DNA和蛋白质技术 练习
课题一: DNA的粗提取与鉴定
例l 图5—1_1为“DNA的粗提取与鉴定”实验装置：
(1)实验材料选用鸡血球液，而不用鸡全血，主要原因是鸡血球液中有较高含量的_________________。
(2)在图A所示的实验步骤中加蒸馏水的目的是_________________，通过图B所示的步骤取得滤液，再在溶液中加入2 mol／L的NaCl溶液的目的是_________________；图C所示实验步骤中加蒸馏水的目的是_________________。
(3)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA，可滴加_________________溶液，结果丝状物被染成浅绿色。
解析：“DNA粗提取与鉴定”实验材料选用鸡血球液，而不用鸡全血，主要原因是DNA主要储存于细胞核内，而不在血浆内，使用鸡血球液提高材料中的细胞数量和DNA含量，从而可以保证实验能提取到DNA的数量。
图A、B、C所示为本实验的三个关键步骤。图A通过添加蒸馏水，血细胞与蒸馏水相混合而使血细胞处于极度低渗的环境之中，细胞因大量吸水而导致最终破裂，并释放出胞内物。图B通过纱布过滤使血细胞释放出的DNA滤入收集的滤液中(将大量胶状物滤出)，再在滤液中加入2 mol／L的NaCl溶液使DNA的溶解度增加。DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，如在0．14 moI／L的NaCl溶液中溶解度只有水中的1％，而在1 mol／L的NaCl溶液中的溶解度为水中的2倍。即使DNA溶于NaCl溶液，图C在DNA浓盐溶液中加入蒸馏水(大量)，可使溶液的NaCl浓度降至较低，由于DNA在较低浓度的NaCl溶液中溶解度很低(在O．14 m01／L的NaCl溶液中溶解度最低，浓度再变小则DNA溶解度将增大)，使DNA低渗析出，经过滤等手段可以收集到DNA。
甲基绿为比较常用的细胞核染色剂，染色后细胞核、染色体呈绿色，属碱性染料，可以用来鉴定DNA。
答案：(1)DNA (2)使血球破裂 使滤液中的DNA溶于浓盐溶液使DNA析出 (3)甲基绿 例2 在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，将提取获得的DNA的黏稠物(还含有许多杂质)分别处理如下：
第一，放人0．14 mol／L的NaCl溶液中，搅拌后过滤，得滤液A和黏稠物a。 第二，放入2 mol／L的NaCl溶液中，搅拌后过滤，得 滤液B和黏稠物b。
第三，放人冷却的95％的酒精溶液中，搅拌后过滤，得滤液C和黏稠物c。
以上过程获得的滤液和黏稠物中，因含DNA少而可以丢弃的是_________________。 解析：在不同浓度的NaCl溶液中，DNA的溶解度不同。在O．14 mol／L的NaCl溶液中溶解度最小，DNA析出，呈丝状物，过滤后存在于黏稠物中；在2 mol／L的NaCl溶液中溶解度最大，所以DNA溶解，过滤后存在于滤液中；酒精可使DNA分子凝集，因此，在冷却的95％的酒精溶液中DNA凝集，呈丝状物，过滤后存在于黏稠物中。 答案：A、b、C
练习:
1．DNA在下列浓度的NaCl的溶液中，溶解度最低的是( ) A．2 mol／L B．O．015 mol／L C．0．14 mol／L D．5 mol／L
2．DNA在下列哪一个温度下会变性( ) A．20℃ B．40℃ C．60℃ D．100℃
3．在破碎鸡血细胞时，要先加入20 mL的蒸馏水，其作用是( ) A．DNA溶解于水中
B．使血细胞破裂，释放出DNA C．稀释血液，防止凝固 D．有利于搅拌
4．去除DNA杂质时，可直接在滤液中加入何种物质，反应10～15 min( ) A．嫩肉粉 B．蒸馏水
C．2 mol／L NaCI D．酒精
5．在\的粗提取与鉴定”实验过程中，对DNA提取量影响较小的是( ) A．使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，放出DNA等核物质 B．搅拌时要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动
C．在析出DNA黏稠物时，要缓缓加入蒸馏水，直至黏稠物不再增多 D．要用冷酒精沉淀DNA，甚至可将混合液再放人冰箱中冷却
6．图5—1—2中能反映DNA溶解度与NaCl溶液浓度之间关系的是( )
