实验一 微生物形态观察
一、实验目的
1、巩固显微镜的使用方法，重点学习掌握油镜的使用方法。
2、观察并区别常见的细菌、放线菌和真菌菌落的基本形态特征和特殊结构。 3、学习微生物画图法，体会并展现微生物形态的美学价值。
二、实验原理（略） 三、实验器材
1、普通光学显微镜、镜油、镜头纸、擦镜液。
2、细菌装片：金黄色葡萄球菌、苏云金芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、破伤风梭菌、固氮菌、螺菌。
3、霉菌装片：黑根霉、曲霉、青霉、毛霉。 4、酵母菌装片：出芽酵母。 5、放线菌装片。
6、微生物单菌落划线平板：大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、泾阳链霉菌、青霉、酵母菌。
四、实验步骤
1、显微镜的基本调节
用10×物镜对焦，安放标本，调节光亮度、焦距、瞳距和视度，找到要观察的区域；换40×物镜，用细准焦螺旋调焦。 2、霉菌的特征结构观察
用400×观察黑根酶、曲霉、毛霉装片、青霉装片，用1000×观察接合孢子装片。 3、放线菌的特征结构观察 用1000×观察放线菌装片。 4、细菌基本形态观察
（1） 显微镜下观察金黄色葡萄球菌装片，注意菌体间关系。 （2） 显微镜下观察枯草芽孢杆菌、大肠杆菌装片。 （3） 显微镜下观察螺菌装片，注意菌体螺旋。 5、细菌特殊结构观察
（1） 油镜下观察固氮菌装片，注意细菌荚膜。
（2） 油镜下观察螺菌装片，注意鞭毛的染色，位置，数目，形态和大小； （3） 用油镜观察苏云芽孢杆菌，巨大芽孢杆菌，枯草芽孢杆菌等，注意芽孢。 6、酵母菌的形态观察
观察出芽酵母形状和出芽方式、树枝状分支的假丝酵母的形状和大小。 7、微生物菌落观察
观察大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、泾阳链霉菌、青霉、酵母菌的菌落平板，
并描述菌落的形状、颜色（正、反面）、含水状态、透明度和边缘情况。
五、实验结果与讨论
1、拍摄五张具有代表性的微生物的照片，见图14-1至图14-5。 注：显微镜号为14。
图14-1 青霉（分生孢子、分生孢子梗），10×40放大
图14-2 放线菌（菌丝），10×100放大
图14-3 曲霉（菌丝、孢子），10×40放大
图14-4 毛霉，10×40放大
图14-5 螺菌（菌体的螺旋），10×100放大
2、用圆圈代表显微镜视野，画五个具有代表性的微生物的图片，下图为扫描后结果。
绘图扫描结果图
3、描述所观察的微生物菌落特征，见表1。
表1 描述所观察的微生物菌落特征
菌落名称 含水状态 菌落形状 透明度 颜色 边缘情况 整齐 酵母菌 含水较少 圆形 不透明 正面：白色 反面：白色 正面：白色 反面：白色 正面：白色 反面：黄色 正面：白色 反面：白色 正面：金黄色 反面：金黄色 正面：青白色 反面：白色 枯草杆菌 含水较多 不规则 不半透明 锯齿状 泾阳链霉菌 含水较少 圆形 不透明 整齐 大肠杆菌 含水较多 圆形 半透明 整齐 金黄葡萄球菌 含水较多 圆形 不透明 整齐 青霉 含水较少 圆形 不透明 细毛状
4、思考题
（1）细菌、放线菌、真菌、酵母菌在细胞大小、细胞结构上有何区别？
答：在细胞大小上，真菌和酵母菌的细胞相较于细菌和放线菌的细胞要大一些。粗率地说，前两种一般比后两种大几倍至几十倍。细菌和放线菌的细胞一般在1μm左右，而真菌和酵母菌则多为10~100μm。 在细胞结构上，细菌和放线菌是原核生物，没有成形的细胞核以及各种复杂的由膜包被的细胞器。而真菌、酵母菌是真核生物，具有核膜包被的成形细胞核以及内质网、线粒体等复杂的细胞器。
（2）如何从菌落的差异来区分细菌、放线菌、真菌、酵母菌？
答: 细菌的菌落一般湿润、光滑、较透明、质地均匀、菌落正反面颜色一致。放线菌的菌落形态多干燥致密，菌落边缘的琼脂平面常有变形，而且菌落正反面经常颜色不一致。霉菌菌落的质地一般比放线菌疏松，外观干燥，不透明，呈现或紧或松的蛛网状、绒毛状或棉絮状，菌落正反面的颜色和边缘与中心的颜色常不一致。酵母菌菌落大而突起，较湿润，稍透明，一般呈乳白色,少数红或黑色，且正反面颜色无差别，且多带酒香味。
六、实验小结
这堂课学习了油镜的使用方法，观察到了奇妙的微生物的微观世界，对微生物的形态特征有了更加感性的认识。在使用油镜的过程中遇到了视野不干净的情况，我一直认为是油镜不干净，但是擦了好多遍都没有改善，后来经陈老师提醒才意识到是目镜不干净。今后实验遇到问题要注意从多方面思考原因，冷静地分析问题而不是一味地埋头苦做。最后感谢陈老师、麻老师和各位助教的耐心细心的讲解和指导。
七、参考文献
陈金春、陈国强主编，《微生物学实验指导》，清华大学出版社，2005年8月