糖化血红蛋白(2)

2019-08-29 00:07

糖化血红蛋白和血糖有何差别? 血糖是从食物中的碳水化合物分解而来的血液中的单糖,通常仅指葡萄糖。血糖测试结果反映的是即刻的血糖水平。糖化血红蛋白测试通常可以反映患者近8~12周的血糖控制情况。

糖化血红蛋白是糖尿病监测的―金标准‖

随着人们对糖尿病知识的逐步了解,多数人已意识到空腹和餐后2小时血糖监测的重要性,并常常把二者的测定值作为控制血糖的标准。其实不然,空腹和餐后2小时血糖是诊断糖尿病的标准,而衡量糖尿病控制水平的标准是糖化血红蛋白。空腹血糖和餐后血糖是反映某一具体时间的血糖水平,容易受到进食和糖代谢等相关因素的影响。糖化血红蛋白可以稳定可靠地反映出检测前120天内的平均血糖水平,且受抽血时间,是否空腹,是否使用胰岛素等因素干扰不大。因此,国际糖尿病联盟推出了新版的亚太糖尿病防治指南,明确规定糖化血红蛋白是国际公认的糖尿病监控―金标准‖。如果空腹血糖或餐后血糖控制不好,糖化血红蛋白就不可能达标。 4区别血糖 编辑

血糖是从食物中的碳水化合物分解而来的血液中的单糖,通常仅指葡萄糖。血糖测试结果反映的是即刻的血糖水平。糖化血红蛋白测试通常可以反映患者近8~12周的血糖控制情况。糖化血红蛋白是糖尿病诊断新标准和治疗监测的―金标准‖ 随着人们对糖尿病知识

的逐步了解,多数人已意识到空腹和餐后2小时血糖监测的重要性,并常常把二者的测定值作为控制血糖的标准。其实不然,空腹和餐后2小时血糖是诊断糖尿病的标准,而衡量糖尿病控制水平的标准是糖化血红蛋白。空腹血糖和餐后血糖是反映某一 具体时间的血糖水平,容易受到进食和糖代谢等相关因素的影响。糖化血红蛋白可以稳定可靠地反映出检测前120天内的平均血糖水平,且受抽血时间,是否空腹,是否使用胰岛素等因素干扰不大。因此,国际糖尿病联盟推出了新版的亚太糖尿病防治指南,明确规定糖化血红蛋白是国际公认的糖尿病监控―金标准‖。如果空腹血糖或餐后血糖控制不好,糖化血红蛋白就不可能达标。 5检测方法 编辑

目前临床实验室中应用的糖化血红蛋白检测方法主要有两大类: 一类方法基于糖化血红蛋白与非糖化血红蛋白所带的电荷不同, 如离子层析法、电泳等方法; 另一类方法基于血红蛋白上糖化基团的结构特点, 如亲和层析、离子捕获法和免疫法等。其中高效液相离子层析法(H PLC )被公认为金标法。

1. 离子层析法 离子层析法精密度高、重复性好且操作简单, 被临床广泛采用。检测原理由于血红蛋白?? 链N 末端缬氨酸糖化后

所带电荷不同, 在偏酸溶液中总糖化血红蛋白( GH b) 及H bA 均具有阳离子的特性, 因此经过阳离子交换层析柱时可被偏酸的缓冲液平衡过的树脂来吸附, 但二者吸附率不同, GH b正电荷较少吸附率较低, H bA 正电荷较多吸附率较高。用不同pH 的磷酸盐缓冲液可以分次洗脱出GH b 和H bA, 用KCN 可将H b转化为高铁氰化血红蛋白, 用分光光度计测定。或者得到相应的H b层析谱, 其横坐标是时间, 纵坐标是百分比。HbA1c值以百分率来表示。现在大部分都用全自动测定仪测定,如日本TOSOH 公司生产的全自动糖化血红蛋白分析仪曾应用于美国糖尿病控制和并发证试验( DCCT) 研究, 其离子交换H PLC法是H bA1c检测的金标准。当前推出的HLC- 723G7从开机到报告第一个结果仅需3. 6 m in, 标本无需前处理, 操作维护都非常方便, 是目前测试GH b精密度、准确性最高的方法。国内主要采用B io- Rex70阳离子树脂微柱层析法, 其微柱可重复使用多次,更大型的仪器有SCIENTIFIC公司的Hb- Gold, 除可全自动测定糖化血红蛋白外, 还可分离检测血红蛋白的600多种变异体和亚型, 用于地中海贫血等疾病的诊断。但其缺点是价格昂贵, 仅在一些发达国家使用, 且容易受到如下干扰: 胎儿血红蛋白(H B -F)与HbA1 c的带电性很相近, 在离子交换HPLC分析图上可能呈现一个独立的H b- F 峰, 也可能与H bA1c 峰重叠( 视离子交换柱的分辨能力而定)。