7．下列各项中不宜选作DNA提取材料的是( )
A．洋葱表皮细胞 B．鲜豌豆种子 C．人的红细胞 D．猪肝 8．DNA不溶解于( )
A．NaCI溶液 B．KCI溶液 C．C2H5OH D．MgCl2溶液 9．DNA的分子直径约为( )
-20-10
A．20 X 10 m B．20 X 10m
-20-10
C．20 X 10cm D．20 X 10cm
10．玻璃棒搅拌出的较纯净的DNA的颜色以及DNA遇二苯胺(沸水浴)染上的颜色分别是( )
A．黄色、紫色 B．白色、砖红色 C．白色、蓝色 D．蓝色、砖红色
11．DNA在NaCl溶液中的溶解度随着NaCl浓度的变化而变化。
(1)请在下列NaCl溶液中选出能使DNA析出最彻底的一种( )和溶解度最高的一种( )(在括号内填选项)
A．0．14 mol / L B．2 mol /L C．O．15 mol／L D．0．3 mol／L
(2)DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些物质却可以溶于酒精溶液，利用这一原理可以_________________，可以推测溶于酒精中的物质可能有_________________。
(3)利用DNA遇 呈蓝色的特性，将该物质作为鉴定_________________的试剂。其实验过程中要向放有_________________的试管中加入4 mL的_________________。混合均匀后，将试管置于_________________5 min，待试管_________________，观察试管中溶液颜色的变化，这个实验也说明DNA耐_________________温。
12．关于“DNA的粗提取与鉴定”的实验材料的选择，也经过了多次实验效果的比较，最终选择鸡血做实验材料，请据图5—1—3回答问题：
(1)鸡血细胞中红细胞_________________，家鸡属于鸟类，新陈代谢旺盛，因而血液中_________________细胞数目较多，可以提供丰富的_________________。
(2)实验前由教师用血细胞液供同学们做实验材料，而不用鸡全血，主要原因是 __________________________________。
(3)在牧区采集牛、羊和马血比较方便，若用该材料按实验要求完成实验步骤后，结果是_________________，这是因为这些动物和人类一样，_________________。但若改用动物肝
脏做实验材料，实验能顺利进行。这是因为_________________________________________。 (4)若选用动物肝脏做实验材料，在提取之前，最好增加_________________程序，使组织细胞更易分离。
答案:
1．C解析：DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，当NaCl溶液的物质的量浓度为O．14 mol／L时，溶解度最低。
2．D解析：大多数蛋白质不能忍受60℃～80℃的高温，而DNA在80℃以上时才会变性。因此，DNA在100℃时会变性。
3．B解析：实验中首先要将细胞中的DNA提取出来，一般用低渗溶液如蒸馏水使细胞过度吸水而破裂，而不是采取机械破碎。
4．A解析i嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。
5．B解析：A项的做法是为了充分释放出核中的DNA分子，使进入滤液中的DNA量尽量的多；C项是让DNA充分沉淀，保证DNA的量；D项的道理同C项。而B项的操作并不能使DNA增多或减少。
6．C解析：DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。当NaCl的物质的量为0．14 mol／L时，DNA的溶解度最低。 7．C解析：DNA提取材料的首要条件是细胞要含有
DNA，次要条件是DNA的含量丰富，A、B、D选项都符合要求。而哺乳动物成熟的红细胞无细胞核，所以不宜选作实验材料。
8．C解析：DNA可溶解在氯化钠等盐溶液中，不溶于酒精，但某些物质可溶于酒精中，这也是提纯DNA用酒精的原因。
9．B解析：这里是指DNA呈双螺旋结构时的分子直径。
10．C解析：玻璃棒搅拌出的纯净DNA，未经染色，呈白色。
11．(1)A B(2)除去杂质某些脂类、蛋白质、糖类或其他大分子物质 (3)二苯胺DNA DNA 二苯胺试剂沸水中水浴加热冷却后高
