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图5. 不同pH条件下的峰高 3.2 流动相组成的选择
相关文献[27]中有报道，分别采用（1）乙腈+乙酸钠缓冲液（pH=4.5）=80+20；（2）乙腈+乙酸铵缓冲液（pH=4.5）=80+20为流动相进行检测，实验结果表明，用流动相（1）进行检测时基线噪音大，对检测结果有干扰，而用流动相（2）进行检测时基线噪音小，对检测基本无干扰。文献[38]中有报道，选择乙腈0.125 mol /L(pH=4.5)乙酸胺溶液作为流动相，实验结果表明，当乙腈含量超过80%时，峰形出现拖尾现象，当乙腈含量低于60%以下时，出峰保留时间太长[39]。因此选择乙腈+乙酸铵缓冲液（pH=4.5）=80+20为流动相进行检测，在此分离条件下，孔雀石绿峰形对称，柱效高。 3.3 线性范围、检出限
将10μg/mL的MG溶液稀释至0.1μg/mL、0.5μg/mL、1μg/mL、2μg/mL，在优化的实验条件下，即萃取时间15min,解吸时间5min,在595nm处检测，用峰面积对浓度绘制标准曲线，得出本实验的定量线性范围和检出限、灵敏度。
表3 不同浓度溶液出峰的峰高 浓度/μg/mL 峰高 0.1 323 0.5 961.7 1 1656.1 2 2616.7
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以HPLC测得的峰高y为纵坐标，相应的浓度x为横坐标绘制标准曲线，其线性关系为：y=319.66708+1188.56436x,该方法在孔雀石绿浓度范围在0.1一2.0μg /mL时，R=0.99239，根据3倍信噪比计算，最低检测限为0.003μg/mL。
4．结论
根据色谱分析结果，选择极性较强的PA作为萃取头。在15min萃取时间下，解吸5min,在595nm检测波长下，检测线性范围为0.1-2μg/mL，检出限为0.003μg/mL。
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