石蜡包埋(小鼠脑组织)

2020-03-26 19:58

石蜡包埋

第一天:固定,取材当天即把所需包埋的组织(取出后放入4%的多聚甲醛中过夜(12h);

第二天:冲水,12小时(注意水流不需要太大,不可将水流直接冲击组织)

脱水,60%酒精4h白天(或者60%酒精4℃过

夜12h)→

第三天:→70%酒精4h→80%酒精4h→90%酒精4h→95%酒精4℃过夜(不一定12小时) →

第四天:→100%酒精Ⅰ2h→100%酒精Ⅱ2h→100%酒精Ⅲ2h→

透明,二甲苯Ⅰ5+3 min→二甲苯Ⅱ5+3 min→

二甲苯Ⅲ 5+3 min→二甲苯Ⅳ 3+2 min→

(此处注意,在透明过程进行到此处时,应在浸完后拿出脑组织观察一下透明是否彻底,一般来说透明完全的脑组织是呈现为一个通体琥珀状,如果是发现脑组织内部仍呈现不通透的白色则继续酌情追加浸泡(透明)时间)

浸蜡,软蜡Ⅰ2h→软蜡Ⅱ2h→软蜡Ⅲ 2h→ 中蜡包埋 备注:1、软蜡是指熔点48-50℃的石蜡,中蜡是指熔点58—60℃的石蜡。在包埋前应该提前将各种蜡准备好,放在对应的蜡缸里融好,注意不要加热太长时间。待蜡完全融好后关

上煤气,冷却至烧杯上沿不是太烫手且蜡也未凝固是将蜡挪到60℃温箱里备用。在融蜡时要注意通风橱使用规范。

2、包埋组织块时要注意动作熟练紧凑,时间过长就

会导致蜡温不够,影响包蜡质量。放组织块时要注意切面一定要放正确,待切的面朝向包埋铁框面。包埋时勿将气泡带入。可以稍微倾斜一些放置塑料包埋框。

3、酒精串缸结束后,可以将组织拿出一部分出来观

察一下是否切面平整,是否厚薄一致,以免影响透明的整齐度,导致组织透明的时间不一致。

4、酒精串缸结束后,把包埋盒用滤纸尽量弄干,然

后再往二甲苯中放。

5蜡块包埋完成后不要急于挪动,待蜡块凝固后再将

蜡块放到-20℃冰箱里冷藏10min,以利于将铁框和包埋盒分离。


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