紫杉醇的提取和性能
姓名:高海艳
学号:51151300057 专业:种子植物分类学
紫杉醇的提取和性能
一、紫杉醇简介
紫杉醇(Taxol)是一种复杂的具有抗癌活性的二萜类生物碱[1](结构如图一所示),是从短叶红豆杉(Taxus brevifolia)和东北红豆杉(Taxus cuspidata)的树皮中提取出来的。具有抗肿瘤、抗白血病的显著作用,主要用于治疗卵巢癌和乳腺癌[2],被人们誉为“植物黄金”。
Vidensek[3]对东北红豆杉(Taxus cuspidata)幼苗以及成树的不同部位中的紫杉醇含量作了分析结果表明成树紫杉醇的含量高低依次为树皮>树叶>树根>树干>种子>心材,幼苗的紫杉醇含量高低依次则是树叶>树根>嫩枝条>心材。另外,对于不同植物来源的组织培养细胞中的紫杉醇含量陈未名等[4]作了大量的研究,结果表明愈伤组织中的紫杉醇含量以云南红豆杉为最高其次为欧洲红豆杉,再次为红豆杉;而悬浮培养细胞中的紫杉醇含量从高到低依次为云南红豆杉、欧洲红豆杉、红豆杉。 二、紫杉醇提取工艺
1、从原植物体中提取紫杉醇[5]:
原料的干燥及粉碎
有机溶剂提取:甲醇
除去浸膏
固—液萃取
红豆杉枝叶、树皮、树枝的采集
2、细胞培养高效提取紫杉醇[6]:
液—液萃取 己烷沉淀 硅胶柱层析 结晶 TLC检测 高效液相色谱检测
添加植物激素
诱导愈伤组织
红豆杉幼茎 制备及接种外植体 30 天 柠檬酸 转VC 筛选抗褐化剂 接 活性炭
直接继代
确定愈伤组织继代培养 剥离后继代 多至TLC-紫外分光光度法 分离检测紫杉醇 次生 继长普通平板培养 细胞密度 代 稳培养方式 条件培养 植板率 定 看护培养 筛选高产细胞株
确定接种细胞培养时间 稳
定
高
产
细
胞
添加多种代谢调节因子 配制培养基 株 小剂量连续添加 细胞悬浮培养 确定培养方式 一次性大剂量添加
确定代谢调节因子加入时间
配制培养基 确定培养基 高效诱导体系 三、紫杉醇药用功能及体制
1、紫杉醇药用功能:
紫杉醇是目前已发现的最优秀的天然抗癌药物,在临床上已经广泛用于乳腺癌、卵巢癌和部分头颈癌和肺癌的治疗[12]。 2、紫杉醇作用于癌症的机制:
1979年,美国爱因斯坦医学院的分子药理学家Horwitz博士阐明了紫杉醇独特的抗肿瘤作用机制:紫杉醇可使微管蛋白和组成微管的微管蛋白二聚体失去动态平衡,诱导与促进微管蛋白聚合、微管装配、防止解聚,从而使微管稳定并抑制癌细胞的有丝分裂和防止诱导细胞凋亡,进而有效阻止癌细胞的增殖,起到抗癌作用(如下图所示)[7-11]。
参考文献
[1] Wani MC,Taylor HL,Wall ME,et al.Plant antitumor agents VI:The isolation and structure of taxol,a novel antilekemic and antitumor agent from Taxus Brevifolia[J].Am Chem Soc,1971,93:2325.
[2] 赵凯,周东坡. 抗癌药物紫杉醇的提取与分离纯化技术[J].生物技术通讯,2004,15(3):309-312.
[3] Vidensek N.Taxol content in bark,wood,root,leaf,twig and seeding from several Taxus specials[J].J Nat Prod,1990,53(6):1609.
[4] 陈未名.红豆杉属植物的化学成分和生理活性[J].药学学报.1990,25:277.
[5] 李春斌,佟憬憬,范圣第.东北红豆杉紫杉醇提取纯化和HPLC检测[J].大连民族学院学
报.2005,7(5):22-25.
[6] 赵晶.东北红豆杉细胞培养高效提取紫杉醇技术体系研究.
[7] Schiff P B, Fan J, Horwitz S B. Promotion of microtubule assembly in vitro by taxol [J]. Nature, 1979, 277: 665-667.
[8] Parness J, Horwitz S B. Taxol binds to polymerized tubulin in vitro[J]. J Cell Biol, 1981, 91: 479-487.
[9] Schiff P B, Horwitz S B. Taxol stabilizes microtubules in mouse fibroblast cells [J]. Proc Natl Acad Sci USA, 1980, 77: 1561-1565.
[10] Horwitz S B. Personal recollections on the early development of taxol [J]. J Nat Prod, 2004, 67: 136-138.
[11] Parness J, Horwitz S B. Taxol binds to polymerized tubulin in vitro[J]. J Cell Biol, 1981, 91: 479-487.
[12] 史清文.天然药物化学史话:紫杉醇[J].中草药.2011,42(10):1878-1884.