土壤学实验指导
W
式中：V0—5.00毫升标准重铬酸钾溶液空白试验滴定的硫酸亚铁毫升数。 V1一待测液滴定用去的硫酸亚铁毫升数。
w一吸取滤液相当的土样重(克)。 5——— 空白所用K2Cr2O7毫升数 0.8000——— 1/6 K2Cr207标准溶液的浓度；
0.003—— 碳毫摩尔质量0.012被反应中电子得失数4除得0.003； 2、胡敏酸碳(％)：按上式计算。
3、富里酸碳(％)＝腐殖质总碳(％)一胡敏酸碳(％) 4、HA／FA＝胡敏酸碳(％)／富里酸碳(％)
(四)药品配制
1、0.1M焦磷酸钠和0.1M氢氧化钠混合液：称取分析纯焦磷酸钠44.6克和氢氧化钠4克，加水溶解，稀释至1升，溶液pH13，使用时新配。
-1
2、3molLH2S04：在300毫升水中，加浓硫酸167.5毫升，再稀释至1升。
-1 -1
3、0.01molLH2S04：取3molLH2S04液5毫升，再稀释至1.5升。
-1
4、0.02 molL NaOH：称取O.8克NaOH，加水溶解并稀释至1升。
(五)注意事项
1、在中和调节溶液pH时，只能用稀酸，并不断用玻棒搅拌溶液，然后用玻棒蘸少许溶液放在pH试纸上,看其颜色，从而达到严格控制pH。 2、蒸干前必须将pH调至7，否则会引起碳损失。 三、思考题
1、土样消煮时为什么必须严格控制温度和时间？
2、有机质由有机碳换算，为什么腐殖质用碳表示，而不换算？
3、测定腐殖质总量和胡敏酸时，都是蒸干后用K2Cr207氧化消煮进行测定，可否不蒸干测定？怎样测?
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实验七 土壤速效养分的测定
土壤中能被植物直接吸收，或在短期内能转化为植物吸收的养分，叫速效养分。养分总量中速效养分虽然只占很少部分，但它是反映土壤养分供应能力的重要指标。因此测定土壤中速效养分，可作为科学种田，经济合理施肥的参考。
土壤中能被植物直接吸收，或在短期内能转化为植物吸收的养分，叫速效养分。养分总量中速效养分虽然只占很少部分，但它是反映土壤养分供应能力的重要指标。因此测定土壤中速效养分，可作为科学种田，经济合理施肥的参考。
一、土壤水解性氮的测定
(一)方法原理
土壤水解性氮或称碱解氮包括无机态氮(铵态氮、硝态氮)及易水解的有机态氮(氨基酸、酰铵和易水解蛋白质)。用碱液处理土壤时，易水解的有机氮及铵态氮转化为氨，硝态氮则先经硫酸亚铁转化为铵。以硼酸吸收氨，再用标准酸滴定，计算水解性氮含量。
(二)操作步骤
称取通过1毫米筛的风干土样2克(精确到0.01克)和硫酸亚铁粉剂0.2克均匀铺在扩散皿外室，水平地轻轻旋转扩散皿，使土样铺平。在扩散皿的内室中，加入2毫升2％含指示剂的硼酸溶液，然后在皿的外室边缘涂上碱性甘油，盖上毛玻璃，并旋转之，使毛玻璃与扩散皿边缘完全粘合，再慢慢转开毛玻璃的一边，使扩散皿露出一
-1
条狭缝，迅速加入10毫升1.07molLNaOH液于扩散皿的外室中，立即将毛玻璃旋转盖严，在实验台上水平地轻轻旋转扩散皿，使溶液与土壤充分混匀，并用橡皮筋固定；
-1
随后小心放入40℃的恒温箱中。24小时后取出，用微量滴定管以0.005molL的H2SO4标准液滴定扩散皿内室硼酸液吸收的氨量，其终点为紫红色。
另取一扩散皿，做空白试验，不加土壤，其他步骤与有土壤的相同。 (三)结果计算
C×(V-V0) ×14
-1
土壤中水解氮(mgkg)＝——-----------------——— ×1000 W C—— H2S04标准液的浓度 V—— 样品测定时用去H2S04标准液的体积 V0——空白测定时用去H2S04标准液的体积 14—— 氮的摩尔质量 1000——换算系数 W—— 土壤重量(克)
(四)注意事项
