《组织学制片技术与电镜》
习题
第一部分组织学技术和免疫组织
化学技术
一、选择题
（一）A1型题(标准型)
1.免疫组化技术的关键步骤是 A.标本处理
B.抗体的处理与保存 C.免疫染色
D.设立对照试验 E.结果判断
2.免疫组化技术的首要试剂是 A.抗原 B.抗体 C.标记物 D.固定剂 E.洗涤液
3.酶免疫组化技术中，关于标本处理的说法正确的是
A.充分洗后于室温用0.3%H2O2和80%甲醇处理20～30min。
B.充分洗后于室温用0.3%H2O2和80%甲醇处理40～50min。
C.充分洗后于室温用0.5%H2O2和90%甲醇处理20～30min。
D.充分洗后于4℃用0.3%H2O2和80%甲醇处理20～30min。
E.充分洗后于4℃用0.3%H2O2和80%甲醇处理40～50min。
4.PAP法是Sterberger等于哪一年建立的 A.1950 B.1960 C.1970 D.1980 E.1990
5.PAP复合物中的酶是 A.辣根过氧化物酶 B.碱性磷酸酶 C.葡萄糖氧化酶
D.胃蛋白酶 E.胶原酶
8.PAP法中的“桥”是 A.第一抗体 B. 第二抗体 C. 第三抗体 D.亲和素 E.第四抗体
9.ABC技术由美籍华人Hsu于哪一年建立，已广泛应用于免疫学检测技术 A.1961 B.1975 C.1981 D.1985 E.1990
10.ABC法中的“桥”是指 A.第一抗体 B. 第二抗体 C. 第三抗体 D.亲和素
E.链霉素亲和素
14.免疫组化法吸收试验是用过量已知抗原与抗体在多少度以下充分反应，离心后再行免疫组化染色 A.4℃ B.20℃ C.40℃ D.37℃ E.50℃
23．PAS反应是检测组织内的： A.核酸 B.脂 C.蛋白质 D.多糖 E.抗原
一、填空
1、免疫组织化学中最常用的标记物是__________、____________ 、___________、____________。原位杂交组织化学中常用的标记物有___________和___________两大类。
2、 常用的粘附剂有__________、
____________ 、__________等。
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3、抗原决定簇是指_____________分子表面的、具有活性的___________。
4、一般组织化学是利用化学或物理反应，在组织标本上加入一定的_____________，使其发生反应，形成_____________，能在显微镜下观察。常用于检测__________、____________ 、__________等。
5、酶组织化学是利用酶对其____________的催化作用 ，生成__________，再与某种__________反应，形成____________沉淀，检测___________分布及活性的方法。常用的方法有___________ 、___________、____________、__________和____________。
6、最常用于显示细胞、组织内的多糖和蛋白多糖的方法是___________。
7.、免疫染色对特殊标本的进一步处理常用 ________和________法。
8、免疫组化中最常用的制片方法是________和________。
9、免疫组化染色后，阳性细胞的染色分布有三种类型，分别是_________、_________和_______。
10、酶免疫组化技术中最常用的酶有_________、__________及_________。 11、免疫电镜标本的制备主要有_________、__________和_________三种。 12、组织块包埋前需先经______，常用的包埋剂是______、______和______。
13、光学显微镜下观察的固定标本除组织切片外，还有______、______和______。 14、免疫细胞化学术中常用的标记物有______、______、______和______。 二、名词解释
1.HE染色法 2、固定 2.银染法
3.冷冻切片
4.组织化学和细胞化学术 5.免疫细胞化学术 6.原位杂交 7.胶体金
8.简述石蜡切片的制备过程。 9、背景着色 10、一抗和二抗 11、探针
12、免疫组织化学技术 三、简答题
1.免疫组织化学的全过程包括哪些步骤？ 2.免疫组化标本固定时，好的固定剂应满足哪些要求？
3.简述荧光免疫组化技术直接法的原理。 4.何谓免疫电镜技术？ 四、论述题
1.试述酶免疫组化技术的原理及其应用。 2. 试述任意3种酶组织化学技术的反应原理。
3. 试述免疫荧光双标记技术（间接法）的原
理和当两种一抗及两种二抗分别混合使用时应注意的问题。
4. 试述免疫组织化学ABC技术中，组织抗原、一抗、二抗和ABC如何依次相互结合的。
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13、下面对扫描电镜的描述错误的是（ ） A 利用泛光式电子束和二次电子成像 B 用于观察组织细胞表面形貌
构 C 样品室大，可用于观察块状样品
一、多选题（A型题） D 景深长，立体感强 1、 人眼的平均分辨率为（ ） E 样品可被升降和倾斜 A 0.4mm B 0.2mm C 0.3mm 14、电子枪由（ ）组成 第二部分电镜技术与细胞超微结
