土壤碱解氮的测定
碱解扩散法
（1）仪器：50套扩散皿，恒温箱，1个半微量酸式滴定管，1个玻璃棒，1支2ml移液管，1支10ml移液管. （2）试剂：
① 1.8mol/L氢氧化钠溶液；
称取化学纯氢氧化钠72克，用水溶解后冷却定容到1L ② 2%硼酸溶液（W/V）；
称10克硼酸用约60度热蒸馏水溶解，冷却稀释到500ml，最后用稀释盐酸或NaOH调节pH至4.5（定氮混合指示剂显淡红色） ③ 定氮混合指示剂；分别称取0.1克甲基红和0.5克溴甲酚绿指示剂，放入玛瑙研体，并
用100ml95%酒精溶解。此液应用稀盐酸或稀氢氧化钠，调解pH至4.5。 ④ 0.01mol/L盐酸标准溶液：量取0.85ml浓盐酸稀释到1L。 ⑤ 特制碱性胶液；
加40克阿拉伯胶和50毫升水于烧杯中，温热至70-80℃搅拌促溶，冷却约1小时，加入20毫升甘油和30毫升饱和K2CO3水溶液，搅匀放冷，离心除去泡沫及不溶物，将清液贮于玻璃瓶中备用。 ⑥ 硫酸亚铁粉。分析纯。空气中易氧化，需看清颜色。 （3）操作步骤
① 称土，加还原剂：称取过100目风干土样2克和1克硫酸亚铁，均匀铺在扩散皿外室中，水平轻轻旋转扩散皿，使样品均匀铺平，切忌土样飞入扩散皿内室。
② 加吸收剂-加碱-封闭：在扩散皿内室中加入2ml2%硼酸溶液，并滴加1滴定氮混合指示剂，然后再扩散皿的外室边缘涂上特制碱性胶液，胶液不宜涂得过多，但要涂匀，然后盖上毛玻璃，并旋转数次，使毛玻璃与皿边缘完全粘合，无气泡，以防漏气，再慢慢转开毛玻璃的一边，使扩散皿露出一条狭缝，迅速加入1.8mol/L氢氧化钠溶液10ml于皿的外室中，立即用毛玻璃盖严。加氢氧化钠时应防止溅在内室边缘或毛玻璃盖上，以免影响测定结果。
③ 放入恒温箱：水平的轻轻旋转扩散皿，使溶液与土壤充分混匀，用橡皮筋固定，随后放入40度恒温箱中，24小时后取出。
④ 滴定：取出扩散皿，用0.01mol/L盐酸标准溶液，半微量滴定管滴定内室硼酸中所吸收的氨量，由蓝色到微红色为终点，记下盐酸用量。
⑤ 空白试验：要做空白试验，方法同上，只是不加土样。 （4）结果计算
碱解氮含量(mg/kg)=C×（V-V0）×14×103/M 式中：C-0.01mol/L盐酸标准液的浓度(mol/L) V-样品滴定时用去标准液的体积（ml） V0-空白滴定时用去标准液的体积 14-氮原子的摩尔质量（g/mol）
103-换算系数 M-样品质量 注意事项：
1.特制碱性溶胶必须先溶解再混合，否则会结块。2. 36%～38%浓盐酸是12mol/L
3.注意扩散皿一定要刷干净，尤其是内室，否则一加硼酸，就会立刻变成蓝色。如变成蓝色，则需重新做。
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土壤速效磷的测定
钼锑抗比色法
（1）仪器：塑料杯，往复式震荡机，分光光度计 （2）试剂
① 0.03mol/L氟化铵-0.025mol/L盐酸浸提剂
称取1.11g氟化铵溶于800ml水中，加1mol/L盐酸（42ml浓盐酸溶于500ml水中）25ml，然后稀释至1L，贮于塑料瓶中。 ② 钼锑抗试剂
称取酒石酸锑钾(KSbOC4H4O6)0.5克，溶于100毫升水中，制成0.5％的溶液。 另称取钼酸铵20克溶于450毫升水中徐徐加入208.3毫升浓硫酸，边加边搅动，再将0.5％的酒石酸锑钾溶液100毫升加入到钼酸铵液中，最后加至1升，充分摇匀，贮于棕色瓶中，此为钼锑混合液。
临用前(当天)称取1.5克左旋抗坏血酸溶液于100毫升钼锑混合液中，混匀。此即钼锑抗试剂。(有效期24小时，如贮于冰箱中，则有效期较长。 ③ 0.8M H3BO3
4.95g硼酸定容至100ml即可。 ④ 磷标准溶液
