实验名称：污泥中挥发性脂肪酸测定
一、实验目的：
1、熟悉实验操作过程和实验仪器的使用，锻炼自己的实验操作能力。
2、培养自己的实验操作细节，为以后读研究生做实验打好基础。 3、锻炼和实验合作者团队合作能力。
4、了解VFA测定的基本过程以及测定方法所用原理。 二、取样地点：农大湿地教学基地的排水沟 三、实验仪器：各种基本实验仪器、LXJ-IIB型离心机 四、实验步骤：
1、在校园湿地教学基地取排水沟底泥作为实验待测样品。 2、将污泥取出约150mL置于塑料杯中，再和其他组一同放进离心机中进行离心。（注意：放的时候要两两对称，否则会损坏离心机！）
3、此等待期间清洗好实验所需仪器，安装好蒸馏设备，做好准备工作。
4、离心约5min后关闭电源，让它自行停止。约15min左右离心机自行停止。（由于离心机损坏，不能人为控制其停止，故只能如此操作）
5、将离心机内装有污泥的塑料杯取出，再移取50mL上清液于500mL容量瓶中，加入50mL蒸馏水和5-6粒沸石。
6、再加入2mL15%磷酸，接好玻璃导管，将橡胶管塞严。导管一
头接烧瓶口，另一头接冷凝管，冷凝管下面导管插入盛有25mL蒸馏水作为吸收液的250mL锥形瓶中
7、打开电炉，加热至蒸馏烧瓶刻度的20％左右（烧瓶刻度不明显，大致估算为20％），停止加热，再加入50mL蒸馏水继续蒸馏至烧瓶刻度的20％左右。
8、取下锥形瓶，在电炉上加热至沸腾，趁热加5-10滴酚酞指示剂，用0.0974mol/L的NaOH滴定至淡粉红色而不消失为止。记录所用体积为0.18mL。 五、数据处理：
根据公式：挥发性脂肪酸含量L（mg/L）= (1000cV1)/V2 c --- NaOH溶液浓度。mol/L
V1---滴定消耗NaOH体积，mL V2---水样体积，mL
经过计算得L=(0.18*0.0974*1000)/50=0.3506mg/L 六、思考题
1、自行了解气相色谱法测定VFA的方法，有条件可进行操作。
用色谱仪上的氢火焰检测器测定挥发性脂肪酸含量，基本原理
是：色谱柱分离后馏出的物质，被载气载入检测器离子室的喷嘴口，与燃烧气—氢气相混合，并以空气助燃气进行燃烧，以此为能源，将组分电离成离子数目相等的正离子和负离子（电子）。在离子室内装有收集极和底电极，因此离子在电场内作定向流动，形成离子流。该离子流被收集极收集后，经过微电流放大器放大输送给记录仪得到信
号，此信号的大小代表单位时间内进入检测器火焰的组分含量。通过信号测出的组分含量，就可得知污泥中挥发性脂肪酸的含量。 实验因素对测定结果的影响 1、样品 pH调节对测定结果影响
有研究表明 pH 在 4 以上，由于挥发酸的解离度增大， 各脂肪酸的测定值将迅速降低。以 100 mg/L 乙酸水溶液为例， 在不同的 pH 情况下测定其实际浓度，当溶液的 pH 到达 3 以上， 乙酸水溶液中的乙酸将迅速解离，当溶液的 pH 到达 6 以上，乙酸水溶液中的乙酸几乎完全解离。 所以在实际测定中必须对每个样品进行 pH 值测定和控制。
2、色谱检测拖尾问题
挥发酸由于其强极性，容易产生拖尾。 要消除拖尾，一是要选择合适的极性柱（如 DB-FFAP），二是采用程序升温法。 采用极性柱能将挥发酸系列分离开来， 采用程序升温， 能减少甚至消除拖尾。 按照目前的方法和选用的柱子，除丙酸有一些拖尾外，其余物质均无明显拖尾。
3、吸附和残留影响
挥发性脂肪酸是一种易吸附物质， 在实际检测中选择纯甲酸作为吸附占据剂， 因为甲酸的吸附性优于其他挥发性脂肪酸， 并且在气相色谱FID 检测器上的响应几乎没有。 在标准配制和样品处理阶段必须加入甲酸控制色谱柱和容器对目标挥发性脂肪酸的吸附。在标准配制中使用 5%的甲酸溶液作为稀释用水， 在样品处理阶段在离心完
成后， 先取 0.15 ml 甲酸再取 3 ml 上清液混匀测定。在测定完成后，反复测定 5%甲酸水溶液，清洗进样针和色谱柱， 否则容易造成进样针堵塞和毛细管柱污染。 由于分流衬管污染无法避免，建议定期更换。
由于我校实验仪器条件有限，所以无法操作。 七、实验心得体会：
这次实验我受益匪浅。让我学到了一些实验操作方法和操作细节。比如：在使用电炉的时候要注意橡胶管接头处是否堵塞，如果堵塞，将可能会造成爆炸危险。还有离心机使用的时候一定要注意，不可马虎随意。这次实验也锻炼了我的实验操作能力，我们在做实验的时候必须以积极认真的态度应对，切不可大手大脚。
参考文献：
[1]顾福权,徐红娟,柳展飞,陈罡,滕飞. 气相色谱法测定废水中6种挥发性脂肪酸含量[J]. 能源环境保护,2014,03:62-64. [2] C2～C5挥发性脂肪酸的气相色谱测定法.百度文库