胰酶配方
10×D-Hank’s液 100mL 单蒸水 900mL 0.5M/L EDTA 10ML 胰酶(粉末) 4g 用1 M NaOH 调节pH 至7.2-7.4
PH调完后用0.22 um的滤器过滤除菌(注:10×D-Hank’s液 先稀释成1×,调PH 7.2,再加入胰酶粉末,最后再调pH)
1×Hank’s液 配方 NaCl 8g KCl 0.4g CaCl2 0.14g MgSO4·7H2O 0.2g Na2HPO4·H2O 0.06g KH2PO4 0.06g NaHCO3 0.35g Glucose 1.00g 酚红 0.02g
加水至1L,用NaHCO3调pH 7.2-7.4(0.22 um 滤膜过滤除菌)
20×D-Hank’s液 配方 NaCl 160g KCl 18g Na2HPO4·12H2O 3.04g KH2PO4 1.2g Glucose 20g 1%酚红 40mL
加水至1L,10pM,10min;7.5% Na2CO3调pH 7.2-7.4
RPMI1640 配方
RPMI1640粉末 10.4g HEPES 4.67g
L-G 2 m mol/L,0.292g 2-ME(2-巯基乙醇) 1×10-5 mol/L
丙酮酸钠 1 m mol/L(0.11g/L) PNC(青霉素) 100IU SM(链霉素) 100IU DH2O 约800mL
磁力搅拌3-4小时,充分溶解;用NaHCO3约2g,调pH至7.2-7.4 DH2O加至1000 mL混匀,0.22 um滤器过滤除菌,分装,-20度保存
附:0.01mol/L 2-ME配制:取7 mL 2-ME加入93mL双蒸水(1mol/L),再取1mol/L 2-ME0.5mL加ddH2O至50mL,即成(即:万分之七)。即70uL至100mL,临时用每1L 1640取1mL。
DMEM 配方
DMEM粉末 10.4g HEPES 4.67g
L-G 2 m mol/L,0.292g 2-ME(2-巯基乙醇) 1×10-5 mol/L
丙酮酸钠 1 m mol/L(0.11g/L) PNC(青霉素) 100IU SM(链霉素) 100IU DH2O 约800mL
磁力搅拌3-4小时,充分溶解;用NaHCO3约2g,调pH至7.2-7.4 DH2O加至1000 mL混匀,0.22 um滤器过滤除菌,分装,-20度保存