解析：根据实验原理可知DNA在O．14 mol／L的NaCl溶液中溶解度最低，在高浓度2 mol／L NaCl溶液中，溶解度最高。DNA存在于染色体上，为了把DNA与其他物质分开，利用DNA不溶于酒精的特性，可除去杂质；利用DNA遇二苯胺(沸水浴)成蓝色的特性，可以鉴定提取的DNA。 12. (1)含细胞核 红DNA(2)鸡血细胞中DNA相对含量高 (3)很难提取到DNA成熟红细胞中无细胞核肝细胞有细胞核 (4)研磨
解析：DNA的粗提取所用实验材料应具有DNA含量丰富的特点，哺乳动物的红细胞无细胞核，不宜做实验材料。
课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段
例1 DNA的复制需要引物，其主要原因是( ) A．可加快DNA的复制速度
B．引物可与DNA母链通过碱基互补配对结合 C．引物的5’端有助于DNA聚合酶的延伸DNA链
D．DNA聚合酶只能从3’端延伸DNA链
解析：DNA的两条链是反向平行的，为了明确地表示DNA的方向，通常将DNA的羟基(一OH)末端称为3’端，而磷酸基团的末端称为5’端。DNA聚合酶不能从5’端开始合成DNA，而只能从3’端延伸DNA链。因此，DNA复制需要引物。当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的3’端开始延伸DNA链，DNA的合成方向总是从子链的5’端向3’端延伸。 答案：D
例2标准的PCR过程一般分为变性、复性、延伸三大步，这三大步需要的温度依次是( ) A．95℃、55℃、72℃ B．72℃、50℃、92℃ C．50℃、92℃、72℃ D．80℃、50℃、72℃
解析：当温度上升到90℃(90℃～96℃)以上时，双链DNA解聚为单链，称之为变性；当温度下降到50℃(40℃～60℃)左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合；当温度上升到72℃(70℃～75℃)左右时，溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在Taq DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链，称为延伸。 答案：A
练习:
1．DNA的合成方向总是从子链的哪一端向哪一端延伸( ) A．3’端向5’端 B．5’端向3’端 C．3’端向3’端 D．5’端向5’端 2．PCR技术最突出的优点是( ) A．原理简单 B．原料易找
C．Taq DNA聚合酶具有耐热性 D．快速、高效、灵活、易于操作
3．PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水使用前必须进行的关键步骤是( )
A．反复洗涤 B．不怕外源DNA污染 C．高压灭菌 D．在一20℃储存
4．做PCR使用的微量离心管，总容积为( ) A．5 dL B．5 mL C．0．5 mL D．5 uL
5．PCR利用了DNA____________原理，在____________的温度范围内，DNA的____________解体，____________分开，这个过程称为____________。
6．一个由32P标记的DNA分子，放在未标记的环境中培养，复制5次后标记的DNA分子占DNA分子总数的( )
A．1／10 B．1／16 C．1／25 D．1／32
7．在怎样的温度范围内，DNA的双螺旋结构解开( ) A．10℃～20℃ B．80℃～100℃
C．20℃～30℃ D．40℃～60℃
8．关于DNA复制，下列叙述正确的是( )
A．DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从5’端延伸DNA链 B．DNA复制不需要引物
C．引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合
D．DNA的合成方向总是从子链的3’端向5’端延伸 9．Taq DNA聚合酶的特点( ) A．耐强酸 B．耐强碱
C．耐高温 D．最适温度37℃
10．下列有关PCR的描述，不正确的是( ) A．是一种酶促反应
B．引物决定了扩增的特异性 C．扩增产量按y=(1+x)
D．扩增对象是氨基酸序列
11．(1)PCR反应需要的条件：缓冲溶液、DNA模板、引物、四种脱氧核苷酸、耐热的DNA聚合酶，为什么?
(2)在PCR反应中与解旋酶作用相同的操作是_________________。 12．PCR一般要经过三十多次循环，每次循环可分为_________________、_________________和_________________三步。
13．空难之后对面目全非的航天员遗体残骸辩认可借助DNA杂交技术。该技术是从尸体和死者家属提供的死者生前的生活用品中分别提取DNA，在一定温度下水浴共热，使DNA的氢键断裂，双链打开。若两份DNA样本来自同一个体，在温度降低时，两份样本中的DNA单链会通过氢键连接在一起；反之，则不能互补。已知某DNA单链碱基组成为ATCCGAT，则与它互补的另一条单链碱基组成为________________，为保证准确性，需用较多的DNA样品，这可以通过一定的技术使DNA分子大量复制，若一个DNA分子中，腺嘌呤含量为15％，复制所用的原料均为3H标记的脱氧核苷酸，经四次复制后，不含3H的DNA单链占全部单链的________________，子代DNA分子中胞嘧啶的比例为________________。
14．PCR技术是把某一DNA片段在酶的作用下，在体外合成许多相同片段的一种方法，利用它能快速而特异的扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段；电泳技术则是在外电场作用下，利用分子携带的净电荷的不同，把待测分子的混合物放在一定的介质(如琼脂糖凝胶)中进行分离和分析的实验技术，利用它可分离氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等物质作亲子鉴定。图5—2—1是电泳装置及相应电泳结果。
n
(1)电泳和叶绿体色素分离采用的纸层析法比较，后者使用的介质是________________，叶绿体中的色素能够在滤纸上彼此分离开的原因是________________。
(2)PCR技术能把某一DNA片段进行扩增，依据的原理是________________。
(3)图3是把含21个氨基酸的多肽进行水解，得到的氨基酸混合物进行电泳的结果，据图可推知该多肽由________________种氨基酸构成。
(4)图4通过提取某小孩和其母亲以及待测定的四位男性的DNA，分别由酶处理后，生成含有若干DNA片段，并进行扩增得到的混合物，然后进行电泳所得到的一组DNA指纹图谱。请分析：F1～F4中，谁是该小孩真正生物学上的父亲?为什么?
(5)电泳过程中分子的迁移速率除了与本身所带的净电荷多少有关外，你认为还与什么因素有关?(至少列出一种)
答案:
1．B解析：DNA的合成具有方向性，即从5’端向3’端延伸。
2．D解析：PCR技术用途广泛，具有快速、高效、灵活，易于操作的突出优点。
3．C解析：PCR实验中对无菌条件要求较高(高于细菌单一培养)，反复洗涤不能杀死微生物，宜采用高压灭菌法，且反复2～3次。
4．C解析：在实验室中，做PCR通常使用微量离心管，它是一种薄壁塑料管，总容积为O．5 mL。
5．热变性80℃～100℃ 双螺旋双链变性
解析：PCR实验中一般不采用解旋酶处理，而是采用DNA的热变性技术，操作过程要注意温度的控制。
6．B解析：一个DNA分子n次复制后产生的DNA数目为2n，而DNA复制是半保留复制，其特点是：新形成的DNA双链，一条是来自亲代的DNA分子的母链，另一条是新形成的子链。
这样最初32P标记的DNA分子复制后，其标记的两条链就分别进入两个子代DNA分子中，即两个子代DNA分子均被标记了。然而由于是在未标记的环境中培养，不论多少次复制，只有最初标记过的两条链中含32 P，这样经n次复制，标记的DNA分子占2／2n，即l／2n-1，所以本题应选B。
7．B解析：蛋白质大多不能忍受60℃～80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。 8．C 9．C
10．D解析：PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，它以极少量的DNA为模板，以四种脱氧核苷酸为原料，在引物作用下使DNA聚合酶从引物的3’端连接脱氧核苷酸，短时间内迅速复制上百万份的DNA拷贝，其扩增产量为y=(1+x)n，y代表DNA片段扩增后的拷贝数，x表示平均每次的扩增效率，n代表循环次数，因此答案选D。
11．(1)PCR反应本质是DNA复制，其需要条件类似于生物体内DNA的复制。(2)95℃变性 12．变性复性延伸
