酸盐缓冲液 100% 38.44 39.17 54.73 55.58 56.07 130% 71.34 71.29 71.66 0.469 0.479 0.645 0.674 0.694 0.849 0.846 0.844 39.85 40.69 54.61 57.04 58.72 71.71 71.46 71.29 94.90 96.54 93.99 94.18 94.32 92.47 92.13 94.62 总结:胶囊回收率在pH1.0盐酸和pH4.0缓冲盐中回收率结果不理想,重复实验结果同样,原因有待查明。
同时溶出曲线对比研究实验正在进行中。
四、用CPC法测定方法学
测定方法:
滴定液:取2.0g的一水合十六烷基氯化吡啶,精密称定,置1000ml量瓶,用水溶解并稀释至刻度,用前超声波脱气。
供试品溶液:取硫酸软骨素钠片样品研细,称取适量,用溶出介质溶解并稀释制成浓度约为0.22mg/ml的溶液,同法制备两份。
对照品溶液同法制备。 C.测定
? 精密量取两份对照品溶液分别置两只锥形瓶,每份40ml。 ? 精密量取每份供试品溶液40ml,分别置两只锥形瓶中。
? 在磁力搅拌下,用滴定液分别滴定,溶液逐渐变浑浊,当溶液变澄清并
有类白色的沉淀悬浮在溶液中时为终点。
D. 计算公式
P?V1?W0?Z×100%
V0?W1?(100%?h)式中P:硫酸软骨素含量,%;
V0:对照品溶液消耗滴定液的体积,ml; V1:供试品溶液消耗滴定液的体积,ml; W0:对照品的重量,g; W1:供试品的重量,g;
h:供试品的干燥失重,%;
Z:对照品的含量。
表6用CPC法测定硫酸软骨素片的回收率 70% V1 7.45 7.49 7.45 10.46 水 100% 10.48 10.49 13.61 130% 13.6 13.67 5.75 70% 5.7 5.7 pH1.0盐酸 7.97 100% 8.03 8.09 10.3 130% 10.32 10.3 7.02 70% pH4.0醋酸盐缓冲液 7.1 7.01 10.1 100% 10.05 10 13.05 130% 12.97 12.99 7.2 70% pH6.8磷酸盐缓冲液 7.18 7.11 10.17 100% 10.3 10.17 13.24 130% 13.29 13.15 V0 10.48 10.48 10.48 10.48 10.48 10.48 10.48 10.48 10.48 8.065 8.065 8.065 8.065 8.065 8.065 8.065 8.065 8.065 9.895 9.895 9.895 9.895 9.895 9.895 9.895 9.895 9.895 10.3 10.3 10.3 10.3 10.3 10.3 10.3 10.3 10.3 W0 44.36 44.36 44.36 44.36 44.36 44.36 44.36 44.36 44.36 44.38 44.38 44.38 44.38 44.38 44.38 44.38 44.38 44.38 44.07 44.07 44.07 44.07 44.07 44.07 44.07 44.07 44.07 44.35 44.35 44.35 44.35 44.35 44.35 44.35 44.35 44.35 W1 30.55 31.07 30.48 43.65 43.8 44.35 57.32 57.33 57.84 30.55 30.84 30.87 44.25 44.28 44.4 57.38 57.57 57.17 30.76 30.78 30.84 44.17 44.49 43.99 57.6 57.68 57.24 30.71 30.69 30.61 44.27 44.16 43.92 57.54 57.49 57.72 回收率 103.22 102.04 103.46 101.43 101.28 100.12 100.50 100.41 100.04 103.57 101.71 101.61 99.11 99.79 100.26 98.78 98.64 99.14 101.64 102.73 101.24 101.84 100.61 101.24 100.91 100.15 101.07 100.95 100.74 100.01 98.92 100.43 99.70 99.08 99.54 98.10 99.72 0.929 101.27 0.739 100.29 1.671 101.39 1.27 平均 RSD 结论:本法测定回收率在70%~130%范围内回收率符合规定,相当于硫酸
软骨素质量范围约为12mg~23mg。
但实际溶出度测定时,0.4g规格硫酸软骨素片在900ml溶出介质中全部溶解时浓度约为0.4mg/ml,假设每次取溶出液10ml检测,检测质量约为4mg;而我公司将检测浓度逐步稀释,在检测质量为8mg时,滴定观察不到终点,只见混浊,不见明显混悬物;在检测质量为3.2mg时,已经观察不到终点。
因此此法适合用于含量测定用,不适合溶出度检测。