第一章 复习思考题
1.试图示G+细菌和G细菌细胞壁的主要构造，并简要说明其异同？
答：①革兰氏阳性细菌的细胞壁：G+细菌细胞壁具有较厚（20-80nm）而致密的肽聚糖层，多达20层，占细胞壁成分的60%-90%。它同细胞膜的外层紧密相连。有的G+细菌细胞壁中含有磷壁酸也称胞壁质，它是甘油和核酸的酯而存在。由于磷壁酸通常带负电荷，它可在细胞表面能调节阳离子浓度，磷壁酸与细胞生长有关，细胞生长中有自溶素酶与细胞生长起作用，磷壁酸对自溶素有调节功能，阻止胞壁过度降解和壁溶。如果细胞壁的肽聚糖层被消溶，G+细胞成为原生质体，细胞壁不复存在，而只存留细胞膜。除键球菌外，大多是G+细菌细胞壁中含有极少蛋白质。②革兰氏阴性细菌的细胞壁：G-细菌细胞壁比G+细菌细胞壁薄（15-20nm）而结构较复杂，分外膜和肽聚糖层（2-3nm）。在细胞壁和细胞质膜之间有一个明显的空间，称为壁膜间隙。G-细菌细胞壁外膜的基本成分是脂多糖，它同细胞质膜相同之处也是双层类脂，但除磷脂外还含有多糖和蛋白质。 2.试述革兰氏染色的机制？
答：革兰氏染色的机制是：微生物学中最重要的染色法。通过结晶紫色初染和碘液媒染后，在细菌的细胞壁以内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。G+细菌由于其细胞壁较厚，肽聚糖网层次多和交联致密，故乙醇的处理不会溶出间隙，因此能把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内，使其保持紫色。反之，Gˉ细菌因其细胞壁薄，外膜层类脂含量高，肽聚糖层薄和交联度差，遇脱色剂乙醇后，以类脂为主的外膜迅速溶解，这时薄而松散的肽聚糖网不能阻挡，结晶紫和碘复合物的溶出，因此细胞退成无色，这时，再经沙黄等红色染料复染。就使Gˉ细菌呈现红色，G+细菌则仍保留最初的紫色了。此法证明了，G+和Gˉ主要由于起细胞壁化学成分的差异而引起了物理特性的不同而使染色反应不同，是一种积极重要的鉴别染色法，不仅可以用与鉴别真细菌也可鉴别古生菌。
3.什么是缺壁细菌？试列表比较4种缺壁细菌的形成，特点和实践意义？ 答：缺壁细菌是一种特殊的缺损或损细胞壁的细菌。虽然细胞壁是一切原核生物的最基本构造，但在自然界长期进化中和在实验室菌种的自发突变中都会产生少数缺细胞壁的种类，此外，在实验室中，还可用人为方法通过抑制新细胞壁的合成或对现成细胞壁进行酶解而获得人工缺壁细菌。
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自发缺壁突变：L型细菌
实验室中形状 彻底除尽：原生质体 人工方法去壁： 缺壁细菌 部分去除：球状体 自然界长期进化中形成：支原体
①原生质体：指人工条件下用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素抑制细胞壁的合成后，所留下的仅由细胞膜包裹着的圆球状渗透敏感细胞，一般由G+细菌形状。 ②球状体：指还残留部分细胞的原生质体，一般由Gˉ细菌形成。原生质体和球状体的共同特点是无完整的细胞壁，细胞呈球状，对渗透压较敏感，即使有鞭毛也无法运动，对相应噬菌体不敏感，细胞不能分裂等，在合适的再生培养基中，原生体可以恢复，生长细胞壁。
