石蜡制片实验报告

2020-02-21 02:19

篇一:石蜡切片技术实验报告 题目:石蜡切片技术实验报告

学院:农学院,专业:植物学,姓名:张永丰,学号:2011202010 目的

掌握石蜡切片技术,为以后的科研中切出合格的实验装片做准备。并观察植物叶的横切面内部结构。

材料:已经固定好的女贞叶 方法与操作步骤

一、 脱水:依次使用下列浓度的乙醇脱水

50%乙醇—70%乙醇—85%乙醇—95%乙醇—100%乙醇—100%乙醇 每步两个小时。 二、 透明:依次通过下列试剂进行透明

1、1/2无水乙醇1/2二甲苯(加少许番红粉末,对材料进行附染)两个小时 2、二甲苯两个小时 3、二甲苯一个小时

三、 浸蜡:浸蜡步骤如下 1、将材料瓶中的二甲苯取出1/2,加入剩余二甲苯的体积3/2倍的石蜡液于36℃温箱中处理35小时

2、换用纯石蜡液于60℃温箱中处理2小时,再换一次纯石蜡液处理2小时 四、 包埋与切片

1、在提前准备好的纸盒中放入少量蜡液。

2、片刻后放入材料,避免形成断层还要注意材料摆放的位置和方向。 3、及时将蜡块冷却,防治形成结晶。

4、修块与粘连:将多余的石蜡切除,使蜡块成为梯形;将蜡块一正确的方向粘连在枕木上。 5、切片:利用切片机将蜡块切成薄片。切片厚度为8~10μm,以每分钟40~50转为宜。 6、粘片与展片:在载玻片上滴一滴黏贴剂和一滴蒸馏水用牙签涂匀,将蜡带光面朝下固定于载玻片上,放到展片台上经加温使其充分展开。 7、干燥:将展好的片放于36℃温箱中干燥16小时 五、脱蜡:切片分别经过下列步骤进行脱蜡

二甲苯1/2二甲苯1/2无水乙醇乙醇85%乙醇70%乙醇 5min 六、染色:染色分为番红染色和固绿染色两步

1、番红染色:将载玻片放入盛有番红染液(1%番红,70%乙醇)的染缸中染 色22小时

2、固绿复染:载玻片依次经过一下处理 固绿染液(0.1%固绿,95%乙醇)20秒

3、脱水:95% 1min 100% 1min 100%1min

4、透明:1/2二甲苯1/2无水乙醇 1min 二甲苯 1min 二甲苯 七、封片

中性树胶封片,干燥

八、镜检将封好的装片在显微镜下观察,并挑选清晰的具有叶横切面典型结构特征的部位拍照。

结果与分析 一、结果分析 二、方法分析 1、包埋是材料放置的位置不正确加之材料较大,为切片带来较大困难,以致切片效果不理想。

2、番红染色时间短,观察结果中应该是红色的部位不明显。 3、固绿复染时间短,表皮细胞染色不清晰。 4、材料固定时间过长,或者处理过程中使得材料变脆,切片时把叶的远轴面表皮与叶片脱离,使得观察结果中的很多叶片没有远轴面表皮。篇二:石蜡切片实验报告 普通生物学实验报告

一、实验名称:番红-固绿二重染制作百合子房永久切片 二、实验材料和用具: 1.材料:新鲜百合花子房 2.试剂:faa固定液(50%乙醇89ml+冰醋酸5ml+甲醛6ml)、1%番红、1%固绿、各级乙醇(30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%)、脱水剂、石蜡、封片胶。

3.用具:包埋机、切片机、摊片机、快速制片处理仪、恒温箱、解剖刀、镊子、单面刀片、毛笔、乙醇灯、包埋盒、染缸、晾片板、温度计等。 三、实验步骤:

取材→固定→冲洗→脱水→透明→透蜡→包埋→切片→镜检→烤片→染色→树胶封藏→镜检→显微照相 染色程序如下:

*切片在二甲苯中脱蜡,10-20min,直至全部石蜡脱掉; *1/2纯乙醇+1/2二甲苯,5min; *经无水乙醇、95%、90%、80%、70%、50%、30%各级乙醇各5min,蒸馏水5min; *1%番红水溶液染色10小时左右; *用水洗去多余染液;

*30%、50%、70%、80%、90%、95%各级乙醇脱水,5min; *在材料上滴加1%的固绿(95%乙醇配制),染色10-30s;*95%乙醇漂洗; *纯乙醇脱水5min;

*1/2纯乙醇+1/2二甲苯,5min,纯二甲苯5min. 四、实验结果:

百合子房横切7微米4倍

百合子房横切 7微米 40倍 注:胚囊内并没有观察到细胞 篇三:小鼠肝脏石蜡切片—实验报告 实验九 显微摄影――小鼠肝脏结构

年级专业 *班 *组 学号 姓名 α β 500μm 1 m 2 100μm i 100μm 4 50μm 图版说明:

图1:小鼠肝脏横切部分结构,示肝小叶(a),静脉血管(b)。 图3:示肝小叶(d)。 图4:示静脉血管(e)。 图5:示肝细胞(f),肝细胞细胞核(g)。 图6:图2(β部位)的放大,示上皮细胞(h),上皮细胞细胞核(i),肝血窦(j),中央静脉(k),肝动脉(l),血细胞(m)。 结构说明:

肝脏是脊椎动物身体内以代谢功能为主的一个器官,并在身体里面扮演着氧化,储存肝糖,解读等功能。肝脏由肝小叶组成,肝小叶是肝脏的基本组成成分,它来执行肝脏的基本职能。而肝小叶又是由肝细胞组成,当肝细胞大量损坏时,肝小叶不能正常工作,影响肝脏正常生理功能,而出现各种各样的症状。肝小叶成棱柱状,中央有一条中央静脉穿过,肝细胞围绕中央静脉成放射状排列。

肝细胞是一种高度分化并具有多种功能的细胞,胞质内各种细胞器丰富而发达,并含有糖原,脂滴等内涵物。细胞器和内涵物的含量与分布常因细胞的功能状况或饮食变化而变动。一般肝细胞里线粒体含量都比较多,遍布于胞质内,为肝细胞的功能活动不断提供能量。 肝细胞核大而圆,居中央,染色质丰富色浅,核膜清楚,核仁1至数个。部分肝细胞(约25%)有双核,有的肝细胞的核体积较大,为多倍体核。

肝血窦位于肝板之间,互相吻合成网状管道。血窦腔大而不规则,血液从肝小叶的周边经肝血窦流向中央,汇聚到中央静脉。 5 50μm


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