Ｃ Dam 甲基化酶能使所有 5'-GATC-3' 序列中的腺嘌呤 N 6 甲基化，但不同的限制性内切酶对这种甲基化作用的敏感性不同
Ｄ Dam 甲基化酶的作用位点在 5'-GATC-3' 序列内部，但该酶与 DNA 靶序列的结合还依赖于 5'-GATC-3' 序列左右两端的其它碱基组成
Ｅ Dam 甲基化酶既能使 5'-GATC-3' 序列中的腺嘌呤 N 6 单甲基化，也能使其双甲基化，只有后者才能抵御相应限制性内切酶的切割作用
017 T 4 -DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段 DNA 片段连接在一起，其底物的关键基团是 【 】 Ａ 2' -OH 和 5' -P Ｂ 2' -OH 和 3' -P Ｃ 3' -OH 和 2' -P Ｄ 3' -OH 和 5' -P Ｅ 5' -OH 和 3' -P
018 下列 DNA 片段中，通过加热并用 S1 核酸酶处理即可使 DNA 断裂的是 【 】 Ａ CCGATCAAGCTGTTCCCGGAGGTGCCCGCCCTAAGGAGACTCGGT GGCTAGTTCGACAAGGGCCTCCACGGGCGGGATTCCTCTGAGCCA Ｂ AAGGTCGGCGGGTTCCCACCCGTGAGCATCGGGCCTTGCCGTTAT TTCCAGCCGCCCAAGGGTGGGCACTCGTAGCCCGGAACGGCAATA Ｃ TATGATCATCCGCCGGGTGTCACTGATCCATGGCCCAAGGGTTTC ATACTAGTAGGCGGCCCACAGTGACTAGGTACCGGGTTCCCAAAG Ｄ GAGGATCCCTTTGCGATTCACCTAGGGTATCTCTGTAGGGCCTAG CTCCTAGGGAAACGCTAAGTGGATCCCATAGAGACATCCCGGATC Ｅ GCATCGGCCCCCGGTAAATATTCTCGGGGCGGGTAGCCGCCTAGT CGTAGCCGGGGGCCATTTATAAGAGCCCCGCCCATCGGCGGATCA 019 Bal31 工具酶是一种 【 】 Ａ 只切双链 DNA 的外切酶 Ｂ 双链单链 DNA 均切的外切酶 Ｃ 双链单链 DNA 和 RNA 均切的外切酶 Ｄ 双链单链 RNA 均切的外切酶 Ｅ 只切双链 RNA 的外切酶
020 下列有关连接反应的叙述，错误的是 【 】 Ａ 连接反应的最佳温度为 37 ℃
Ｂ 连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于 10% Ｃ 连接反应缓冲体系的 ATP 浓度不能高于 1mM Ｄ 连接酶通常应过量 2-5 倍 Ｅ DTT 可以维持连接酶的结构
021 某一质粒的多克隆位点上含有下列单一限制性内切酶识别序列： AluI 、 BglII 、 ClaI 、 DpnI 、 EcoRV ， 若将含有 EcoRI 粘性末端的外源基因克隆在这个质粒上，并保留 EcoRI 酶切位点，则合适的插入位点是 【 】 Ａ AluI Ｂ BglII Ｃ ClaI Ｄ DpnI Ｅ EcoRV
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022 若将含有 5' 末端 4 碱基突出的外源 DNA 片段插入到含有 3' 末端 4 碱基突出的载体质粒上，又必须保证连接区域的碱基对数目既不增加也不减少，则需用的工具酶是 【 】 I T 4 -DNA 聚合酶 II Klenow III T 4 -DNA 连接酶 IV 碱性磷酸单酯酶 Ａ III Ｂ I + III Ｃ II + III Ｄ I + II + III Ｅ I + II + III + IV
023 若载体 DNA 用 M 酶切开，则下列五种带有 N 酶粘性末端的外源 DNA 片段中，能直接与载体拼接的是 【 】 M N Ａ A/AGCTT T/TCGAA Ｂ C/CATGG ACATG/T Ｃ CCC/GGG G/GGCCC Ｄ G/GATCC A/GATCT Ｅ GAGCT/C G/AGCTC
024 下列各组分别用两种不同的限制性内切酶切开的 DNA 片段经补平并连接后，其重组分子内能产生 ClaI 限制性内切酶酶切位点的是 【 】 Ａ BglII / BamHI Ｂ HindIII / BamHI Ｃ MluI / BamHI Ｄ SpeI / BamHI Ｅ XbaI / BamHI
025 质粒 DNA 和外源 DNA 各用两种限制性内切酶切开，经连接转化后获得重组子。下列各组重组子中有可能含有两种相反基因极性的是 【 】 Ａ ApaI / ClaI Ｂ BamHI / BglII Ｃ BclI / SmaI Ｄ HindIII / KpnI Ｅ SphI / PstI
026 提高重组率的方法包括 【 】
I 加大外源 DNA 与载体的分子之比 II 载体分子除磷 III 连接酶过量 IV 延长连接反应时间 Ａ I + II Ｂ I + II + III Ｃ I + III + IV Ｄ II + III + IV Ｅ I + II + III + IV
027 载体的功能是 【 】
I 运送外源基因高效进入受体细胞 II 为外源基因提供复制能力 III 为外源基因提供整合能力 Ａ I Ｂ I + II
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Ｃ I + III Ｄ II + III Ｅ I + II + III
028 下列有关质粒分子生物学的叙述，错误的是 【 】 Ａ 质粒是共价环状的双链 DNA 分子