称取0.439gKH2PO4(105℃烘2h)溶于200ml水中，加入5ml浓H2SO4，转入1L容量瓶中，用水定容，此为100mg/L磷标准液，可较长时间保存。取此溶液稀释20倍即为5 mg/L磷标准液，此液不宜久存。 （3）操作步骤 ① 称取通过1毫米筛孔的风干土样品5g(精确到0.01g)于150ml塑料杯中，加入0.03molL-1NH4F-0.025 molL-1HCl浸提剂50ml，在20-30℃条件下振荡30min，取出后立即用干燥漏斗和无磷滤纸过滤于塑料杯中，同时作试剂空白试验。 ② 吸取滤液10ml于50ml容量瓶中，加入10ml0.8M H3BO3，再加入二硝基酚指示剂2滴，用稀HCl和Na0H液调节pH至待测液呈微黄，用钼锑抗试剂5ml显色，并用蒸馏水定容，摇匀，在室温高于15℃的条件下放置30分钟，用红色滤光片或660nm波长的光进行比色，以空白溶液的透光率为100（即光密度为0），读出测定液的光密度，在标准曲线上查出显色液的磷浓度（mgkg-1）。 ③ 标准曲线制备： 吸取含磷（P）5mg/L的标准溶液0、1、2、3、4、5、6ml，分别加入50ml容量瓶中，加入10ml0.8M H3BO3，再加入二硝基酚指示剂2滴，用稀HCl和Na0H液调节pH至待测液呈微黄，再加入钼锑抗显色剂5ml，摇匀，定容即得0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mg/L磷标准系列溶液，与待测溶液同时比色，读取吸收值，在方格座标纸上以吸收值为纵座标，磷mg/L数为横座标，绘制成标准曲线。 (4) 结果计算
速效磷含量（mg/kg）=显色液P浓度×显色液体积×分取倍数/样品重
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土壤速效钾测定
醋酸铵—火焰光度计法
（1）试剂
① 中性1.0mol/LNH4OAc溶液
称77.08gNH4OAc溶于近1升水中，用稀HOAc或NH4OH调节至pH7.0, 用水定容至1L。
② K标准溶液
称取0.1907克KCl溶于1mol/LNH4OAc溶液中，完全溶解后用1mol/LNH4OAc溶液定容至1L，即为含100ug/mlK的NH4OAc溶液。用时分别吸取此100ug/mLK标准液0，2，5，10，20，40ml放入100ml容量瓶中，用1mol/LNH4OAc定容，即得0，2，5，10，20，40ug/mLK标准系列溶液。 （2）操作步骤
称取风干土样(1mm孔径)5g于150ml三角瓶中，加1mol/LNH4OAc溶液50.0ml(土液比为1：10)，用橡皮塞塞紧，在20-25℃下振荡30min用干滤纸过滤，滤液与钾标准系列溶液一起在火焰光度计上进行测定，绘制成曲线，根据待测液的读数值查出相对应的ug/mL数，并计算出土壤中速效钾的含量。 （3）结果计算
土壤速效钾(K)ug/kg=待测液ug/mL×加入浸提剂毫升数/风干土重。
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土壤中铵态氮及硝态氮的测定
土壤氨态氮的测定（扩散比色法）
（1）试剂
1mol/LNaOH、2 mol/LKCL、0.05 mol/L H2SO4(浓硫酸为18M)、40﹪NaOH、奈氏试剂（溶解HgI245.0g和KI35.0g于水中，将此溶液洗入1000ml容量瓶中，加入KOH 112g，加水至800ml，摇匀，冷却定容，装入棕色瓶中备用）、100ug/mlN（NH4+-N）标准液（称取烘干NH4Cl0.3817g溶于水中，定容为1000ml，此为100ug/mlN（NH4+-N）贮备液。用时吸上述溶液50ml，稀释至500ml，即为10ug/mlN（NH4+-N）工作液）
（2）操作步骤
称取土样10.0g，放入100ml三角瓶中，加2 mol/LKCL溶液50.0ml, 用橡皮塞塞紧，振荡30分钟，立即过滤于50ml三角瓶中（如土壤NH4+-N含量低，可将土液比改为1:25）。用吸管吸取2ml滤液加入扩散皿外室，中心小室加入2ml0.05 mol/L H2SO4溶液。然后在皿盖边沿涂以阿拉伯胶，盖上皿盖，留一小孔，迅速由小孔用滴管加入0.5-1ml40﹪NaOH溶液。立即将皿盖盖严并摇匀，并用橡皮筋扎好。置于40℃恒温箱放置4小时，取出。取下皿盖上的橡皮筋，轻轻除去皿盖。中心小室溶液用10ml蒸馏水，分四次转移至25ml容量瓶中。加入0.8ml奈氏试剂，摇匀。缓慢地加入4ml 1mol/LNaOH，显色后稀释至刻度，放置10分钟。在分光光度计上，波长460nm处进行比色。根据标准曲线，求出NH4+-N量。
