蛙心搏的观察与描记期外收缩与代偿间歇和蛙类离体心脏灌流
实验日期：5月7号 室温： 28℃ 一、实验对象与实验材料
1. 蛙 3只
2. 常规手术器械、蛙板、蛙心夹、毁髓针、棉球、滴管、纱布、棉线、任氏液、小烧杯（或培养皿）、污物缸 3. 秒表（手机秒表）、两个针头（针灸针）、双针形露丝刺激电极、张力换能器、支架、滑轮、双凹夹、PowerLab生理实验系统、蛙心插管（斯氏套管）、套管夹
4. 0.65%NaCl溶液，5%NaCl溶液，2êCl2溶液，1%KCl溶液，1:5000肾上腺素，1:10000乙酰胆碱溶液，300U/ml肝素溶液
二、实验方法与步骤 (一）蛙的心搏观察
1. 双毁髓，暴露蛙心脏：小心剪去心包膜。 2. 观察蛙心脏结构
3. 观察心搏过程，记录正常心跳次数
4. 斯氏第一结扎，观察记录静脉窦、心房和心室 5. 斯氏第二结扎，观察记录静脉窦、心房和心室
6. 重复步骤1制备另一个蛙心暴露，用于下面的心搏曲线实验 （二）蛙的心搏曲线与心电图记录
1. 连接实验装置：PowerLab刺激输出线接双针形刺激电极，张力换能器接通道2，通道3生物电输入线接针形电极
2. 用蛙心夹轻夹心尖连接张力换能器，可用滑轮，棉线适当延长点，角度放低
3. 开机，打开chart软件，分别设置ch2和ch3放大参数，设置刺激为单脉冲。
4. 针形电极插入蛙上下肢皮肤，连接通道3 5. 观察正常的蛙心搏曲线和心电图记录
（三）期外收缩与代偿间歇实验
1. 在方法二的基础上，将刺激电极放到心室部位，注意尽量不影响心脏的收缩舒张
2. 分别在心室的收缩期，舒张早期、中期和晚期给予适当强度单脉冲（阈上刺激），观察期外收缩和代偿间歇的发生。 3. 保存数据
4. 进入方法四，制备蛙的离体心脏灌流装置 （四）蛙离体心脏灌流装置
1. 双毁髓，暴露蛙的心脏，分辨连接蛙心脏的血管：动脉圆锥、左主动脉和
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右主动脉，静脉与静脉窦
2. 用斯氏蛙心插管法制备离体蛙心。 （五）离体心脏灌流实验项目
1. 记录正常心搏曲线，准备好加药标记，以下实验过程中保持chart连续不停的记录
2. 滴加0.65%NaCl溶液并标记，观察到心搏明显变化后，吸去套管内溶液并同时做冲洗标记，用新鲜的任氏液清洗2~3次，待心搏曲线恢复正常。注意，换液时切勿碰套管，保持灌流液面一致。（以下实验同）。保持Chart连续采样直到实验结束。 3. 滴加5%NaCl2~6滴
4.滴加2êCl2溶液1~3滴实验 5.滴加1%KCl溶液1~2滴实验
6.滴加1~2滴肾上腺素溶液（1:5000）实验 7.滴加1~2滴 1:10000乙酰胆碱溶液实验
8.实验结束，保存数据，回放记录，卸下实验装置，清理仪器、桌面卫生，并关PowerLab和电脑电源
三、实验结果：
（1） 蛙心搏的观察与描记
表1.斯氏结扎记录表
频率/次*min-1 静脉窦 60 60 60 心房 55 42 42 心室 55 42 37 实验项目 对照 第一结扎 第二结扎 实行斯丹尼氏第一结扎后，静脉窦收缩的频率为60次·min-1，而心房和心室的收缩频率相同均为42次·min-1；实行斯丹尼氏第二结扎后，静脉窦收缩的频率为60次·min-1，心房的收缩频率为42次·min-1，心室的收缩频率为37次·min-1。
（2） 期外收缩与代偿间歇的观测
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文件10.62002-01-01 0:25:51.4370.4通道2 (mV)0.20.05:095:105:115:125:135:145:155:165:175:185:195:205:215:225:23 图一、 刺激收缩期及舒张期早期蛙心室肌的期外收缩及代偿间歇
期外收文件1缩 0.62002-01-01 0:25:51.437代偿间隙 0.40.2通道2 (mV)-0.0-0.2-0.48:408:418:428:438:448:458:468:478:488:49 图二、刺激舒张期中期蛙心室肌的期外收缩及代偿间歇
文件10.62002-01-01 0:25:51.4370.4通道2 (mV)0.20.07:287:297:307:317:327:337:347:357:367:377:387:397:407:41 图三、刺激舒张期后期蛙心室肌的期外收缩及代偿间歇
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（3） 蛙类斯氏离体心脏灌流
文件10.32002-01-01 2:18:26.9680.20.1通道2 (mV)-0.0-0.1-0.2-0.31012141618202224 图四、正常的蛙心搏曲线
文件10.32002-01-01 2:18:26.9680.20.1通道2 (mV)-0.0-0.1-0.23:053:103:153:203:25 图五、5%NaCl2对蛙离体心脏活动的影响
092002-01-01 2:18:26.9680.20.1通道2 (mV)-0.0-0.1-0.26:426:446:466:486:506:526:546:566:587:00 图六、肾上腺素对蛙离体心脏活动的影响
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092002-01-01 2:18:26.9680.20.1通道2 (mV)-0.0-0.1-0.210:3210:3410:3610:3810:4010:4210:4410:4610:4810:5010:5210:54 图七、2êCl2对蛙离体心脏活动的影响
090.32002-01-01 2:18:26.9680.20.1通道2 (mV)-0.0-0.1-0.223:0423:0623:0823:1023:1223:1423:1623:1823:2023:2223:2423:26图八、1%KCl对蛙离体心脏活动的影响
四、分析讨论：
(1)关于蛙心搏过程的分析:
①斯氏第一次结扎：实验过程中观察到房室沟结扎后，静脉窦的收缩基本不变，心室先停止收缩，隔一段时间之后又恢复收缩，但收缩的频率比原来为慢。其主要原因是从静脉窦传导至心房、心室的电信号被阻断，分离了静脉窦与心房、心室之间的传递。心脏的自律性完全靠静脉窦来提供，如果截断静脉窦与心脏之间的传递，因为静脉窦对异位起博点有超速抑制作用，所以心脏会停止跳动一段时间。而后房室交界处开始搏动，因为房室交界的自动频率与比静脉窦的频率慢，所以心房、心室的跳动减慢。由于心房节律高于心室，因此心室的节律服从于心房的节律。
②斯氏第二次结扎：实验过程中观察到斯氏第二次结扎后，静脉窦的收缩基本不变，心室先停止收缩，隔一段时间之后又恢复收缩，但收缩的频率极慢。而心房的收缩节律与第一结扎基本相同。其主要
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