蛋白质印迹(Western blot)样品制备(2)

在这种情况下，必须在非变性条件下进行蛋白质印迹，数据表的应用部分将对此加以说明。一般来讲，非变性条件即不向样品和迁移缓冲液中加入 SDS，并且不加热样品。 某些抗体只能识别非还原形式的蛋白质（尤其是半胱氨酸残基），在这种情况下，上样缓冲液和迁移缓冲液中不应添加 β-巯基乙醇和 DTT。 蛋白质状态 凝胶条件 上样缓冲液 迁移缓冲液 还原、变性 还原且变性 添加 2-巯基乙醇或 DTT 和 SDS 添加 SDS 还原、天然 还原且天然 添加 2-巯基乙醇或 DTT 和 SDS 不添加 SDS 氧化、变性 非还原且变性 不添加 2-巯基乙醇或 DTT 和 SDS 添加 SDS 氧化、天然 非还原且天然 不添加 2-巯基乙醇或 DTT 和 SDS 不添加 SDS 一般原则：除非数据表特别指出，蛋白质都为还原且变性状态。