2. 手工微柱法 手式微柱操作会受到人工因素影响, 可能会洗脱不完全或过度洗脱并受外界环境温度的影响, 而某些血红蛋白如H

bF异常增加时, 也会与糖化血红蛋白同时洗脱, 从而使结果产生偏差。目前有B io- Rad和西班牙B IOSYSTEM S等多家公司产品, 相应的仪器以英国DREW SCIENTIFIC公司DS 5糖化血红蛋白仪为例( B io- Rad公司IASTA 亦为同一产品), 采用微柱法离子交换层析和梯度洗脱技术可全自动分离血红蛋白的变异体与亚型, 除可测定糖化血红蛋白外, 还可同时检测出血红蛋白S( H bS)与血红蛋白C( H bC )的存在与否, 在计算糖化血红蛋白值时会自动扣除变异体产生的影响, 从而使结果更为准确, 可靠, 变异系数( CV ) 值< 2%。同时该仪器配有专门的稀释溶血器, 可直接进行全血操作, 5 m in即可报告结果, 并自动储存样品检测结果, 层析柱价格也较为低廉, 适合于较多标本的医院检测,但由于手工操作层析时间和微柱的质量不易控制, 易产生操作技术误差, 重复性欠佳。

3. 琼脂凝胶电泳法 H b及H bA1带正电荷, 电泳时向负极移动。因为H bA 的β 链N - 末端所带电荷被糖基消除, 带电量少于H bA, 等电点低, 泳动速度慢, 所以H bA1 即GH b本身带红色, 所以可直接比色或扫描。用H bA1 占H b的量来表示。毛细管电泳也能分离检测糖化血红蛋白和血红蛋白的变异体。普通电泳法对H bA 和H bA1 分离效果不理想, 目前尚无商品化且具有批量样本通过能力的仪器面世, 相当程度地限制了该方法的临床应用。

4. 等电点聚集法 也是测定GH b的新技术, 它是在聚丙烯酞凝胶中加人载体两性介质( 如am pho lin) 的薄板上形成一个由阳极

到阴极逐渐增加的pH 梯度, 溶血液中各个组份将移动到各自的等电点的pH 位置上, 这样就得到比一般电泳法更好的分划效果和比较集中的色带, 通过分辨率高的微量光密度仪扫描, 可以准确地测定出各自组份的含量。由于它能够分辨出一级结构不同的H bA、H bA c、H bF、H bS 及H bC等, 可完全避开各种物质的干扰, 是一种理想的方法, 但仪器价格相当昂贵, 难于用作常规检测。

5. 亲和层析 利用生物高分子能与相应的专一配基分子可逆结合的原理, 将配基通过共价键牢固地结合于固相载体上制得亲和吸附系统, 带有杂质的高分子分离目的物在一定条件下,能以某种次级键与已同相化的配基结合, 而杂质则不吸附, 除去杂质后变换条件, 又可以使待分离的高分子物质重新解离, 获得纯化。GHb的亲和色谱载体是氨基苯硼酸琼脂糖凝胶, 当总的GHb通过载体时, 稳定型GH b分子表面含葡萄糖的顺式二糖醇部分与载体固定相上的硼酸基因呈配位特异结合, 其它非糖化Hb及不稳定型GHb, H bF等, 随流动相(天门冬酞胺缓冲液)流出, 然后用另一种含糖或多经化合物流动相(山梨糖醇缓冲液)将GH b洗脱下来, 利用两部分H b本身的颜色, 在415 nm 条件下测定并计算出亲和色谱所测的GH b。

英国DREW SC IENT IFIC 公司的DST 糖化血红蛋白分析仪是一种快速床边糖化血红蛋白仪。它采用硼酸亲和层析法, 只需10 ul全血即可在4 m in 内快速分离检测糖化血红蛋白, 为临床提供即时的化验结果, 从而使医生在患者就诊的第一时间明确诊断并制定相


糖化血红蛋白(2).doc 将本文的Word文档下载到电脑 下载失败或者文档不完整,请联系客服人员解决!

下一篇:毕业设计-谈宇辉

相关阅读
本类排行
× 注册会员免费下载(下载后可以自由复制和排版)

马上注册会员

注:下载文档有可能“只有目录或者内容不全”等情况,请下载之前注意辨别,如果您已付费且无法下载或内容有问题,请联系我们协助你处理。
微信: QQ: