尿红细胞位相检验操作规程
仅供参考
1. 实验原理
尿红细胞位相检查是利用位相显微镜检查尿中红细胞形态的一种方法,其临床意义在于根据尿红细胞形态鉴别血尿的来源。推测血尿是肾小球性或非肾小球性。一般认为,红细胞通过肾小球基底膜时受损和经肾小球毛细血管壁漏出时受挤压而变形,同时还与尿渗透压（550-1100moson/kg.H2O）、PH（4.5-8.0）等因素有关。如尿中发现畸形红细胞(其大小，形态呈多型性，血红蛋白含量异常)占70%以上，且红细胞数≥8/ul者，可诊断为肾小球性血尿。芽孢样红细胞、靶形红细胞的出现更具有临床诊断价值。＜8个/ul因无意义可不做分类。 2. 标本采集 留取浓缩的二次晨尿效果高于晨尿和随机尿，半小时内送检。嘱咐患者留尿前少饮水。
3. 标本储存：室温储存，2小时内完成检验。 4. 标本运输：室温运输。
5. 标本拒收标准：经血，白带，精液，粪便污染标本不能作测定。 6. 仪器设备
6.1 仪器名称：显微镜 离心机 牛鲍氏计数板
6.2 仪器厂家：日本奥林巴斯 北京时代北利离心机有限公司 6.3 仪器型号：OLYMPUS31 TD5-2 7. 操作步骤：
1、锥形管取尿10ml，低速1000-1500/min离心5min，留取0.5ml沉渣，红细胞数量大时无需离心，显微镜高倍镜检，分类200-100个红细胞。
在显微镜的高倍镜下观察及计数中间大方格中五个中方格里的红细胞数及畸形红细胞（分肾性和非肾性畸形）和正形红细胞数 2、计数：
2.1、离心标本：红细胞总数＝五个中方格总数*5*10*1000/20＝五个中方格红细胞总数*2500
2.2、未离心标本：红细胞总数＝五个中方格总数*5*10*1000 8.分类标准：
8.1 畸形红细胞分类标准：根据红细胞大小不等,形态异常多样,归为以下5种: ①G1型:炸面包圈样，有芽孢。可呈大小不等，胞膜破坏，形成炸面包圈、球形、口形、花环形、戒指形＞5%为肾小球性血尿。 ②G2型:呈球形，有芽孢。呈小球形、小口形、小环状 ③G3型:炸面包圈样，表面凹凸。呈面包圈样、靶形 ④G4型:呈酵母样。呈花环形或细胞表面有颗粒样沉积
⑤G5型:明显缩小，脱落的芽孢。形态不规则、破碎、裂形以及脱落的芽胞、细胞碎片等
8.2 均一型红细胞标准：基本分为5型 ① N1型：基本正常。
② N2型：正常大小球形，表面光滑。 ③ N3型：扁平肿胀，直径较大。 ④ N4型：双凹较深/轮胎样
⑤ N5型：扁平或球形，表面多棘突。 8.3 混合型红细胞标准
根据畸形和均一型红细胞所占比例的不同,可分为畸形为主的混合型红细胞血尿（畸形红细胞>50%）和以均一型红细胞为主的混合型红细胞血尿（均一型红细胞所占>50%）两种。畸形红细胞不等同于变形红细胞。 9.判定标准:
尿红细胞计数正常值：<8个/ul 。
畸形红细胞占70%以上或芽孢样红细胞＞5%为肾小球性血尿，畸形红细胞比率包含芽孢样红细胞;畸形红细胞<20%,均一型红细胞>80%以上为非肾小球性血尿;畸形红细胞>20%、正常红细胞<80%,为混合型血尿。 10. 质量控制：不同操作人员之间差异<10% 11. 参考范围：RBC<8个/ul 。
12. 临床意义：血尿分为肾小球性血尿及非肾小球性血尿两大类。肾小球性血尿指血尿来源于肾小球，常见于各种原发性肾小球疾病，如急性、慢性及迁延性肾小球肾炎、急进性肾炎、肾病综合征、lgA肾病；继发性肾小球疾病.如系统性红斑狼疮、紫癜性肾炎、乙型肝炎相关性肾炎；遗传性肾小球疾病，如遗传性肾炎(Alport 综合征)、薄基膜肾病(家族性良性血尿)；剧烈运动后一过性血尿等。
非肾小球性血尿常来源于肾小球以下泌尿系统,如泌尿道急性或慢性感染；肾盂、输尿管、膀胱结石；结核；特发性高钙尿症;特发性肾出血(左肾静脉受压综合征)；先天性尿路畸形如肾囊肿、积水、膀胱憩室；先天性肾血管畸形如动静脉瘘、血管瘤；药物所致肾及膀胱损伤，如环磷酰胺、磺胺、庆大霉素；肿瘤、外伤及异物；肾静脉血栓以及全身性疾病引起的出血，如血小板减少性紫癜、血友病等。
