光合细菌的培养方法(2)

2020-02-21 23:05

这时,您可能要检查一下,是否容器密封得太死,最好是有一点氧气进入会更好。从上表也可以看出,在半好氧的条件下,往往可以得到比较鲜艳的红色产品。所以培养时,最好能进入一次空气,或在容器中留一部分空气,一来可以保持半好氧状态,二来也便于摇晃均匀。

如果最终培养成为了绿色的液体,这时,培养液中的营养也已消耗殆尽了,只是不能作为商品出售,可以自用(也是光合细菌)。

另外,温度高,光照强的条件下,容易得到绿色菌,这是因为此时的条件容易造成水体缺氧,从而引起绿色菌的生长优势。

总之,要得到颜色鲜艳的红色菌,就必须注意以下几个条件,1、注意要保持半好氧培养的条。2、温度光照不要太强。3、出现一点绿色也不要灰心,要及时采取措施,如增加供氧,遮荫降温等,并坚持培养下去。4、平时注意用灯泡和纸箱的培养方式,不间断地培养一些菌种,因为必竟这种培养的方式得到的培养液的质量好,菌体稳定。 七、光合细菌在水产养殖中的应用技术 1、净化水质

由于高密度水产养殖的水体中含有大量的鱼类粪便和残饵,以及鱼药的残留物,它们腐败后产生的氨态氮、硫化氢和一些有害物质,直接污染水体和底泥。轻度污染可造成鱼类生活不适,饵料系数增高,生长缓慢,积累到一定程度后,可使水体底部缺氧的情况下,PSB能有效地将氨态氮、硫化氢等有害物质吸收,组成菌体本身,从而提高水体中溶氧含量,调节pH。水体的富营养化亦可滋生大量的病原微生物,使鱼类感染发病。施用PSB后,还能抑制其它病原菌的生长,从而达到净化水质,使鱼类健康生长的目的。 2、维护水体微生态平衡

水产养殖场的水体中存在着各种各样的微生物,有些是有益的,有些是有害的;也有些是处于中间状态的叫“条件致病微生物”,即正常情况下,这类微生物不致病,遇水质污染,鱼类免疫功能下降时,它们便大量繁殖危害鱼类。

通常人们采用消毒杀菌剂来控制,但随着施用次数的增加,病原微生物的耐药性也相应地增强,为了达到预防和治疗的效果,每次施用的剂量不得不逐渐加大,这不仅增加了用药成本,而且还污染了水体,造成水产品质量下降,甚至不能食用。

如何控制病原微生物的生长繁殖,又不使其不产生抗药性,不污染水体呢?答案是现成的,用光合细菌预防鱼病,完全可克服消毒杀菌剂的缺点,它不仅可降解或清除水体中包括鱼药在内的有害化学物质,占绝对优势的光合细菌还可与病原微生物争夺营养、空间,使其无法进行大量生长繁殖,

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同时还不存在病原微生物耐药性问题,从而不易形成致病的环境条件,鱼类也就不易发病。 鱼类的病害防治原则是:防重于治。只有在日常的渔业生产中,维持水体中微生态系统平衡,使有益微生物始终占绝对优势,尽量不给病原微生物有大量生长繁殖的机会,才是健康养殖的出路之一,如果平时不能有效地预防,到了出现症状再去治疗,包括鱼药成本在内的重大生产损失将是不可避免的。

3、培养蜉蝣动物作饵料

PSB的菌体细胞营养很丰富,这正好是蜉蝣动物的优质饵料,实践证明,水体中的PSB越多,蜉蝣动物生长也就越旺盛,以蜉蝣动物为食的鱼类增产效果也就越明显 4、作为饲料添加剂

PSB的菌体细胞营养丰富,并含有大量的生理活性物质,可直接拌入饲料中投喂,除增加营养,降低饲料系数外,还可起到刺激动物免疫系统,增强消化和抗病能力,促进生长的作用。 5、间接增氧作用

PSB生长繁殖时,不需要氧气,也不释放氧气,它是通过吸收水体中的耗氧因子,而产生了间接地增加氧气的作用。

八、光合细菌在养殖和种植上的用法用量

(一)PSB在水产及畜禽养殖中的应用剂量及注意事项。

PSB对各种水产养殖动物都有益,尤其是育苗阶段的效果特别地明显,具有成活率高于对照20—60%,用于成鱼育肥,增产20%左右,饵料系数下降20%左右,个体增重15%,且无任何副作用。 育苗用量:每平方米用100克。间隔10天用一次。

