广西师范大学化学化工学院
药物分析实验
目 录
实验一 葡萄糖中一般杂质检查 --------------------------- 1 实验一附录 ---------------------------------------------- 5 实验二 葡萄糖注射液分析 ------------------------------ 15 实验二附录 --------------------------------------------- 17 实验三 异烟肼的溴酸钾法含量测定 ---------------------- 20 实验三附录 --------------------------------------------- 22 实验四 双波长分光光度法测定复方制剂含量 -------------- 25 实验四附录 --------------------------------------------- 27 实验五 维生素C制剂的含量测定 ------------------------ 29 实验五附录 --------------------------------------------- 31 实验六 阿司匹林片的质量分析 -------------------------- 32 实验六附录 --------------------------------------------- 34
实验一 葡萄糖中一般杂质检查
一、目的要求
1. 掌握药物的一般杂质检查原理与实验方法。 2. 掌握杂质限度试验的概念及计算方法。 3. 熟悉一般杂质检查项目与意义。 二、主要仪器与试剂
50mL纳氏比色管，古蔡氏法测砷装置，电子天平，刻度吸管，碘量瓶，铂坩埚，瓷皿，比浊用玻璃管，水浴锅，回流冷凝管，伞棚灯（照度为1000lx）、恒温减压干燥器、烘箱、马福炉 1. 葡萄糖原料药
2. 酚酞指示液（参见实验一附录1） 3. 氢氧化钠滴定液 0.02mol/L
4. 浊度标准贮备液（参见实验一附录15） 5. 浊度标准原液（参见实验一附录15）
6. 1号浊度标准液（参见实验一附录15，学生临用时制备） 7. 比色用重铬酸钾液（参见实验一附录3） 8. 比色用硫酸铜液（参见实验一附录4） 9. 比色用氯化钴液（参见实验一附录5） 10. 乙醇 90%
11. 稀硝酸（取硝酸105mL，加水稀释至1000mL） 12. 标准氯化钠溶液（参见实验一附录6） 13. 硝酸银试液 0.1mol/L， 16.99g →1000mL 14. 碘试液 0.05mol/L，6.35g→1000mL
15. 稀盐酸，取盐酸234mL，加水稀释至1000mL 16. 标准硫酸钾溶液（参见实验一附录13） 17. 氯化钡溶液 25%
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18. 磺基水杨酸溶液（1→5） 19. 硫酸 20. 硝酸 21. 盐酸
22. 硫氰酸铵溶液（30→100）
23. 标准铁溶液（储备液，参见实验一附录14） 24. 标准铅溶液（储备液，参见实验一附录25） 25. 醋酸盐缓冲液（pH3.5） 26. 稀焦糖溶液(参见实验一附录15) 27. 硫代乙酰胺试液(参见实验一附录18) 28. 溴化钾溴试液(参见实验一附录16)
29. 标准砷溶液（每1mL相当于1μg的As，参见实验一附录26） 30. 碘化钾试液(参见实验一附录19) 31. 酸性氯化亚锡试液(参见实验一附录17) 32. 锌粒 33. 溴化汞试纸 34. 醋酸铅棉花 三、实验方法、步骤
葡萄糖 （Glucose）
(C6H12O6·H2 O 198.17)
1. 酸度 取本品2.0g，加水20mL溶解后，加酚酞指示液3滴与氢氧化钠滴定液（0.02mol/L）0.20mL，应显粉红色。
2. 溶液的澄清度与颜色 取本品5g，加热水溶解后，放冷，用水稀释至10mL，溶
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液应澄清无色；如显浑浊，与1号浊度标准液（中国药典2005年版二部附录Ⅸ B）比较，不得更浓；如显色，与对照液（取比色用氯化钴液3mL、比色用重铬酸钾液3mL与比色用硫酸铜液6mL，加水稀释成50mL）1.0mL加水稀释至10mL比较，不得更深。
3. 乙醇溶液的澄清度 取本品1.0g，加90%乙醇30mL，置水浴上加热回流约10min，溶液应澄清。
