图1。作为一个累积溶出率的例子。浓度，C，是药物释放量的量每体积溶出介质；t代表时间。这种类型很容易地观察到在恒定体积溶解系统，如设备1或设备2，或装置4在闭环配置。
图2 An example of a plot of the observed concentration of the sample taken for an interval that is negligibly small in relation to the time of the overall dissolution process. This concentration is propostional to the instantaneous or fractional dissolution rate(dc/dt). This type of plot is readily observed in continuous-flow dissolution systems, such as Apparatus 4 in open loop configuration.。 2.6 溶出方法评估
溶出度试验方法是指由溶出装置，溶出介质，和测试条件，共同组成一个方法，这个方法能个反应产品的关键属性变化，同时能够运用于日常操作，并且能够进行实验室之间的转移。
理想的溶出方法不会有不可接受的变异性，并且能够将不会贡献一个不可接受的程度的变异，并且在溶出度值低于85%应有足够的取样点。一旦溶出度达到85%时小于15分钟，f2相似因子将不再适用。
有很多挑战方法灵敏度的方法。一种选择是比较公司的不同配方（是故意制造最相关的关键变量，例如，±10%~20%的变化）溶出曲线。同样，已被强调的样品可以用来证明对稳定性的变化的敏感性。这一概念可以用来建立的因素，是最显着的影响的溶出率。这些研究可以集中在对溶出参数（例如，介质浓度，搅拌速度，和脱气）或产品属性（例如，辅料比例，颗粒大小，压缩）。最终的目标是了解释放机制，并确定是溶出度方法是否可以显示药物产品的关键质量属性的变化。
3.分析整理
溶出步骤也是一个复杂的样品制备过程。用于测定溶出过程中药物溶出量的处理和分析过程，称为“分析整理”。虽然本章讨论的分光光度法和高效液相色谱法是最常用的分析方法，其他适宜的分析技术也可以使用。在第5节，将详细描述方法验证标准。 3.1 样品处理
溶出样品在取样后，需要进一步的处理，使能够满足样品释放量的分析方法的测定要求。例如，过滤可用于除去未溶解的颗粒物样品，或者避光、冷藏贮存样品。此外，样品可能需要稀释至方法线性范围内的测定浓度。使用高效液相色谱法时，尽可能采用流动相稀释至样品以减少溶出介质对样品测定的影响。根据产品特性的要求，其他类型的处理方式也是存在的。例如加入适当的试剂使产生干扰的物质消除或者失活。然而，分离可能是不可能的或需要的不是必需的，在一些情况下，在原位测量的方法，如纤维光学或电化学测定方法可能是有用的。 3.2 过滤
在上面1.1章节中已经讲述。 3.3 离心
离心处理样品是不优选的，具体原因有以下几个方面：在固体颗粒除去之前，药物溶解可以继续发生，是药物的溶出浓度增大，并且离心的动力也可能导致增加溶解的药物颗粒。然而当所有常见滤膜对药物均有吸附或者所有滤膜均干扰药物的测定时（例如，使用荧光定量），可以选择离心法处理样品。离心法可以证明是有用的，在方法开发的过滤材料的适用性评价。
3.4 分析方法
用于溶出度测定的常用分析方法一般为分光光度法或液相色谱法。分光光度法较高效液相法更简便快捷，并且分光光度法较HPLC法更容易自动化，并且溶剂量使用较少。但是分光光度法测定需要专属性良好。高效液相色谱法是首选的原因有很多，如提供较宽测定范围，减少了需要稀释样品的步骤，提高了低浓度样品的分析灵敏度，并且可用于辅料或者多组分互相干扰的样品的测定。目前的高效液相色谱系统采用自动进样器，提高了自动化。 3.5 光谱分析
直接分光光度法分析可以采用手动操作。另外也可以采用自动吸样系统或者流通进样池进行自动化分析操作。按照标准操作规程或者计量文件的要求进行仪器日常的仪器检查，清洁和维护，有助于确保仪器的准确运行。分光光度计的比色皿的长度一般为0.02cm~1cm，如果测定浓度较小的样品也可以使用长度较大的比色皿，较长比色皿中存在气泡可能引起仪器