③L型细菌：L型细菌专一指在实验室中通过自发突变形成的遗传性稳定的细胞壁缺陷菌株，L型细菌虽然丧失合成细胞壁的能力，但是由于质膜完整在一定的渗透压下不影响其生存和存殖，但是不能保持原有细胞形态，菌体形成高度多形态的变异菌。
④支原体：是在长期进化过程中形成的适应自然生活条件的无细胞壁的原生核微生物。其细胞壁中含有一般原核生物所没有的甾醇，因此虽缺乏细胞壁，其细胞仍有较高的机械强度。
人们在实验中，还可用人为方法通过抑制新生细胞壁的合成或对现成细胞壁进行酶解而获得人工缺壁细菌。
4.研究细菌芽孢有何理论和实际意义？
答：①芽孢的有无，形态，大小和着生位置等是细菌分类和鉴定中的重要形态学指标。
②这类菌种芽孢的存在，有利于提高菌种的筛选效率，有利于菌种的长期保藏。 ③是否能杀灭一些代表菌的芽孢是衡量和制定，各种消毒灭菌标准的主要依据。 ④许多产芽孢细菌是强致病菌，例如：炭疽芽孢杆菌肉毒校菌和破伤风校菌等。 ⑤有些产芽孢细菌可伴随产生有用的产物，如：抗生素短杆菌肽等。
5.什么是菌落？试讨论微生物的细胞形态与菌落形态间的相关性及其内在原因？
答：菌落是指单个（或聚集在一起的一团）微生物在适宜的固体培养表面或内部生长，繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的，有一定形态结构的子细胞生长群体。菌落形态包括菌落的大小，形态，边缘，光泽质地，颜色和透明程度等，每一种细菌在一定条件下形成固定的菌落特征，不同种或同种的培养条件下，菌落特征是不同的，这些特征对菌落种识别，鉴定有一定意义。
细胞形态是菌落的基础，菌落形态是细胞形态在群体集聚时反映，细菌是原微生物故形成的菌落也小，细菌个体之间瞒着水分，所以整个菌落显得湿润，易被接种环挑起，球菌形成隆起的菌落，有鞭毛细菌常形成边缘不规则的菌落，具有硬膜的菌落表面较透明，边缘光滑整齐，有芽孢的菌落表面干燥皱褶，有些能产生紫色的细菌，菌落还显出鲜艳的颜色。其原因，菌落的特征是细菌自身的形态结构及营养特性在菌落生长形态上的反应。
6.试以链霉菌为例，描述这类典型放线菌的菌丝，孢子和菌落的一般特征？ 答：放线菌是一类主要呈菌丝状生长和以孢子繁殖的陆生性较强的原核生物，多数生活在土壤中，它们中有许多是抗生素的生产物，链霉菌属是典型的放线菌，它们基内有基内菌丝和气生菌丝构成，后者成熟后，会分化出各种类型的孢子丝，其上产生形态，颜色各异的分生孢子，便于传播和大量繁殖。
放线菌在固体培养基上形成，与细菌不同的菌落特征，放线菌菌丝互相交错缠线形成质地致密的小菌落，干燥，不透明，难以挑取，当大量孢子覆盖于菌落表面时，就形成面为粉末状或颗粒状的典型放线菌菌落，由于基内菌丝和孢子常有颜色，使得菌落的反正面呈现出不同的色泽。
放线菌的菌落由菌丝体组成，一般圆形，光平或有许多褶皱，光学显微镜下观察，菌落类不同可分为两大类：一类是由产生大量的分枝和气生菌丝的菌种所形成的菌落，另一类菌落由不产生大量菌丝体的种类形成，如诺长氏放线菌的菌落。
第二章 复习思考题
1.试列表比较真核生物和原核生物的10个主要差别？
答：
比较项目 细胞大小 若有壁，其主要成分 线粒体 叶绿体 核糖体 DNA含量 有丝分裂 光合作用部位 生物固氮能力 繁殖方式