4. 氯化物 取本品0.6g，加水溶解使成25mL，再加稀硝酸10mL；溶液如不澄清，应滤过；置50mL纳氏比色管中，加水使成约40mL，摇匀，即得供试溶液。另取标准氯化钠溶液6.0mL，置50mL纳氏比色管中，加稀硝酸10mL，加水使成40mL，摇匀，即得对照溶液。于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液1.0mL，用水稀释，使成50mL，摇匀，在暗处放置5分钟，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察、比较（中国药典2005年版二部附录Ⅷ A）。供试溶液所显浑浊度不得较对照液更浓（0.01%）。
5. 硫酸盐 取本品2.0g，加水溶解使成约40mL；溶液如不澄清，应滤过；置50mL纳氏比色管中，加稀盐酸2mL，摇匀，即得供试溶液。另取标准硫酸钾溶液2.0mL，置50mL纳氏比色管中，加水使成约40mL，加稀盐酸2mL，摇匀，即得对照溶液。于供试溶液与对照溶液中，分别加入25%氯化钡溶液5mL，用水稀释至50mL，充分摇匀，放置10分钟，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察、比较（中国药典2005年版二部附录Ⅷ B）。供试溶液所显浑浊度不得较对照液更浓（0.01%）。 6. 亚硫酸盐与可溶性淀粉 取本品1.0g，加水10mL溶解后，加碘试液1滴，应即显黄色。
7. 干燥失重 取本品，在105℃干燥至恒重，减失重量不得过9.5%（中国药典2005年版二部附录Ⅷ L）。
8. 炽灼残渣 不得过0.1%（中国药典2005年版二部附录Ⅷ N）。
9. 蛋白质 取本品1.0g，加水10mL溶解后，加磺基水杨酸溶液（1→5）3mL，不得发生沉淀。
10. 铁盐 取本品2.0g，加水20mL溶解后，加硝酸3滴，缓缓煮沸5分钟，放冷，加水稀释使成45mL，加硫氰酸铵溶液（30→100）3mL，摇匀，如显色，与标准铁
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溶液2.0mL用同一方法制成的对照液比较，不得更深（0.001%）。
11. 重金属 取25mL纳氏比色管两支，甲管中加标准铅溶液一定量(2mL)与醋酸盐缓冲液（pH3.5）2mL后，加水稀释成25mL。取本品4.0g，置乙管中，加水适量溶解后，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2mL，加水使成25mL；若供试液带颜色，可在甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液，使之与乙管颜色一致。再在甲乙两管中分别加硫代乙酰胺试液各2mL，摇匀，放置2分钟，同置白纸上，自上向下透视，乙管中显出的颜色与甲管比较，不得更深（中国药典2005年版二部附录Ⅷ H 第一法），含重金属不得过百万分之五。
12. 砷盐 取本品2.0g，加水5mL溶解后，加稀硫酸5mL与溴化钾溴试液0.5mL，置水浴上加热约20分钟，使保持稍过量的溴存在，必要时，再补加溴化钾溴试液适量，并随时补充蒸散的水分，放冷，加盐酸5mL与水适量使成28mL，置测砷瓶中，作为供试溶液。另精密量取标准砷溶液2mL，照供试品制备项下方法，自“加水5mL溶解后”起，至“置测砷瓶中”，同法处理，作为标准液。 取供试溶液和标准液分别进行以下操作：加碘化钾试液5mL与酸性氯化亚锡试液5滴，在室温放置10min后，加锌粒2g，立即将装妥的导气管密塞于测砷瓶上，并将测砷瓶置25~40℃水浴中，反应45min，取出溴化汞试纸，比较。供试溶液生成的砷斑与标准砷斑比较（中国药典2005年版二部附录Ⅷ J 第一法），不得更深（0.0001%）。 四、注意事项
1．比色管的正确使用——选择配对的两支纳氏比色管，用清洁液荡洗除去污物，再用水冲洗干净。采用旋摇的方法使管内液体混合均匀。
2．正确选用量具——根据检查试验一般允许误差为±10%的要求和药品、试剂的取用量，选择合适的容量仪器。
3．平行操作——标准与样品必须同时进行实验，加入试剂量等均应一致。观察时，两管受光照的程度应一致，使光线从正面照入，比色时置白色背景上，比浊时置黑色背景上，自上而下地观察。 4．注意刻度吸管的正确使用和观察。 五、思考题
1.古蔡氏检砷法中所加各试剂的作用与操作注意点是什么？
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