错误。细胞排列和气泡可能是错误的来源。较短的比色皿可以使样品不用稀释直接进行测定，然而不管使用什么比色皿，样品溶液的线性范围以及标准误差必须进样验证。
检测波长选择必须基于样物溶液吸收光谱。在某些情况下，药物在溶出介质中降解（例如，含阿司匹林的制剂），一般会选取其降解物一致的吸收波长。对于辅料有干扰的情况，可以选用多波长进行分析：吸光度从赋形剂在分析的波长可以通过波长处吸光度最小的药物从吸收度比值确定。
在方法经过验证后，对照品溶液浓度一般只有一个浓度值，无论选取溶出量为100%或者溶出度限度（Q）值均是可以的，因为线性范围已经经过验证。但是在验证试验之前，无论溶出度分析曲线的测定，或者产品的优势分析，均需要使用多个对照品进行测定，已涵盖了预对照品溶液和样品溶液均应在溶出的线性浓度范围内采用相同波长进行测量。然而，少量的有机溶剂可用于制备的对照品溶液，以满足在验证过程中测定的准确度。
吸光系数α的计算公式如下（朗伯比尔定律）：
α=A/bc
A=吸光度
b=比色皿长度（cm） c=浓度（mg/ml）
用于溶出试验吸光度的单位通常为AU?毫升/毫克，其中AU是吸收度单位，.历史的资料可用来提供分析物可接受的吸收范围的（使用适当的路径长度单元）。这个值可能会在故障排除异常数据时非常有用。
纤维光学作为采样测定方法，通过适当的验证，是一种选择。 3.6 HPLC法
对于HPLC分析，由注射溶解介质对色谱图的影响需要列出。如果目标峰响的应解决不好，溶剂的较大干扰可能影响响应的准确度和精确。如果需要进样较大量（>100毫升）这更为重要。系统适用性试验可评估峰形、溶剂干扰、和主峰相邻峰的分离、和进样精密度。至少，该精密度是至关重要的。
理想情况下，标准溶液应用溶解介质进行稀释，要在该方法的线性范围内的浓度，例如，100％，或所选择的制剂剂量值稀释。然而，有机溶剂可以在制剂标准中使用，在验证过程中只要满足该精密度标准。在一些情况下，为了改善峰形，样品可以用流动相稀释，以改善峰形。在线性浓度范围内制备标准溶液和样品溶液应，并在同一波长处测定。
4.自动化
溶出度测定的自动化有很多方式和层级。溶出准备、开启、设置取样点和取样以及清洗均能实现自动化。完全自动化是指每个操作步骤均实现自动化，比如溶出介质的配制或者取样。本章节主要讨论可以实现自动化的步骤。自动化的水平取决于溶出仪是开环的还是闭环，同时也取决于分析仪器是脱机的还是联机的。联机分析是指测试样品能够输送到测定系统中并返还到溶出仪中，例如含有流通比色皿的分光光度计。脱机分析是指将样品去除溶出仪，然后进行后续的分析（最典型的为高效液相色谱法），分析过程中消耗掉样品。仪器配置的选择取决于样品的量以及分析所限制的时间。自动化操作需要报告药典规定的仪器仪器偏
差，如清洗或者更换介质遗留在管路中的残留，并且非药典标准化操作的步骤必须进行验证。指导原则（711）规定的标准程序的偏差，如使用采样探头或者光纤探头，必须按照标准程序进行验证。 4.1介质的配制
自动化配制溶出介质一般是通过稀释已经配制完的浓溶液完成。自动配置溶出介质程序一般是通过检测重量或者体积将介质输送到溶出杯中。浓缩液物理化学稳定性同使用过程中稀溶液的均一性一样是一个重要的问题，并且必须进行考察。缓冲溶液和含有表面活性剂的溶出介质可能会存在稳定性问题，例如化学降解或者pH值的改变。物理稳定性主要是沉淀、重结晶或者相分离，也应该防止发生。如果介质要求脱气，脱气水平应该符合规定。介质中氧气的含量可以通过上述章节2.1脱气程序的方法进行评估。 4.2 样品的取样时间
溶出杯中应有一个循环的取样管路。自动取样和回收大大方便手动取样，因为它减少了取样过程中所引起的变量。同时在早期取样点手动取样很难满足药典要求的取样时间相对标准偏差在±2%的要求。 4.3 取样和过滤
自动化是代替手动取样的一种实用的方法，尤其是对于多个取样点的试验。样品的取样和过滤使用弯管接头或者一系列步骤从溶出仪中直接到测定仪器中。样品溶液从溶出仪中取走后，可以不回收至溶出仪中（消耗取样）或者返回至溶出仪中（循环取样）。
目前有许多家品牌的自动溶出仪，有半自动的也有全自动的。仪器应当按照相应标准操作规程进行日常的性能检查、清洗和维护，以满足仪器正常运行。