解析：PCR反应时，应先解开双螺旋再使DNA单链与引物结合，然后利用原料合成DNA。 13．TAGGCTA 1／16 35％
解析：在DNA中，两条链上的碱基是互补助的，即：A和T，G和C相互配对。
14．(1)层析液各种色素随层析液在滤纸上的扩散速度不同 (2)DNA的复制 (3)6 (4)F2；因为C和F2两者之间的DNA指纹图谱完全相同。
(5)分子的大小、形态，凝胶的种类、密度，电泳的电压大小等。
解析：PCR技术依据的原理是DNA复制，产物分离采用电泳，与叶绿体色素分离有着本质的差别。人的DNA某些片段像指纹一样，具有个体差异性，可用于遇难者身份认定、亲子鉴定等等。
课题3血红蛋白的提取和分离
例1凝胶色谱法分离蛋白质的原理是( ) A．根据蛋白质分子的大小
B．根据蛋白质相对分子质量的大小 C．根据蛋白质所带电荷的多少 D．根据蛋白质溶解度的大小
解析：凝胶色谱法所用的凝胶是一种微小的多孔球体，在小球内部有许多贯穿的通道，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长。移动速度较慢湘对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。 答案：B
例2关于血红蛋白分子组成的叙述正确的是( )
A．两个α-肽链、两个β-肽链、一个亚铁血红素基团 B．一个α一肽链、三个β-肽链、四个亚铁血红素基团 C．两个α-肽链、两个β-肽链、四个亚铁血红素基团 D．两个α-肽链、两个β-肽链、两个亚铁血红素基团
解析：血红蛋白又称血色素，是红细胞的主要组成成分。血红蛋白由四个肽链组成，它包括两个α-肽链、两个β-肽链。其中每条肽链环绕一个亚铁血红素基团，因此共有四个亚铁
血红素基团。 答案：C
例3 将经处理破裂后的红细胞混合液以2 000 r／min的速度离心10 min后，离心管中的溶液分为四层，从上到下的顺序依次是( ) A．血红蛋白、甲苯层、脂类物质层、沉淀层 B．甲苯层、沉淀层、血红蛋白、脂类物质层 C．脂类物质层、血红蛋白、甲苯层、沉淀层 D．甲苯层、脂类物质层、血红蛋白、沉淀层
解析：混合液经离心后，按密度大小排列，在离心管中从上到下的顺序依次是，第1层为无色透明的甲苯层，第2层为白色薄层固体，是脂溶性物质沉淀层，第3层为红色透明液体，这是血红蛋白的水溶液，第4层为暗红色沉淀物，主要是红细胞破碎物沉淀。 答案：D
练习:
1．利用凝胶色谱法，什么样的蛋白质先洗脱出来( ) A．相对分子质量大的 B．溶解度高的
C．相对分子质量小的 D．所带电荷多的
2．相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程，可表示为图5—3—1中哪一个( )
3．在电场作用下，带电分子会如何移动?
4．人们用鸡的红细胞提取DNA，用人的红细胞提取血红蛋白的原因是( ) A．鸡的红细胞无血红蛋白，人的红细胞有血红蛋白 B．鸡的红细胞有线粒体，人的红细胞无线粒体 C．鸡的红细胞有细胞核，人的红细胞无细胞核
D．鸡的红细胞进行有氧呼吸，人的红细胞进行无氧呼吸
5．人体血液中的缓冲物质都是由一种弱酸和相应的强碱盐组成，下列缓冲对正确的一项是( )
A．Na2C03/NaHC03 B．Na3P04／NaH2P04 C．NaH2P04／Na2HP04
D．H2C03／NaHC03
6．高温灭菌和酒精灭菌分别利用蛋白质的何种作用，作用结果是什么被破坏所致( ) A．变性、变性；空间结构 B．分解、变性；化学结构 C．变性、变性；平面结构 D．分解、分解；空间结构
7．在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的是( ) A．防止血红蛋白被O2氧化
B．血红蛋白是一种两性物质，需要酸中和 C．磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程
D．让血红蛋白处在稳定的pH范围内，维持其结构和功能
8．某同学在实验课前从学校附近的屠宰场取新鲜的猪血，并在采血容器中预先加入了抗凝血剂柠檬酸钠，取血回来马上进行实验，请回答有关红细胞洗涤的有关问题： (1)洗涤红细胞的目的是_________________。
(2)你如何知道红细胞已洗涤干净? __________________________________。
(3)分离红细胞时的离心速度及离心时间分别是__________________________________。 (4)如若离心速度过高和时间过长，则结果会怎样?
