YANGZHOU UNIVERSITY CHEMICAL EXPERMENT PAPER
实验名称 甲基橙的制备 时间 地点 班级 姓名 实验1 甲基橙的制备 一、实验目的
熟悉重氮化反应和偶合反应的原理，掌握甲基橙的制备方法。 练习重结晶的实验操作。
二、实验原理
三、实验操作
1、重氮盐的制备
在250ml烧杯中、加入 (10ml 5％NaOH+2.1g对氨基苯磺酸(M=209))，△，溶解，冰浴冷却。另在一小烧杯中配制（0.8gNaNO2+6ml水）。并加入250ml烧杯中。维持温度0－5℃，搅拌，慢慢滴加13.4ml（3+10HCl），反应15min。 2、偶合反应
继续滴加（1.3ml N,N-二甲基苯胺（1.2g，M=121）+1ml 冰醋酸(1.05g，ρ=1.049)），搅拌10min再缓缓加入约40ml 5% NaOH，至产物变为橙色（pH试纸检验为碱性）。将反应物置水浴中加热5min，冷至室温后，再冰浴冷却，使甲基橙晶体析出完全。抽滤，依次用少量水、乙醇洗涤产品，压紧抽干并80℃烘干。
四、数据记录与处理
实验制得粗品甲基橙 g，外观评价： 。 取少量产品加水溶解，各取2滴加入：
5% NaOH溶液中，呈 色 稀HCl溶液中， 呈 色
(5%NaOH,新配，1000ml，3+10HCl，新配，班级统一配)
五、实验注意事项
1、对氨基苯磺酸为两性化合物，酸性强于碱性，它能与碱作用成盐而不能与酸作用成盐。 2、重氮化过程中，应严格控制温度，反应温度若高于5℃，生成的重氨盐易水解为酚，降低产
率。
3、若试纸不显色，需补充亚硝酸钠溶液。
4、重结晶操作要迅速，否则由于产物呈碱性，在温度高时易变质，颜色变深。用乙醇和乙醚洗
涤的目的是使其迅速干燥。 六、思考题
1、在重氮盐制备前为什么还要加入氢氧化钠？如果直接将对氨基苯磺酸与盐酸混合后，再加入亚硝酸钠溶液进行重氮化操作行吗？为什么?
2、制备重氮盐为什么要维持0-5℃的低温，温度高有何不良影响？
3、重氮化为什么要在强酸条件下进行？偶合反应为什么要在弱酸条件下进行。
实验2 菠菜中色素的提取及薄层色谱法分离
一、实验目的 二、实验原理
叶绿素是叶绿酸的酯，不溶于水，易溶于石油醚等非极性溶剂。乙醇作为辅助溶剂使得叶片表面与石油醚兼容。提取剂最佳配比：石油醚与乙醇3:2，10min。
薄层色谱是一种简单的色谱法。选用有机溶剂作展开剂。较好的选择是：石油醚与乙酸乙酯3:2。计算Rf值。
三、实验操作
1、玻璃薄片的制作
载玻片2片，用酒精棉球擦净，晾干，称取薄层层析硅胶H: 2g+5mlH2O,调匀后即用倾注法铺板，平放30min，晾干，置烘箱升温至105℃，活化30min，备用。
（同时预先烘干磨口瓶和支型管） 2、菠菜叶绿素的提取
取4片下午的（去茎）菠菜叶片3g，剪碎，置于干燥的研钵中，加入提取剂（12ml石油醚+8ml乙醇）研磨，提取时间10min，补加石油醚8ml。过滤至分液漏斗。加20ml NaCl溶液洗去乙醇，再用10mlH2O洗去乙醇。从上口将深绿色醚层转入100ml磨口瓶，加3gNa2SO4,避光放置15min干燥。转入支型管，减压浓缩。 3、薄层色谱法分离