在整个取样过程中取样针可以保持在或者不保持在溶出杯中。取样针或者光纤取样针可能会影响整体管路的流体学，因此需要进行充足的验证以保证不对药物的溶出速率造成重大的影响。如果使用的滤膜与手动操作的不同，同样需要对不同的滤膜分别经行考察。药典设备1和设备2的采样区的位置是中途从搅拌元件顶部到介质表面，根据介质的体积，取样针应从取样区进行取样。用于通过空心轴进行取样的仪器，应采用一种方法来调整入口孔的深度以使其符合要求。取样量取决于管路、比色皿和其他设备的死体积，必须进行相应的调整。
循环采样可以通管路在取样后将溶液排入溶出杯中或者在两个取样点中间将溶液排入溶出杯中。在后者的情况下，死体积和浓度效应的影响是重要的考虑因素。
在多个采样时间点的试验中，补液是需要考虑的。当取样量的总体积超过溶出介质总体积的1%时，影响是很大的。如果没有循环利用介质，那么应该计算结果，具体见2.5节数据处理。
当后续样品受残留或先前取样的条件的影响，可能会发生交叉污染；第一个样品或条件的影响传递到第二样品。在处理液体时，在样品溶液中的先前液体的残留物可能污染后续样品溶液。溶出介质包含表面活性剂或脂质可能会出现一些问题。根据清洗方案在多个时间点测试和在测试开始以及连续采样都可能发生残留。这个问题将在4.4节清洁讨论。
溶解的原料药和取样的相互作用和设备转移是重要考虑的，当溶解的原料药发生吸附时，它最经常涉及的是溶解装置或抽样滤波器和管道的表面上。溶解的原料药在荷电时的吸附可以是pH依赖性的。溶解的原料药到采样装置部件的吸附应当使用的已知浓度的典型样
品溶液（从制剂或原料和辅料混合组分中溶出的样品）进行评估。
通常使用等分的同一样品溶液通过和绕过取样装置（包括采样探头，过滤器，管道，阀门和泵）设计一个交叉验证试验。
有可能对任何种类的材料或设备结构（例如，玻璃或特定的聚合物）的有限选择不能给出建议。参见5.7自动化注意事项的详细信息。
除了在2.4.3取样部分的信息外,泵和管道的连接处可能是自动化系统污染的来源。通常用于溶出试验的分光分析程序的干扰，较少关注的。但是，被研究的制剂含有低剂量的金属盐，如做一些膳食补充剂必须对干扰进行评估。
液体转移通常是通过聚合物管进行。惰性材料如聚四氟乙烯（PTFE），因为它们的机械性能的影响有时也无法使用。其中，软管是必需的，例如在蠕动泵或用于在小半径环绕，聚丙烯（PP）或高密度聚乙烯（HDPE）也可以是优选的材料。取决于聚合物的类型和它的结晶度和密度、主要增塑剂，可能产生组分的浸出。溶出物可能与分析程序干扰。被过滤到样品溶液中的浓度通常取决于表面、温度、暴露时间，流体动力学条件和溶出介质的组成。 4.4清洗
除了2.4.4清洁部分的信息，自动系统有具体的清洁问题。例如，推荐在采样时间和内运行时间评估清洗和冲洗的有效性。在测试之间评估清洁过程也是很重要的。
4.5操作软件和计算的结果
根据21 CFR11（17）仪器操作的软件系统和数据评估必须进行验证。
4.6药典程序的常见偏差需要进行验证 从药典程序中的一些常见偏差包括：
?主轴开始旋转投入样品引起的偏差 ?停留时间和采样探头位置 ?循环与消耗采样
?在消费采样样品体积置换。
5.验证
本章节所涉及的验证是一些典型的验证，但不是包括所有的验证，这些验证参考药典的验证<1225>或者ICH分析方法的验证。本章节讨论的溶出试验的验证包括两个部分，即溶出过程的验证和数据分析的验证。溶出过程是指药物在溶出介质中的溶出和取样，数据分析的定义详见第3章节分析整理。数据分析的验证包括专属性、线性和范围、精密度、准确定/回收率、耐用性和对照品溶液和供试品溶液的稳定性。而溶出过程的验证主要是评估供试品溶液制备的精密度和耐用性。数据分析的验证一般使用对照品溶液或者空白辅料溶液或者按照<1225>准确度试验中适用标准加入法制备的溶液进行验证，详细见下面章节。而溶出过程的验证需要使用有良好特性的产品（例如：比如具有良好的含量均匀度和溶出均一性）。根据验证参数的关系，溶出过程的验证和分析数据的验证可以同时进行验证，例如均在溶出杯中进行。同时根据研究阶段或预期数据的要求不同，验证参数和验证程度也会有所不同。
本章节的验证标准只有作为指导，因此不同产品的验证标准也会有所不同。生产厂家应该在相关的标准操作规程（SOP）中对取自身的产品进行规定合适的接受标准，其他特殊剂