真核生物 较大（通常直径>2nm） 纤维素，几丁质等 有 光合自养生物中有 80S（指细胞质核糖体） 低（约5%） 有 叶绿体 无 有性，无性等多种 原核生物 较小（通常直径<2nm） 多数的为肽聚糖 无 无 70S 高（约10%） 无 细胞膜 有些有 一般无性 2.试总结酵母菌的5个特点，并列出各个特点的例处？
答：酵母菌是一个通俗名称，一般指发酵糖类的各种单细胞真菌，由于不同的酵母菌在进化和分类地位上的异源性，因此很难对酵母菌下一个确切的定义，通常认为，酵母菌具有以下5个特点：①个体一般以单细胞非菌丝状态存在。②多数营出芽繁殖。③能发酵糖类产能。④细胞壁常含甘露聚糖。⑤常生活在含糖量较高酸度较大的水生环境中。
多分布在含糖的偏酸性环境，也称为“糖菌”。如水果蔬菜，叶子，树皮等处，及葡萄园和果园土壤中等，有的酵母菌可利用烃类物质：如，假丝酵母，毕亦式酵母是正烷酵生产三羧酸的高产微生物，为石油化工开发许多崭新的工艺和生产，人类和第一种“家养微生物”酿造工业，食品工业，医药工业，饲料工业，化学工业。
3.试列表比较四大类微生物的细胞形态和菌落特征？ 答： 菌落特征 微生物类别 主 要 特 征 菌 落 含水状态 外观形态 单细胞微生物 菌丝状微生物 细菌 酵母菌 放线菌 霉菌 很湿或较湿 小而凸起或大而平坦 较湿 大而凸起 干燥或较干燥 小而紧密 干燥 大而致密 细 胞 相互 关系 形态 特征 菌落透明度 菌落与培养 单个分散或有一定排列方式 小而均匀 个别有芽孢 透明或稍透明 不结合 多样 相同 一般看不到细胞 一般很快 一般很臭 单个分散 假丝状 大而分化 稍透明 不结合 单调 相同 可见球状，卵圆状 较快 多带酒香味 丝状交织 丝状交织 细而均匀 不透明 牢固结合 十分多样 一般不同 粗而分化 不透明 较牢固结合 十分多样 一般不同 参 考 特 征 菌落颜色 菌落正反面 菌落边缘 细胞生长速度 气味 有时可见细可见粗丝状细胞 胞丝状细胞 慢 常有泥腥味 一般较快 往往有霉味
4.试列表比较细菌，放线菌，酵母菌和霉菌细胞壁成分的异同，并提出制备相应原生质体的酶或试剂？
答：细胞壁成分的异同：细菌分为G+和Gˉ，G+肽聚糖含量高，Gˉ含量低，G+磷壁酸含量较高，Gˉ而不含磷壁酸；G+类脂一般无，而Gˉ含量较大；G+不含蛋白质，Gˉ含量较高。放线菌为Gˉ，其细胞壁具有Gˉ所具有的特点。酵母菌和霉菌为真菌，酵母菌的细胞壁外层为甘露聚糖，内层为葡萄聚糖；而霉菌的细胞壁成分为几丁质，也含有纤维素。
原生质体制备方法：G+细菌原生质体获得：青霉菌，溶菌霉。Gˉ细菌原生质体获得：EDTA螯合剂处理，溶菌霉。放线菌原生质体获得：青霉素，溶菌酶。酵母菌原生质体获得：蜗牛消化酶。霉菌原生质体获得：蜗牛消化酶，纤维素酶。
5.各种属酶菌的结构和繁殖方式？
答：无隔菌丝：为长管状单细胞，细胞质内含多个核其生长表现为菌丝的延长和细胞核的增多，这是低等真菌所具有的菌丝类型。有隔菌丝：菌丝中有隔膜，被隔膜隔开的一段菌丝就是一个细胞，菌丝由多个细胞组成，每个细胞内有一至多个核，隔膜上有单孔或多孔，细胞质和细胞核可自由流通，每个细胞功能相同。营养菌丝：伸入到培养基内部，以吸收养分为主的菌丝。气生菌丝：向空中生长