准荧光物质的作用是什么？如何进行测量的？ 10. 试述荧光强度与溶液浓度成正比的条件,为什么? 11. 试述何谓荧光物质的激发光谱和荧光光谱? 12. 试述荧光是如何产生的?
13. 绘制荧光测定装置方框图,并说明某主要部件和作用。
14. 在荧光计中，第一单色器与第二单色器的位置及其作用是怎样的。 15. 荧光定量分析为什么要在很稀的溶液中测定？
16. 与紫外可见分光光度法相比，荧光分光光度法具有较高的灵敏度，为什么？ 17. 影响荧光测定的因素有哪些？
18. 绘出光度分析和荧光分析仪器的结构方框图，并比较它们的异同点。
六、计算题
1. 用荧光法测定复方炔诺酮片中炔雌醇的含量时，取本品10片（每片含炔雌醇31.5～38.5?g），研细溶于无水乙醇中，稀释至100ml，过滤，取滤液5.0ml稀释至10.0ml，在307nm处测定荧光读数。如炔雌醇对照片的乙醇溶液（1.75?g/ml）在同样测定条件下荧光读数为65，则合格片的荧光读数应在什么范围之间？
2. 利用连二亚硫酸钠Na2S2O4可熄灭核黄素（维生素B2）发出的荧光来测定奶粉中的VB2含量，精确
－
称取0.500g奶粉，加pH4.6 HAc-Ac缓冲液沉淀蛋白质，移入50ml容量瓶中，加水至刻线，振摇，过滤，取滤液测得荧光强度Fx为28.5，取出比色皿加入少量Na2S2O4，迅速摇匀使VB2荧光熄灭，立即再测荧光强度F?0为6.2。另取浓度为0.25μg/ml VB2标准液，测得Fs=50，取出比色皿同法加入Na2S2O4后测得F0为5.4。试计算.05g奶粉中含VB2的?g数。
3. 滂铬蓝黑R染料，在HAc-NH4Ac缓冲液中能与Al3+反应，生成橙红色荧光化合物，标准溶液测定结果如下：F0=3.2
Al3+（?g/ml） 2 6 10 14 18 F 13.2 33.4 53.8 73.0 93.4
用同法测定水样，得荧光强度为45.0，求该水样中Al3+的含量（mg/L）。
4. 用荧光法测定食品中维生素B1：称取2.00g食品，用HCl浸取出维生素B1后，稀释成100ml，精确吸取该溶液15.00ml，用吸附剂除去干扰物后稀释成250ml。分别取此液各5.00ml，置于A和B容器中，向A中加入碱性铁氰化钾溶液氧化维生素B1为硫胺荧。B留作对照。另取维第素B1标准淮
－
（0.200?g·ml1）5.00ml两份，分别置于C和D容器中，向C中加入碱性铁氰化钾使无氧化，D作对
?1g照。用异丁醇分别萃取四种溶液，都定容为10ml，数据见下表。求该食品中维B1含量（?g·）。
溶 液 荧光强度
A（经氧化处理样品液） 52.0 B（未经氧化处理样品液） 8.0 C（经氧化处理标准液） 62.0 D（未经氧化处理标准液） 7.0
5. 取5.00ml含氨基乙酸的溶液置于一个500ml容量瓶中，并以蒸馏水稀释至刻度，用移液管取5.00ml稀释于一个10ml容量瓶中，并以pH8.7的硼酸盐缓冲液稀释至刻度，当它与1.00ml由25mg荧胺溶于100ml丙酮所配成的溶液反应后，测量这溶液的荧光。（荧胺与氨基乙酸反应可生成一荧光产物）。从工作曲线上读得最后溶液中含1.14mg/L的氨基乙酸，计算在最初的5ml溶液中氨基乙酸的浓度。
6. 10ml样品含还原型NADH（烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的还原型）相对于空白溶液的荧光强度为26.0。当10?mol NADH加入此样品液（无体积变化）中，相对荧光强度增加到78.3，计算样品中NADH的含量（?mol/ml）。
7. 用荧光分析法测定某食品中的维生素B1的含量，1.0g试样处理后定容为100ml，标准液为0.20?g/ml。测得平行样品数据如下表：求该食品中VB1含量（?g/g）
试 液 经氧化处理后的标准液 未经氧化处理的标准液 经氧化处理的试样液 未经氧化处理的试样液 荧光强度 72.0 8.0 55.0 7.0 8. 用荧光分析法测定食品中维生素B2的含量：称取2.0g食品，先照后用10ml氯仿萃取（萃取率100%），取上清液2.0ml，再用氯仿稀释为10ml。维生素B2氯仿标准液浓度为0.10?g/ml。测得平行样数据为F0=1.5，Fs=69.5，Fx=61.5，求该食品中维生素B2含量（?g/g）
9. 设721分光光度计的可信测定A值为0.20～0.65。今用1cm吸收池，于525nm波长下测定KMnO4溶液（KMnO4分子量为158，?525nm=2.5?103）。试预算出在该条件下KMnO4溶液的可信测定浓度范围。 10. 用荧光分析的比较法测定VitB1含量, 其标准液浓度为8.0mg/L时, 测得荧光强度为0.24, 取样品2g, 溶于100ml盐酸中, 测定其荧光强度为0.20, 空白液荧光强度为0.004, 求样品中VitB1的含量?