（2）重组抗原：23kDa膜蛋白、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)、原肌球蛋白(TM)、 31/32kDa蛋白、热应激蛋白(heat shock protein)、钙结合蛋白(SmE16蛋白)、P38蛋白、P50蛋白
（3）模拟抗原：噬箘体随机肽库技术获得的抗原。
（4）其他抗原：钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)、NP30、水蛭可溶性抗原(LSA)、蚯蚓抗原(LtAg)。
11．对疑似疟疾患者，你将如何选择免疫学方法？ ? 抗体检测
（1）间接荧光抗体试验(IFA)：这是国内外应用最广的检测疟疾抗体的方法，操作简便，敏感性和特异性均好。 将含有疟原虫的血细胞洗涤后制成厚血片，即为抗原片。一般认为最好用同种疟原虫的抗原片检测同种抗体，可以增强抗体反应强度。但目前条件，只有恶性疟原虫可以进行体外连续培养，而间日疟及三日疟原虫取材困难，抗原片大多用与其有共同抗原的食蟹猴疟原虫代替间日疟原虫，巴西猴疟原虫代替三日疟原虫；但曾有用培养的恶性疟原虫作抗原片，检测间日疟病人抗体获得较好效果的报道。抗原血片干燥后，保存在-20℃冰箱中，可用一年。
（2）酶联免疫吸附试验（ELISA）： 国内常用恶性疟原虫或食蟹猴疟原虫为抗原作ELISA，检测恶性疟和间日疟的抗体，阳性检出率可达90 %以上。朱福耀等(1978)以食蟹猴疟原虫经反复冻融，超声粉碎，冷浸提取可溶性抗原进行ELISA试验。检测恶性疟病人血清77份，与镜检原虫的符合率为96.1%；85份间日疟病人血清与镜检的阳性符合率为98.8％，无疟史儿童血清67份，均为阴性。 （3）斑点酶联免疫吸附试验（dot-ELISA）： 由于该法的抗原用量小，操作简便，已迅速被推广应用。王秀珍等(1990)用辣根过氧化物酶标记的食蟹猴疟原虫可溶性抗原，进行直接法的免疫斑点试验。78例间日疟病人血清，抗体阳性率为96.1％，150例健康人的假阳性为4.7％；IFA法平行检测间日疟病人的阳性率为94.8％，健康人的假阳性为2％；两者在统计学上无显著差异。
（4）间接血凝试验(IHA) ：早期应用的间接血凝试验操作简便，不需要特殊设备，反应较快；但因疟疾抗体出现较晚，敏感性较差，在热带、亚热带地区居民血清中又常有使红细胞发生凝集的非特异性因子，故使用受到了限制。
? 抗原检测 检测抗原比检测抗体更能说明待检者是否存在活动性感染，用于疟疾早期诊断。
（1）琼脂扩散试验：操作简单，但扩散时间较长，且敏感性不高。
（2）放射免疫试验：以单克隆抗体代替抗血清，提高了特异性。但敏感性仍较
低，敏感度为8虫/108红细胞。
（3）ELISA法：高琪等(1990) 用兔抗恶性疟原虫血清包被载体，使其敏感度提
高为5虫/106红细胞；国外报道，酶联免疫吸附试验双抗体夹心法的检测阈值为1虫/ 103红细胞
12．对疑似弓形虫病患者，你将如何选择免疫学方法？ ? 抗体检测
（1）DT：广泛用于本病的临床诊断和流行病学调查。是用来检测IgG抗体的。感染后1～2周出现阳性，3～5周抗体效价达高峰，以后逐渐下降，可维持多年。抗体效价1∶128阳性提示为隐性感染；1∶256为活动性感
染;1∶1024为急性感染。其缺点为需要活虫进行操作。
（2）ELISA：是当前诊断弓形虫感染应用最广的技术。Camargo等(1978)用间接ELISA法测弓形虫IgM抗体，发现急性病例检出率较高，但类风湿因子阳性者出现假阳性反应。
双抗体夹心ELISA是采用抗IgM抗体包板，样本中的IgG、类风湿因子及
抗核抗体等均在第一步捕获IgM步骤中被分离去，从而消除了非特异的干扰，提高了敏感性及特异性。
（3）dot-ELISA：有较高的特异性，在同一批血样中，此法的检出结果比常规ELISA及IHA为高，有“简、快、敏、特”等优点，便于基层推广应用。
