论 文 题武汉轻工大学
毕业论文
Development of a HPLC for determination of florfenicol in chicken plasma 姓 名： 吕阳 学 号： 110703112 院 （系） 动物科学与营养工程学院 专 业 动物生物技术 指导教师 刘宇
2015年6月1日
目：鸡血浆中氟苯尼考的高效液相色谱检测方法
武汉轻工大学学士学位论文
目 录
摘 要 ................................................................................................................................. 1 Abstract .................................................................................................................................. 2 第一章 绪 论 ................................................................................................................... 3
1氟苯尼考的研究进展 ................................................................................................. 3
1.1氟苯尼考的药品信息 ....................................................................................... 3 1.2氟苯尼考的临床应用 ....................................................................................... 4 1.3氟苯尼考的检测方法 ..................................................... 错误！未定义书签。 2研究目的与意义 ....................................................................... 错误！未定义书签。 3研究内容 ..................................................................................................................... 6 第二章 试验研究 ............................................................................. 错误！未定义书签。
1 材料与方法 .............................................................................. 错误！未定义书签。
1.1试验材料 ......................................................................... 错误！未定义书签。 1.2试验动物 ......................................................................... 错误！未定义书签。 1.3试验方法 ........................................................................................................... 7 2 结果与计算 ................................................................................................................ 8
2.1波长选取 ........................................................................................................... 8 2.1工作曲线 ......................................................................................................... 10 2.2回收率与精密度 ............................................................. 错误！未定义书签。 2.4 HPLC检测图谱 .............................................................. 错误！未定义书签。 3讨论 ........................................................................................... 错误！未定义书签。 第三章 结论与建议 ....................................................................... 错误！未定义书签。
1 结论 .......................................................................................... 错误！未定义书签。 2创新点 ....................................................................................... 错误！未定义书签。 3有待进一步研究的问题 ........................................................... 错误！未定义书签。 参考文献 ............................................................................................. 错误！未定义书签。 致 谢 ............................................................................................... 错误！未定义书签。
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摘 要
本文建立了鸡血浆中氟苯尼考含量的高效液相色谱检测方法，方法的线性范围为1.0～200 μg/ml，线性方程为y = 520000x + 170000（r =0.9994），回收率达到86.3%～98.5%，方法的定量限最低为0.1 μg/ml，日内与日间相对标准偏差均小于5%。本法的色谱柱使用Waters 04590型Symmetry-C18柱（4.6×150 mm,5μm），柱温为30℃，流动相使用乙腈：水=27:73（V:V），进样量10 μL，流速1.0 ml/min，紫外检测波长为230nm。经验证，本方法具有简便快捷、定量准确，线性关系良好，回收率较高等优点，能够为氟苯尼考的药物代谢动力学研究提供定量依据和检测基础。
关键词： 氟苯尼考，高效液相色谱，鸡
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Abstract
This paper established the chicken florfenicol in plasma of high performance liquid chromatography (HPLC) method, the linear relationship between the absorbance and concentration of tilmicosin was in the range of 1.0 to 200μg/ml with a minimum detection limit of 0.1μg/ml (r = 0.9997), the linear equation: y = 12674x + 16319, the recoveries ranged from 86.3% to 98.5%, the values of intra-day relative standard divination and inter-day relative standard divination were less than 5%.Waters 04590 Type Symmetry-C18 column (4.6 × 150 mm, 5μm) was used in the analysis,a mixture of acetonitrile-water,at a flow rate of 1.0 ml/min was used as mobile phase, passing through the column at 30 ℃. Ultraviolet detection was performed at the wavelength of 230nm.
Key words: High Performance Liquid Chromatography,Florfenicol, Chicken
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绪 论
1 氟苯尼考的研究进展
1.1 氟苯尼考的药品信息
氟苯尼考（florfenicol）[1]又称作为氟甲砜霉素，因为其拥有广泛的抗菌谱，
在体内极易吸收，分布较为广泛，治疗剂量下未发现毒副作用，防治效果显著，对于敏感菌所引发的动物细菌性疾病具有极佳的治疗效果，广泛应用于养殖业中，是兽用药物中目前正在广泛推广使用的一种新型的氯霉素类的广谱抗菌药。现如今，氟苯尼考已经在水生动物、禽类、猪、反刍动物以及其他畜禽的细菌性疾病[2]的预防和治疗中广泛使用，目前我国已经通过了该药的审批。
1.1.1 性状与结构
纯净的氟苯尼考的性状为结晶性粉末，白色或类白色，无臭。在通常情况下，在有机溶剂中溶解度较高，溶解在水中的剂型大多为混悬液。氟苯尼考在二甲基甲酰胺中溶解度极高，溶解于甲醇，溶剂为冰醋酸时略微溶解，水或氯仿时中的溶解度极低[3]。浓度为0.5%的氟苯尼考水溶液的酸碱度大约在4.5～6.5范围内[4]。
市场上出售的氟苯尼考商品名称（国际通用）多数称之为Florocol和Nuflo[5]。氟苯尼考的化学式为C12H14Cl2FNO4S ，其相对分子质量为358.22，化学结构式
[6]
如图1：
图1 氟苯尼考结构式
1.1.2 药效学
氟苯尼考是属于氯霉素类的广谱抗菌药，与氯霉素（CHL）和甲砜霉素（THI）
具有相同的作用机理和抗菌谱，它可以与细菌有效地特异性结合，能够通过降低相关酶的活性从而使肽链延伸受到抑制作用，进而干扰甚至丧失了细菌合成蛋白
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