在测定过程中碱的种类和浓度、土液比例、水解的温度和时间等因素对测得值的高低，都有一定的影响。为了要得到可靠的、能相互比较的结果，必须严格按照所规
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定的条件进行测定。
(五)主要仪器及试剂配制
1、仪器：扩散皿、半微量滴定管(5毫升)和恒温箱。 2、试剂：
-1
(1)1.07molLNa0H：称取42.8克NaOH溶于水中，冷却后稀释至1升。
(2)2％H3BO3指示剂溶液：称取H3BO3 20克加水900毫升，稍稍加热溶解，冷却后，加入混合指示剂20毫升(0.099克溴甲酚绿和0.066克甲基红溶于100毫升乙醇中)。
-1
然后以0.1m0lLNaOH调节溶液至红紫色(pH约为5)最后加水稀释至1000毫升，混合均匀贮于瓶中。
-1
(3)0.005molLH2SO4标准液：取浓H2S04 1.42毫升，加蒸馏水5000毫升，然后用标准碱或硼砂(Na2B407·10H2O)标定之。
(4)碱性甘油：加40克阿拉伯胶和50毫升水于烧杯中，温热至70—— 80℃搅拌促溶，冷却约1小时，加入20毫升甘油和30毫升饱和K2CO3水溶液，搅匀放冷，离心除去泡沫及不溶物，将清液贮于玻璃瓶中备用。
（5）硫酸亚铁粉：FeSO4.7H2O(三级)磨细，装入玻璃瓶中，存于阴凉处。 (六)参考指标
-1
土壤水解性氮(mgkg)等级 ＜25 极低 25——30 低 50——100 中等 100——150 高
(七)思考题
土壤水解性氮包括了哪些形态的氮，用扩散吸收法测定时应注意哪些问题。
二、土壤中速效磷的测定
了解土壤中速效磷的供应状况，对于施肥有着直接的指导意义。土壤中速效磷的测定方法很多，由于提取剂的不同所得结果也不一样。一般情况下，石灰性土壤和中性土壤采用碳酸氢钠提取，酸性土壤采用酸性氟化铵提取。
（一）碳酸氢钠法
1、方法原理
中性、石灰性土壤中的速效磷，多以磷酸一钙和磷酸二钙状态存在，用0.5M碳酸氢钠液可将其提取到溶液中，然后将待测液用钼锑抗混合显色剂在常温下进行还原使黄色的锑磷钼杂多酸还原成为磷钼兰进行比色。
2、操作步骤
称取通过1毫米筛孔的风干土2.5克（精确到0.01克）于250毫升三角瓶中，加50毫升0.5M NaHCO3液，再加一角匙无磷活性炭，塞紧瓶塞，在20—— 25℃下振荡30分钟，取出用干燥漏斗和无磷滤纸过滤于三角瓶中，同时做试剂的空白试验。吸取滤液10毫升于50毫升量瓶中，用钼锑抗试剂5毫升显色，并用蒸馏水定容，摇匀，在室温高于15℃的条件下放置30分钟，用红色滤光片或660nm波长的光进行比色，以
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土壤学实验指导
空白溶液的透光率为100（即光密度为0），读出测定液的光密度，在标准曲线上查出
-1
显色液的磷浓度（mgkg）。 标准曲线制备：
-1
吸取含磷（P）5mgkg的标准溶液0、1、2、3、4、5、6毫升，分别加入50毫升容量瓶中，加0.5M NaHCO3液10毫升，加水至约30毫升，再加入钼锑抗显色剂5毫
-1
升，摇匀，定容即得0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mgkg磷标准系列溶液，与
-1
待测溶液同时比色，读取吸收值，在方格座标纸上以吸收值为纵座标，磷mgkg数为横座标，绘制成标准曲线。
1、 结果计算
-1
显色液磷mgkg数×显色液体积×分取倍数
-1
土壤中速效磷mgkg＝—————————————————――――――――————————— 烘干土重（克）
-1-1
显色液磷mgkg数：从工作曲线查得显色液的磷mgkg数 显色液体积：50毫升
浸提液总体积(50毫升) 分取倍数＝————--------————————— 吸取浸出液毫升数 4、主要仪器及试剂配制