（4）IFAT：检测IgM和IgG抗体。具灵敏、特异、快速、重复性好等优点，与DT基本一致。但如有类风湿因子、抗核抗体阳性时，可引起假阳性反应。应用本法检查IgM抗体可作为早期诊断。本法不需特殊试剂及活抗原，固定于玻片上的虫体抗原，保存方便，抗原性稳定。
（5）IHA ：本试验方法与DT结果符合率高。但一般在感染后一个月左右出现阳性。结果判断同IFA。 IHA的主要优点是简便、快速、灵敏，已广泛应用于流行病学调查。重复性差和致敏红细胞不稳定是其缺点。 IHA对急性感染早期血清缺乏敏感性。由于IHA所测的特异性抗体高峰值出现于感染过程的稍后期，所以用本法对已确诊的先天性弓形虫病患儿血清，往往呈阴性结果，也不宜用于诊断妊娠妇女的急性弓形虫病，以用于慢性或再燃性感染的检测为好。
? 抗原检测 循环抗原(CAg)的检测，不但可显示急性活动性感染，也可检测治疗效果。采用免疫学方法检测宿主细胞内的病原（速殖子或包囊）在血清及体液中的代谢或裂解产物（循环抗原），这是早期诊断和确诊的可靠方法。国内外学者建立了McAb-ELISA以及McAb与多抗的夹心ELISA法，检测急性患者血清循环抗原，其敏感度为能检出血清中0.4μg/ml的抗原。
13. 为什么说免疫诊断技术是寄生虫病不可缺少的实验诊断技术？如何发展其技术？
（1）病原学诊断的局限性 临床上有时很难对可疑感染者作出病原学诊断：轻度感染、早期感染、隐性感染、慢性期和晚期感染、雄虫单性寄生、异位寄生、幼虫移行症、深部组织内寄生等。 病原学检查费时、费力，不便于现场大规模普查之用：随着我国寄生虫病防治工作的深入发展，寄生虫感染率和感染度均显著下降，病原学检测的敏感性较差，用过去经典的寄生虫学检验方法不易查见病原体。 （2）免疫诊断在寄生虫病诊断中的地位 ? 方法较为敏感、特异，可检测出存在的微量抗体或抗原。对于临床上的疑似患者，
可以提供比较可靠的实验诊断依据。
? 在寄防工作中，采用寄生虫病免疫诊断方法有助于摸清传染源，监测疫情变化以及
评价防治效果。
? 免疫诊断结果一般只有辅助诊断价值，在对检测结果进行分析时，应充分考虑患者
和实验诊断中的各种影响因素，结合病史、症状及体征进行综合分析。（为了提高诊断效果，在有条件的地区，可以同时应用两种免疫学方法进行检测，以取长补短，提高可靠性。必要时，尚需进行动态监测和重复实验，以作出客观、准确的判断。 ）
改进方法
1. 载体的改进
（1）凹孔法(塑料反应板、凹玻片) （2）薄膜法(NC、混合纤维素酯) （3）圆片法(尼龙圆片) （4）切片法(厚度约4μm） （5）纸条法(DGS-COPT) 2. 标记技术和印迹技术 （1）免疫标记技术 （2）免疫印迹技术 3. 改进抗原 （1）纯化抗原 （2）基因重组抗原
4. 进一步改进和完善检测系统
(1)凝集反应：颗粒性抗原与相应抗体在适当的电解质存在下结合后，发生肉眼可见的凝集反应，具有特异性。既可定性又可半定量检测。如间接血凝试验、胶乳凝集试验等。 (2)沉淀反应：可溶性抗原与相应抗体结合后形成不溶性沉淀物。如环卵沉淀试验。
(3)免疫电泳技术：由免疫扩散与电泳结合的一种免疫学分析技术，既可加快沉淀反应速度，又可利用各蛋白组分带电荷不同，将其分开，再与抗体起反应。使本法更加微量化、多样化。如对流免疫电泳试验。
(4)免疫标记技术：用萤光素、放射性同位素、酶、胶体金及化学（或生物）发光剂等作为示踪物，标记抗原或抗体进行抗原抗体反应；并借助荧光显微镜、射线测量仪、酶标检测仪或发光免疫测定仪等精密仪器，对试验结果直接观察或进行自动化测定。可以在细胞、亚细胞及分子水平上，对抗原抗体反应进行定性和定位研究；或应用各种液相和固相免疫分析方法，对体液中的半抗原、抗原或抗体进行定性和定量测定。该技术在敏感性、特异性、精确性及应用范围等方面远远超过一般免疫学方法。