蛋白层析纯化系统
FPLC：全称为快速蛋白液相色谱（Fast protein liquid chromatography） 操作流程：
1.打开全自动交流稳压器的电源
2.打开FPLC或purifier 100的电源，系统立即进行自检 3.打开电脑电源
4.双击unicon4.12图标，输入用户名和密码，进入系统窗口。?KTA层析软件有四个窗口：UNICORN Main Menu、Method Editor、System Control、Evaluation。如使用程序运行，在Method Editor窗口里编方法设置各种参数(详见注意事项)；如使用手工运行，在System Control窗口里设置各种参数。 5.接入层析柱。如需低温操作，可通冷凝水 6.注入样品，运行程序或手工运行
7.试验结束，先用水冲洗柱子，再用20%乙醇保存柱子，然后拆除柱子，不得带入气泡。取下后放回原位。保存系统及层析柱
8.关机：仔细检查完毕，确信用过的所有管道都已经充满20%乙醇后，退出?KTA层析软件各窗口，脱出UNICORN软件，关闭电脑 9.关闭系统电源 注意事项：
技术指标注意事项：
1. 报警压力参数设置：所有程序运行和手动运行中，必须首先设定报警压力（使用预装柱，编程时由软件自动设定）。压力值参阅层析柱及填料说明书，取较小的一个最大耐受压力。我们实验室的层析柱如XK16/70Superdex75、200、DEAE-FF等柱子的警报压力均为0.3MPa。Sephacryl-200、Sephacryl-300的警报压力为0.2MPa。
2.紫外灯：如果只是平衡层析柱，关闭紫外灯。FPLC通过FPLC系统主机关闭；Purifier通过软件lamp off关闭。一般在上样前或前15min打开紫外灯。 3.层析柱的连接：层析柱是玻璃的，一定要轻拿轻放。 层析柱特别是凝胶过滤柱不能有气泡进入，将柱子接入系统时，可在柱子一端接带有液体的注射器，用手推，将气泡排出，同时，给系统一定流速，保证没有气泡的情况下将柱子连入系统。如果有问题，请找管理人员。
4.缓冲液及样品：所有溶液须经过滤和脱气，缓冲液现用现抽滤，以保护系统和层析柱。已经抽滤过的溶液长时间放置后，使用前必须再重新抽滤。 如果是室温纯化，从冰箱拿出的缓冲液温度升到室温后再用，防止温差产生气泡进入系统和层析柱。
所有样品须经过滤，以保护层析柱。少量样品必须经过离心，取上清，不得带入颗粒性和不溶性物质。
5.?KTA系统的日常维护：
紫外灯：紫外灯的使用是有一定的寿命的，所以平时清洗系统及平衡层析柱时，请关闭紫外灯。?KTA FPLC的紫外灯只有单波长280nm和254nm，一般用280nm。?KTA purifier 100的紫外灯可在190nm-700nm间任选三波长，但是对于已知蛋白一般选用280nm关闭其他两个波长足够了，这样可减少摩擦，保护仪器。
pH 电极：小心处理pH电极。每天使用完后从流路中取出保存在电极保护液中。切记不可保存在水中或长时间留在流路中。
在线过滤器（On-line Filter)：如果在没接层析柱时，系统仍有一定压力，若限压器（Flow Restrictor FR-902，FR-904）没有接在流路中，（可能影响低压柱的报警设置），应检查
在位过滤器中的滤膜是否堵塞。
检查方法：拧松过滤器进口接头，若压力恢复正常，则可确认滤膜堵塞。
更换：拧开在位过滤器，取出滤膜。滤膜可以清洗后再用，若效果仍不理想，则需更换。 系统泵：每天结束时，系统可以装满缓冲液过夜；如果系统在次日使用其他缓冲液，先用抽滤过的MillQ水洗，再用所用缓冲液冲洗。如果有几天不使用，用水流动通道。拆下柱子和酸度计，连接系统，然后用20%乙醇洗系统，并保存在20%乙醇中。确保所有的管和流动通道经过冲洗。
泵和系统清洗：使用前：依次用水，缓冲液；使用后：依次用水，20%乙醇。系统管路包括上样环全部保存在20%乙醇溶液中。 入口筛网：它有一定的过滤作用和防止丝状和颗粒性进入系统的作用，使用时不能私自拆除入口筛网。
仪器使用注意事项：
1.经培训后考核合格的人员才能独立上机使用?KTA层析系统，并严格按操作规程使用仪器。其他人员应在管理人员的指导下进行操作，否则造成仪器损坏、影响机器运行和层析柱性能的人员，要酌情严肃处理。
2.所有使用?KTA层析系统的人员请提前一天预约，并认真填写使用预约登记表。
3.实验完成后，请认真填写使用记录，记录内容应完整、规范。并经管理人员验收，确认仪器、层析柱等是否完好。
4.实验完成后，请大家一定要及时清理自己所用物品，打扫卫生，包括擦洗仪器、桌面、地面等。
5.实验完成后，对于两次以上不及时清理自己所用物品的人员，暂停使用仪器。 6.使用前、后请认真阅读??KTA层析系统的保护?，检测是否做到了以上几点。 7.为了使大家的实验顺利进行，请严格按规定进行