在制好的薄板1cm处用毛细管点样，+5ml展开剂（3ml石油醚+2ml乙酸乙酯），放入点样片，盖上展析缸的盖子，轻摇，观察溶剂前沿及色斑。晾干，测量，计算Rf值。
四、 数据记录与处理
距离（cm） Rf
溶剂 胡萝卜素 叶绿素a 叶绿素b 叶黄素 五、参考文献：
1、张素霞，菠菜叶中叶绿素提取工艺研究。中国食物与营养，2008.5:40-43 2、李凯，薄层色谱方法的改进，实验室科学，2008.1:163-166
实验3糖的性质及糖的旋光性测定
一、实验目的 二、实验原理
①葡萄糖G（CH2OH(CHOH)4CHO，醛糖，右旋糖）与果糖F（CH2OH(CHOH)3COCH2OH，酮糖 ，左旋糖）互为同分异构体，Fehling试剂只氧化醛不氧化酮：
CH2OH(CHOH)4CHO+2Cu(OH)2 ―△→ Cu2O+ CH2OH(CHOH)4COOH+2H2O 而酮糖与间苯二酚作用发生Seliwanoft颜色反应。二者以此区分。
蔗糖是低聚糖，可水解为G+F;麦芽糖水解为G+G;淀粉和纤维素都是均聚糖，水解产物均为G.
②酒石酸是光活性物资，叫旋光性。逆时针旋转记为:“左旋，L, (―)”；顺时针:“右旋，D, (+)”。手性化合物都具有旋光性。蔗糖[α]D20= +66.5°，用旋光仪可测其旋光度α，并可根据公式： [?]D?20??0??L (其中L=1),计算浓度ρ0.
三、实验操作、现象及结论
现象、 结论 Molish试剂 葡萄糖 glucose 果糖 fructose 蔗糖 sucrose 淀粉 starch 麦芽糖 Maltose 纤维素 cellulose 未知糖 Fehling试剂 Seliwanoft 试剂 水解反应及Fehling检验
结论：未知糖为 。
四、数据记录与处理
①用蒸馏水，测仪器的旋光度校正值为α0= ②蔗糖甲的测量值α③蔗糖甲的测量值α
甲
= ，ρ= ，ρ
甲
= g/cm3 = g/cm3
乙 乙
（在本次实验发给学生滤纸，用铅笔预先画好半径1cm、2cm、3cm的同心圆、及过圆心
的十字线，下次实验用）
实验4氨基酸的性质检验及氨基酸的层析法分离
一、实验目的 二、实验原理
氨基酸与茚三酮有颜色反应。
蛋白质的水解中间产物含有肽键，双缩脲反应呈一定颜色。
早在1944年，滤纸作为固定支持物的纸层析就开始应用。成分是纤维素，含-OH亲水基团，
可吸附一层水或其他溶剂作为固定相，有机溶剂作流动相，作上行层析的分配层析，利用分配系数（??cscl）的不同在滤纸中作类似塔板原理的分配。计算Rf值。
（在前一次实验发给学生滤纸，用铅笔画好半径1cm、2cm、3cm的同心圆、及过圆心的十字线）
三、实验操作及数据记录与处理
①、1%甘氨酸1ml+3滴茚三酮，△，呈： 色.
②、2ml蛋白溶液+2mlNaOH+5滴CuSO4, △，呈： 色.
③、在准备好的层析专用滤纸上点样。（甘氨酸G；丙氨酸，A；亮氨酸L及未知样，并标记）。插入1cm的滤纸卷作上行层析的灯芯。将展开剂（50:10:1的乙醇、水、醋酸）加入康维皿，将点好样的层析纸放好，盖好盖子，保持展开剂的蒸汽浓度，观察展开剂的扩散前沿至3cm圆圈时取出，60℃烘箱烘干，喷雾0.2%茚三酮，再烘干。计算Rf值。
四、 数据记录与处理
距离cm Rf G： A： L： 未知样