D O.2μm E 0.4μm 3、 用来显示组织和细胞的内部超微结构像的电子为（ ） A 入射电子 B 透射电子 C 弹性散射电子 D 二次电子 E 吸收电子 5、 下面对扫描式电子束描述不正确的是（ ） A 电子书不固定 B 样品被电子束逐点照射 C 样品被逐点成像 D 扫描电镜成像电子束 E 样品被同时成像 6、 下面哪项对不属于透射电镜样品制备技术（ ） A 低电压观察法 B 负染技术 C 电镜细胞化学技术 D 超薄切片技术 E 体视学技术 7、下面哪项对不属于扫描电镜样品制备技术（ ） A 表面干燥法 B 血管铸型法 C 冷冻复型 D 冷冻割断法 E 组织导电法 9、下面哪种电镜可以在观察结构的同时，对组织细胞内的元素成分进行分析（ ） A 透射电镜 B 扫描电镜 C 分析电镜 D 超高压透射电镜 E 原子力显微镜 10、观察组织细胞内部超微结构应选用哪种电镜（ ） A 原子力显微镜 B 透射电镜 C 扫描电镜 D 磁力显微镜 E 侧向力显微镜 11、下面哪项不是超高压电子显微镜的优点（ ） A 可用于观察厚切片 B 可以提高分辨率 C 可提高图像质量 D 结构复杂 E 减少辐射损伤范围 A 阴极、阳极 B 阴极、栅极 C 阳极、栅极 D 阴极、阳极、栅极 E 正极、负极、栅极 17、作为CO2临界点干燥法中置换中间液的为（ ） A 乙醇 B 丙酮 C 醋酸异戊酯 D 环氧丙烷 E 乙二醇 18、固定液中戊二醛的浓度为（ ） A 4% B 0.5% C 20% D 10% E 4% 19、CO2的临界温度和临界压力为（ ） A 374℃ 218.5P B 31.5℃ 72.8P C 28.9℃ 38.2P D 215℃ 110.7P E 98.6℃ 67.9P 20、CO2临界点干燥法的步骤为（ ） A 高压室预冷—置换—减压—减压放气—减压放气降温 B 高压室预冷—减压—置换—减压放气—减压放气降温 C 高压室预冷—置换—减压—减压放气降温—减压放气 D 高压室预冷—减压—置换—减压放气降温—减压放气 E 高压室预冷—置换—减压放气—减压—减压放气降温 21、下面对透射电镜描述不正确的是（ ） A 利用泛光式电子束和透射电子成像 B 观察细胞内部超微结构 C 发展最早 D 性能最完善 E 景深长、立体感强 22、透射电镜的反差取决于样品对（ ）的散射能力 A 二次电子 B 入射电子
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C 样品质量厚度 三、问答题： D 样品重量 E 样品性质 1、 比较扫描探针显微镜与扫描电子显微23、观察生物样品时，透射电镜的加速电压镜异同点。 一般为（ ） 3、 简述扫描电镜的特点。
A 80KV B 90KV C 100KV 7、 扫描电镜的生物样品制备原则是什么? D 110KV E 120KV 8、 扫描电镜的样品制备过程及其主要试24、超薄切片是指厚度小于（ ）的切片 剂？
A 200nm B 300nm C 400nm 12、 什么是超薄切片技术？指出其主要程D 100nm E 500nm 25、超薄切片技术的步骤为（ ） A 取材、固定、脱水、包埋、切片、染色 B 取材、固定、脱水、浸透、包埋、切片、染色 C 取材、脱水、固定、包埋、切片、染色 D 取材、固定、脱水、浸透、包埋、切片 E 取材、脱水、固定、包埋、切片 26、免疫电镜时应该选用（ ）作为固定剂 A 锇酸 B 戊二醛 C 戊二醛-锇酸 D 多聚甲醛 E 福尔马林 27、酸性磷酸酶是（ ）的标志酶 A 细胞膜 B 内质网 C 溶酶体 D 线粒体 E 微体 28、微体的标志酶为（ ） A 酸性磷酸酶 B 碱性磷酸酶 C ATPE D 过氧化氢酶 E 5-核苷酸酶 二、名词解释： 1、 生物电镜技术 2、 分辨率 5、 透射电子 7、 二次电子 12、 透射电子显微镜 13、 扫描电子显微镜 15、 电子枪 17、 临界点（临界状态） 18、 临界点干燥法 19、 CO2临界点干燥法 20、 真空镀膜法 23、 超薄切片技术 24、 电子染色 25、 负染技术 26、 取材
序及各程序的主要试剂有哪些？ 13、 电镜生物样品制备过程中取材的注意事项有哪些？ 14、 透射电镜的超薄切片技术与扫描电镜的样品制备过程有哪些相同点和不同点？ 19、 超薄切片技术中固定的目的是什麽？ 20、 固定的方法有几种？分别是什麽？ 21、 理想的固定剂应具备哪些条件？ 22、 戊二醛作为固定剂的优缺点？ 23、 俄酸作为固定剂的优缺点？ 28、 电子染色的目的是什麽？常用试剂有
哪些？ 29、 简述负染技术？ 42、 电镜免疫细胞化学中样品制备特点有哪些？ 43、 电镜免疫细胞化学中固定时应注意哪些问题？ 46、 免疫细胞化学技术中对照实验的目的是什么？ 47、 免疫细胞化学技术中对照实验有哪些种类？ 48、什么在免疫细胞化学技术中要设立对照实验？ 92、 如果采用透射电镜免疫细胞化学方法观察大鼠大脑皮质神经元胞质内的某一抗原 是否存在，请问实验过程中的步骤及注意事项有哪些 93、 如果让你进行体内心肌细胞结构和功能改变的电镜观察时，你将怎样设计实验？ 94、 请根据你所学的生物电镜技术，进行缺血大鼠模型脑组织形态学方面观察的实验设 计，并指出实验中的注意事项。 4