仪器：往复式振荡机，分光光度计或光电比色计 试剂：
(1)0.5M NaHCO3浸提剂(pH＝8.5)
称取42.0克NaHCO3溶于800毫升水中，稀释至990毫升，用4M NaOH液调节pH至8.5，然后稀释至1升，保存于瓶中，如超过一个月，使用前应重新校正pH值。
(2)无磷活性炭粉
将活性炭粉用1:1 HCl浸泡过夜，然后用平板漏斗抽气过滤，用水洗净，直至无HCl为止，再加0.5M NaHCO3液浸泡过夜，在平板漏斗上抽气过滤，用水洗净NaHCO3，最后检查至无磷为止，烘干备用。 (3)钼锑抗试剂
称取酒石酸锑钾(KSbOC4H4O6)0.5克，溶于100毫升水中，制成5％的溶液。
另称取钼酸铵20克溶于450毫升水中徐徐加入208.3毫升浓硫酸，边加边搅动，再将0.5％的酒石酸锑钾溶液100毫升加入到钼酸铵液中，最后加至1升，充分摇匀，贮于棕色瓶中，此为钼锑混合液。
临用前(当天)称取1.5克左旋抗坏血酸溶液于100毫升钼锑混合液中，混匀。此即钼锑抗试剂。(有效期24小时，如贮于冰箱中，则有效期较长。) (4)磷标准溶液
称取0.439克KH2PO4(105℃烘2小时)溶于200毫升水中，加入5毫升浓H2SO4，
-1
转入1升量瓶中，用水定容，此为100 mgkg磷标准液，可较长时间保存。取此溶液
-1
稀释20倍即为5 mgkg磷标准液，此液不宜久存。
(二)O.03mo1L-1NH4F—O.025molL-1HCl浸提——钼锑抗比色法
1、 方法原理
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土壤学实验指导
酸性土壤中的磷主要是以Fe—P，A1一P的形态存在，利用氟离子在酸性溶液中
3+3+
络合Fe和Al的能力，可使这类土壤中比较活性的磷酸铁铝盐被陆续活化释放，同
+
时由于H的作用，也能溶解出部分活性较大的Ca—P，然后用钼锑抗比色法进行测定。 2、操作步骤
称取通过1毫米筛孔的风干土样品5克(精确到0.01克)于150毫升塑料杯中，加
-1-1
入0.03molLNH4F—— 0.025 molLHCl浸提剂50毫升，在20—30℃条件下振荡30分钟，取出后立即用干燥漏斗和无磷滤纸过滤于塑料杯中，同时作试剂空白试验。 吸取滤液10—20毫升于50毫升容量瓶中，加入10毫升0.8M H3BO3，再加入二硝基酚指示剂2滴，用稀HCl和Na0H液调节pH至待测液呈微黄，用钼锑抗比色法测定磷，下述步骤与前法相同。 3、结果计算
与碳酸氢钠法相同。 4、仪器、试剂配制
仪器：塑料杯，其余与前法同。
-1-1
试剂： 0.03molLNH4F—0.025 molLHCl浸提剂，称取1.11克NH4F溶于800毫
-1
升水中，加1.0molLHCl25毫升，然后稀释至1升，贮于塑料瓶中，其它试剂同前法。
2，6-二硝基酚或2，4-二硝基酚指示剂溶液。溶解二硝基酚0.25g于100mL水中。此指示剂的变色点约为pH3，酸性时无色，碱性时呈黄色。
(三)参考指标
1、0.5M NaHCO3法
-1
土速效磷 mgkg等级 <5 低 5—10 中 ＞10 高
-1
2、0.033molLNH4F——0.025NHCl
-1
土壤速效磷 mgkg等级 ＜3 很低 3—7 低 7—20 中等 >20 高
(四)思考题
①土壤速效磷的测定中，浸提剂的选择主要根据是什么？ ②测定土壤速效磷时，哪些因素影响分折结果？
三、土壤中速效性钾的测定（火焰光度法）
（一）方法原理
以醋酸铵为提取剂，铵离子将土壤胶体吸附的钾离子交换出来。提取液用火焰光度计直接测定。
（二）操作步骤
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