鱼育肥:首次用7公斤一亩,以后用4—5公斤/亩,间隔15天用一次。 鱼苗或病鱼药浴:用光合细菌稀释10倍,把鱼苗或病鱼放入游15分钟即可。

药浴后,可使药浴鱼虾成活率提高90%,如患粘细菌病、烂鳃病、打印病后成活60-100%,患水霉病、赤鳍病、擦伤病后成活近100% 且无任何药浴副作用。

饲料中用量:鱼苗5%,成鱼3%,禽畜3%-5%,现拌现喂,喂水添加3%。现拌现喂。 施用方法:适当用水稀释后全池洒匀,若先用生石灰后2小时,再用PSB则效果更好。 注意事项:不可与消毒杀菌剂同时使用,水体消毒须1周后方可使用。晴天水温在20度以上时使用效果较好。液体PSB拌入料中后应于当天用完。酸性水体易使鱼生病,且不利于PSB生长,应常用生石灰调节水体pH值。 (二)在种植业上的应用:

水稻、小麦:每次亩用5千克叶面喷施。水稻秧苗期、孕穗期各用一次;小麦冬肥、拔节期各

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用一次。

油菜:基肥亩用15千克浇根。窜苔前亩用15千克叶面喷施。

瓜果类蔬菜:每次亩用10千克,幼苗期稀释浇根一次,现蕾期喷一次。 叶菜类蔬菜:每次亩用20千克,生长期浇根或叶面喷施,7天用一次。 花卉:移载后每亩40千克浇根,生长期每亩20千克喷施,15天一次。

茶树:播种基肥亩用80千克。冬肥亩用40千克浇根。萌发期前亩用20千克浇根,叶片生长期亩用15千克喷施,每15天一次。

果树:冬肥亩用40千克浇根。新叶长成后亩用20千克叶面喷施。

(三)使用方法

(1)将光合细菌菌液稀释20-30倍全池均匀泼洒。 (2)将菌液用沸石粉吸附或拌和细土后撒入池中。 (3)将菌液拌和饲料后投喂。 (4)将菌液稀释10倍后,浸泡鱼种。 (5)拌种、浇根、叶面喷施。

(四).注意事项

(1)不可与消毒杀菌剂混合使用,水体消毒须1周后方可使用。 (2)使用前,将菌液光照10小时以上,使用效果更好。 (3)晴天水温20℃以上时使用效果较好。 (4)拌入的饲料应于当天投喂完毕。

(5)应灵活掌握用量和使用的连续性,因为光合细菌在水体中只有形成优势群落后,才能发挥最大的作用。宜春专利中心提供光合细菌发生剂。

(6)水体呈碱性时施用效果最好。酸性水体易使鱼类生病,应常用生石灰或烧碱调节pH值至中性或偏碱程度。

(7)光合细菌菌液不能用金属器皿贮存。

(8)培育鱼苗时,在苗种入池前7天全池泼洒,以利于浮游生物生长。 (9)植物萌发期,施用效果最好。 九、光合细菌液体成品的保存方法

成品应放在低温环境下,15度以下最好,夏季应放在凉爽的地方,并要保持一定的光照度,每天不低于2小时,这是因为PSB在刚刚结束培养时,正处于生长旺盛期,形成了很强的“生长惯性”,

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如果此时突然没有了光照或光照很弱,经5~10天后会出现光合作用失衡而导致大量死亡,使菌液发黑,并有恶臭,刚开始发黑时若施以适当光照,即可缓和。所以刚培养好的成品应尽量降温,逐步降光照,以减少生长惯性,到了生长惯性很弱或没有惯性时,PSB就进入了稳定期,此时在阴凉避光处可保存6个月。

总之,保存期的长短主要取决于温度、光度。通常您在正常的连续的生产及使用过程中,对PSB的的保存及留种无须做特别的处理,如:夏天在太阳下培养的产品就放于阳光下,可保2个月,可不断地再培养,扩大,反复等。秋天,培养的最后一批产品可保1年之久。 十、光合细菌的活菌计数和纯种分离技术

采用琼脂固体培养基涂抹培养计数分离法。

条件:无菌室、过滤空气鼓风工作台、平皿、接种针、固体培养基、液体培养基、密封玻璃试管、高压灭菌锅、加热器、培养箱等。 步骤:(在无菌室内操作)