标准曲线的绘制：分别吸取0、2.5、5.0、7.5、10.0 ml氮的标准溶液于25ml容量瓶中，用水稀释至10ml，加入0.8ml奈氏试剂，摇匀。缓慢地加入4ml 1mol.L-1NaOH，显色后稀释至刻度。10min后，在分光光度计上，波长460nm处进行比色。以吸光值为纵坐标，以浓度为横坐标，绘制标准曲线。
结果计算： NH4+－N（mg/kg）=显色液ppm×比色体积× 分取倍数/样重
土壤硝态氮的测定（酚二磺酸比色法）
试剂：酚二磺酸试剂（25.0g白色苯酚（C6H5OH）在500ml烧杯中，加入225ml浓H2SO4，混匀，置于沸水浴中加热6h，再置于密闭的棕色瓶中。如试剂析出结晶，同时须加热溶解，但切不可加水。）、10ppm NO3-N标准液（0.722g干燥的KNO3（二级）溶于水，定容1L，此液为100ppm NO3-N溶液。将此液准确稀释10倍，即为10ppm NO3-N标准溶液。）、氨水、CaSO4.2H2O、CaCO3。
操作步骤：称50.0克新鲜土样放在500毫升三角瓶中，加0.5gCaSO4.2H2O和250ml水，塞后振荡10min。放置几分钟后，将悬浮液的上部清液用干滤纸过滤。吸取清液25ml于蒸发皿中，加约0.05gCaCO3，在水浴上蒸干、（如有色，可用水湿润，加10%H2O2消除），蒸干后不应继续加热，冷却，并迅速加入2ml酚二磺酸试剂，将皿旋转 ，使试剂接触所有蒸干物，静置10min，加水20ml，用玻璃棒搅拌，使蒸干物完全溶解。冷却后，渐渐加入1:1NH4OH，并不断搅拌，溶液呈微碱性（黄色），再多加2ml，然后将溶解液定量地移入100毫升容量瓶中，加水定溶，在分光光度计上用光径1毫米比色槽进行比色，波长为420纳米（nm），以空白溶液调节仪器零点。
标准曲线的绘制：分别取10ppm NO3-N标准液：0、1、2、5、10、15、20ml于蒸发皿中，在水浴上蒸干，与待测液相同操作，进行显色和比色，绘制工作曲线。 结果计算： NO3-N（mg/kg）=显色液ppm×比色体积× 分取倍数/样重
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土壤有机质的测定
重铬酸钾容量法-稀释热法
(1) 主要仪器
锥形瓶、试管、电炉、微量滴定管、酸式滴定管 （2）试剂
① 重铬酸钾-浓硫酸溶液
称取重铬酸钾3.923g，配成100ml溶液。另取100ml98%浓硫酸，缓缓加入重铬酸钾溶液中，以防急剧升温。此溶液浓度可认为c（1/6K2Cr2O7）=0.4mol/L ② 重铬酸钾标准溶液
称取重铬酸钾0.4904g（130℃烘1.5h），配成100ml溶液，此溶液浓度c（1/6K2Cr2O7）=0.1mol/L
③ 硫酸亚铁标准溶液（0.2M）
称取硫酸亚铁5.6g，先加入70ml左右的蒸馏水溶解，再加入2ml浓硫酸，搅拌均匀后，加水定容至100ml。此溶液易受空气氧化，使用时必须标定一次准确浓度。 ④ 邻菲啰啉指示剂
称取邻菲啰啉1.49g，溶于含有0.7g硫酸亚铁的100ml水溶液中。此指示剂易变质，应密闭保存于棕色瓶中备用。 （3）操作步骤
① 硫酸亚铁标准溶液浓度的测定
取重铬酸钾标准溶液2ml，置于50ml锥形瓶中，加浓硫酸2-3ml，邻菲啰啉指示剂3-5滴，用硫酸亚铁溶液滴定，计算硫酸亚铁标准溶液的浓度
C2=c1×v1/v2
C2 硫酸亚铁标准液的浓度，c1 重铬酸钾标准液的浓度；v1 重铬酸钾标准液的体积；v2 硫酸亚铁标准液的体积 ② 有机质含量的测定
准确称取风干土样0.2g，置于10ml干燥试管中，然后准确加入重铬酸钾-浓硫酸溶液5ml，混匀。另取重铬酸钾-浓硫酸溶液5ml置于干燥试管中，作空白样。
将上述试管置于已加热至180℃的硅油浴中，消煮8min，取出冷却。
将试管内液体移至50ml锥形瓶中，润洗试管2-3次，将润洗液也移至锥形瓶中，总体积不宜超过30ml，加2-3滴邻菲啰啉指示剂，使用硫酸亚铁标准溶液滴定。变色过程由黄绿色变为蓝绿色，再变为棕红色，即达终点，过量不足半滴即有明显变色。 （4）结果计算
土壤有机碳（g/kg）=c2（V0-V）×10×3×1.33×1000/样品重 土壤有机质（g/kg）=土壤有机碳×1.724
式中：1.33为氧化校正系数；c2为硫酸亚铁标准溶液的浓度
-3
10