Ｂ 天然 质粒一般不含有限制性内切酶的识别序列 Ｃ 质粒在宿主细胞内能独立于染色体 DNA 自主复制 Ｄ 松弛复制型的质粒可用氯霉素扩增 Ｅ 质粒并非其宿主细胞生长所必需
029 带有多个不同种复制起始区的质粒是 【 】 Ａ 穿梭质粒 Ｂ 表达质粒 Ｃ 探针质粒 Ｄ 整合质粒 Ｅ 多拷贝质粒
030 多聚接头（ Polylinker ）指的是 【 】
Ａ 含有多种限制性内切酶识别及切割顺序的人工 DNA 片段 Ｂ 含有多种复制起始区的人工 DNA 片段 Ｃ 含有多种 SD 顺序的人工 DNA 片段 Ｄ 含有多种启动基因的人工 DNA 片段 Ｅ 含有多种特定密码子的人工 DNA 片段
031 l -DNA 体外包装的上下限是天然 l -DNA 长度的 【 】 Ａ 25 - 50 % Ｂ 50 - 100 % Ｃ 75 - 100 % Ｄ 75 - 105 % Ｅ 100 - 125 %
032 l -DNA 体外包装系统通常分成分离的两部分，其原因是 【 】 Ａ 安全
Ｂ 包装蛋白含量太大难于溶解 Ｃ 便于操作 Ｄ 提高转染率
Ｅ 包装蛋白组份的冷冻保藏条件不同 033 琥珀突变是指 【 】 Ａ 起始密码的突变 Ｂ 终止密码子的突变 Ｃ 精氨酸密码子的突变 Ｄ 谷酰胺密码子的突变 Ｅ 丙氨酸密码子的突变
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034 考斯质粒（cosmid）是一种 【 】 Ａ 天然质粒载体
Ｂ 由 l -DNA 的 cos 区与一质粒重组而成的载体 Ｃ 能裂解受体细胞的烈性载体 Ｄ 具有溶原性质的载体
Ｅ 能在受体细胞内复制并包装的载体
035 下列各常用载体的装载量排列顺序，正确的是 【 】 Ａ Cosmid > l -DNA > Plasmid Ｂ l -DNA > Cosmid > Plasmid Ｃ Plasmid > l -DNA > Cosmid Ｄ Cosmid > Plasmid > l -DNA Ｅ l -DNA > Plasmid > Cosmid
036 目前在高等动物基因工程中广泛使用的载体是 【 】 Ａ 质粒 DNA Ｂ 噬菌体 DNA Ｃ 病毒 DNA Ｄ 线粒体 DNA Ｅ 叶绿体 DNA
037 下列各组用于外源基因表达的受体细胞及其特点的对应关系中，错误的是 【 】 Ａ 大肠杆菌－繁殖迅速 Ｂ 枯草杆菌－分泌机制健全 Ｃ 链霉菌－遗传稳定
Ｄ 酵母菌－表达产物具有真核性
Ｅ 动物细胞－具有完善的蛋白质糖基化功能 038 基因工程的受体细胞必须具备 【 】 I 限制性缺陷 II 营养缺陷 III 感染寄生缺陷 Ａ I Ｂ I + II Ｃ I + III Ｄ II + III Ｅ I + II + III
039 促红细胞生长素（ EPO ）基因能在大肠杆菌中表达，但却不能用大肠杆菌的基因工程菌生产人的促红细胞生长素，这是因为 【 】
Ａ 人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用 Ｂ 人的促红细胞生长素基因在大肠杆菌中极不稳定
Ｃ 大肠杆菌内毒素与人的促红细胞生长素特异性结合并使其灭活 Ｄ 人的促红细胞生长素对大肠杆菌蛋白水解酶极为敏感 Ｅ 大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化 040 原生质体转化方法不大适用于 【 】 Ａ 大肠杆菌 Ｂ 枯草杆菌
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Ｃ 酵母菌 Ｄ 链霉菌 Ｅ 植物细胞
041 某一重组转化系统的重组率为 10% ，转化率为 10 7 / m g DNA ，经切接单元操作后的载体转化率为原来的 1% 。若欲获得 10,000 个重组克隆，需在重组实验中投入载体 【 】 Ａ 0.1 m g Ｂ 0.5 m g Ｃ 1.0 m g Ｄ 2.0 m g Ｅ 10 m g
042 克隆菌扩增的目的是 【 】
I 增殖外源基因拷贝 II 表达标记基因 III 表达外源基因 Ａ I Ｂ I + II Ｃ I + III Ｄ II + III Ｅ I + II + III
043 载体质粒 pBR325 共有三个选择性标记： Ap r 、 Tc r 、 Cm r 。它们分别含有一个单一酶切位点： PstI 、 SphI 和 EcoRI 。若将一外源基因取代此载体上不含 Cm r 标记基因的 PstI-SphI 限制性 DNA 片段，那么用于转化子和重组子筛选的试剂应是 【 】 Ａ Ap Ｂ Tc Ｃ Cm Ｄ Ap + Tc Ｅ Ap + Cm
044 经抗药性遗传标记法筛选出的转化体中，往往会出现无载体或无重组 DNA 分子的菌落，其原因很可能是 【 】 Ａ 标记基因发生突变 Ｂ 载体或重组分子不稳定
Ｃ 载体或重组分子整合入受体染色体中 Ｄ 载体空载
Ｅ 筛选药物诱导受体细胞产生抗性
045 若某质粒带有 lacZ 标记基因，那么与之相匹配的筛选方法是在筛选培养基中加入 【 】 Ａ 半乳糖 Ｂ 葡萄糖 Ｃ 蔗糖
Ｄ 5- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚基 - b -D- 半乳糖苷（ X-gal ） Ｅ 异丙基巯基 - b - 半乳糖苷（ IPTG ）
046 下列载体常用选择性标记中属于营养缺陷型的是 【 】 Ａ tsr Ｂ Ap r
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