1.将适量琼脂固体培养基高压蒸煮(120℃)20分钟后,倒入若干个平皿冷却到45℃以下,制成固体培养基待用。

2.取待测光合细菌菌液,分别用蒸馏水以10万倍、50万倍、100万倍、500万倍、5000万倍、10000万倍 稀释。

3.分别从每个稀释倍液中取1毫升的样本各10个,均匀涂布于贴好相应标签的平皿内固体琼脂培养基平面上。

4.将平皿放入培养箱培养12-50个小时,如菌落未长成,再继续培养,直到有明显的菌落长成为止。

5.各种菌的菌落颜色、形状各不相同,根据光合细菌菌落特征,找出光合细菌菌落,并计数。取同稀释倍液10个样本菌落的平均数,乘以它的稀释倍数,即可大约得出待测菌液每毫升含光合细菌的活菌数。取各稀释倍液算出的每毫升含光合细菌活菌的平均数,即可较为准确地检测出该待测菌液的浓度。实际操作并不如此简单,因为菌落有杂菌和光合菌交错在一起的,也有两个以上光合细菌菌落合在一起的,很难分辨计数。

6.用接种针将光合细菌菌落挑出,用适量蒸馏水稀释后,再涂布于固体培养基平面上,进行培养,待光合细菌在培养基上再次长成菌落后,在鼓风工作台内用接种针挑出,接入盛有经高压蒸煮灭活过液体培养基的试管内,进行密封厌氧培养,培养好的光合细菌就是纯菌种。

纯菌种的分离是专业性很强的一门技术,只有专业人员,且经验丰富的,才能识别各种菌落,从中分离出有用的菌株。

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十一、光合细菌品质的鉴别

目前,市面上光合细菌产品良莠不齐,有些不法厂家为达到赢利目的,采用色素加水调配成所谓的光合细菌,或用培养得不好的劣质光合细菌加色素调配。这些假、劣产品从外貌看几乎可以乱真,但是由于质量低劣,完全达不到有关指标的标准,使用后甚至会残害养殖对象,严重地侵犯了用户的利益。如何分辨光合细菌产品的真与假、劣,成为许多用户头疼的事情。

科学培养出来的光合细菌产品的红色是光合细菌菌体的颜色,为非水溶性的,而用色素调配出来的假劣产品的红色为水溶性色素的颜色。根据这两者的不同,我们设计了一套鉴别真与假、劣产品的方法,经反复试验证明该方法科学、准确、易操作、易观察。现将此方法介绍给广大用户,希望能对用户辨别真与假、劣光合菌产品有所帮助。具体方法如下:

1、鉴别绿色色素溶液的配制:称取食用果绿色素0.1克,溶于100毫升自来水中,配成深绿色的鉴别色素溶液。或取少量食用果绿色素,溶于适量自来水中,配成深绿色的溶液。 2、取样品:取待测的样品10-20毫升装于干净、透明的玻璃管中。 3、滴2滴鉴别绿色素溶液于装有待测样品的玻璃管中。 4、观察颜色的反应。

若样品为真正培养的光合细菌产品,绿色素溶液则会与红色光合细菌分层,上层绿色为绿色素溶液,下层红色为光合细菌液,摇动之后稍微放置,分层仍是存在,滴加的鉴别绿色素溶液越多,绿色层所占的比例越多,最后,整玻璃管都为绿色。

若是用色素调配出来的假光合细菌产品,可见滴加的鉴别绿色素溶液会溶于红色产品中,绿色溶液与红色溶液不会分层,轻轻摇动后,两者颜色会混匀,样品的红色加深,红中带有点紫,滴加的绿色色素溶液越多,颜色就会逐渐加深为紫黑色。

有些厂家在培养得不好的劣质光合细菌产品中加色素调色。如果鉴别这一类加有色素的劣质光合细菌产品,同样也可用上述的方法。产品中因色素加量不同,加入鉴别绿色色素溶液后,会有不同的颜色反应。若其产品中红色素添加量较少,滴加鉴别绿色色素溶液后,会有分层,上层为浅绿,绿中带有些紫。随着产品内红色素加量的增加,滴加绿色素溶液后还会有分层,但上层较下层深紫红,产品内调配的红色素量进一步加大,上层颜色为深紫,轻摇后,整管颜色为紫黑色。 十二、沼泽红假单胞菌(光合细菌)水剂产品质量暂行标准 1998-8-4 农牧函[1998]30号

沼泽红假单胞菌(光合细菌)水剂产品质量暂行标准 1.主题内容与适用范围

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