如果是肾盏、肾盂、输尿管、膀胱或尿道出血,即非肾小球性血尿，在等张或高张尿中，其红细胞的形态，大小绝大多数是正常的，仅小部分为畸形红细胞。某些肾小球疾病可出现混合性或均一性血尿，这是由于出现了肾小管间质病变，肾小管内不能形成正常的渗透梯度，由这部位肾单位来的红细胞就不会变形。当存在较为广泛的肾小管间质损害时，红细胞形态即可成为均一性的。
鉴于上述原因，应用红细胞位相检查来鉴别血尿来源时，必须同时考虑肾小球及肾小管间质病变情况。在无肾活检的条件下，可结合渗透分子清除率(CoSM)综合判断，因为CoSM反映了肾小管间质病变的程度。一般认为，正常人尿中有红细胞者约4%，其中红细胞数即500一5000/毫升，多为正常红
细胞。如尿中发现畸形红细胞(其大小，形态呈多形性,血红蛋白含量异常)占70%以上,且红细胞数≥8000/毫升者，可诊断为肾小球性血尿。
13. 操作性能：快速简便，此诊断标准的灵敏度为90. 9%, 特异度为96. 8%。 14. 方法局限性：
14.1目前对肾性血尿和非肾性血尿无统一标准。
14.2标本放置时间，标本是否新鲜，标本的渗透压等因素对结果影响较大。 15. 注意事项：
在识别尿红细胞形态时，还应该注意：
15.1、单纯尿pH、渗透压的变化也可引起尿红细胞畸形，但此时尿畸形红细胞为单一形态。尿红细胞在酸性尿液中肿胀呈现球状、口形；在碱性尿液中血红蛋白溶解丢失呈现锯齿性、影形；尿红细胞在高渗环境下细胞浆粘滞性增加、顺应性下降，呈皱缩形；在低渗环境中细胞表面积与体积比上升，滤过阻力下降，稀释的血红蛋白漏出细胞外而呈现环形、戒形。因此，尿中畸形红细胞增多、但形态单一不能诊断肾小球性血尿；肾小球性血尿的特征是尿中出现多种形态的畸形红细胞，且畸形红细胞数目明显增多
15.2、与真菌孢子形态鉴别，必要时可做破碎试验鉴别：取尿液沉渣，加1%皂素溶液1滴，混匀，数分钟后镜检，如为红细胞，则红细胞完全破碎消失，如为真菌孢子，则仍呈完整形态。
15.3、标本一定要新鲜尿，若不新鲜可出现体外红细胞溶解，血红蛋白漏出等，影响判断。
15.4、尿畸形红细胞不只出现于肾小球性疾病，健康人尿中的红细胞均为畸形红细胞，但其数量小于5×106/L.因此，肾小球性血尿诊断的前提条件是尿红细胞数量大于8×106/L.此外，尿路感染患者尿红细胞体积分布曲线也可呈现肾小球性分布
15.5、在严重的肾功能衰竭患者，由于肾小管内渗透压梯度的丧失和肾小球基底膜的严重破坏，尿红细胞可为正常形态 15.6、密切与临床结合：作出合理诊断
16. 当检验系统（仪器）不能工作时，所采取的补救措施：设备均有备用，有故障启用备用设备。
17参考文献：
17.1. 章友康. 肾小球病概述. 见: 叶任高. 内科学. 第5 版. 北京: 人民卫生出版社, 1999. 518- 522.
17.2. 谢春, 叶任高, 李幼姬. 血尿定位诊断的系列研究. 中山医科大学学报, 1996, 17( 2) : 81- 85.
17.3. 叶任高, 刘冠贤. 临床肾脏病学. 北京: 人民卫生出版社,1997. 31- 35. 17.4. 叶任高. 中西医结合肾脏病学. 北京: 人民卫生出版社,2003. 97- 100. 17.5. 叶任高, 梁萌. 血尿的诊断. 新医学, 1991, 22( 10) : 508-510.
17.6. 凌衫洪, 叶任高, 董秀清, 等. 新的尿红细胞分类计算法鉴别血尿来源. 中华内科杂志, 1994, 33( 4) : 255- 258.
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