___________________________________________________。
9．红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，请回答下列有关问题：
(1)血红蛋白提取和分离的程序可分为四步：_________________、_________________、 _________________和 _________________。
(2)实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。
①加入柠檬酸钠的目的是_________________ 。
②以上所述的过程即样品处理，它包括_________________、_________________、_________________收集血红蛋白溶液。
(3)收集的血红蛋白溶液在透析袋中经过透析，这就是样品的粗分离。 ①透析的目的是__________________________________。 ②透析的原理是__________________________________。
(4)通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。 ①样品纯化的目的是__________________________________ 。 ②血红蛋白有什么特点? __________________________________。
这一特点对进行蛋白质的分离有什么意义? __________________________________.
答案:
1．A解析：凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。相对分子质量较小的蛋白质能进入凝胶内部通道，路程较长，移动速度较慢；相对分子质量大的蛋白质，路程较短，移动速度较快，首先洗脱出来。
2．B解析：本题考查对凝胶色谱法分离蛋白质原理的理解，蛋白质相对分子质量越小，则易进入凝胶内部而后被洗脱。
3．这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。
解析：生物大分子中有些可解离的基团，在一定pH作用下，这些基团会带上正电或负电，在电场作用下。这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。
4．C解析：鸡(鸟类)的红细胞具有完整的细胞核，含有核DNA，便于进行DNA的提取，人的红细胞无细胞核，结构简单，血红蛋白含量丰富，便于提取血红蛋白。
5．CD解析：由于血液中存在缓冲对，酸性或碱性的物质进入血液后，血液的pH不会发生大的变化，是机体稳态的一个重要组成部分。
6．A解析：蛋白质的变性是个不可逆转的过程，高温 (热)和酒精(化学物质)都会使蛋白质发生变性，破坏其空间结构，起到灭菌的作用。
7．D解析：利用磷酸缓冲液模拟细胞内的pH环境，保证血红蛋白的正常结构和功能，便于分离观察(红色)和科学研究(活性)。
8．(1)去除血浆蛋白 (2)离心后的上清液没有黄色
(3)低速如500 r／min短时间如2 min(4)离心速度过高和时间过长会使白细胞和淋巴细胞一同沉淀，也得不到纯净的红细胞，影响后续血红蛋白的提取纯度
解析：这与DNA提取不同，哺乳动物的红细胞无核，恰恰为提取血红蛋白提供了方便。实验用红细胞是否洗涤干净，应以离心后的上清液无黄色为标准，离心时问的长短、离心强度都会对实验产生影响，应注意掌握。
9．(1)样品处理粗分离纯化纯度鉴定 (2)①防止血液的凝固②红细胞的洗涤血红蛋白的释放
(3)①去除相对分子质量较小的杂质 ②透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内
(4)①通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去②血红蛋白呈现红色，在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液，这使血红蛋白的分离过程非常直观，大大简化了实验操作
解析：血红蛋白提取实验中应注意材料的选择，及时加入柠檬酸钠，防止血液的凝固。分离纯化过程中可根据分子的大小采用不同的方法进行操作。
2．B解析：本题考查对凝胶色谱法分离蛋白质原理的理解，蛋白质相对分子质量越小，则易进入凝胶内部而后被洗脱。
3．这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。
解析：生物大分子中有些可解离的基团，在一定pH作用下，这些基团会带上正电或负电，在电场作用下。这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。
4．C解析：鸡(鸟类)的红细胞具有完整的细胞核，含有核DNA，便于进行DNA的提取，人的红细胞无细胞核，结构简单，血红蛋白含量丰富，便于提取血红蛋白。
5．CD解析：由于血液中存在缓冲对，酸性或碱性的物质进入血液后，血液的pH不会发生大的变化，是机体稳态的一个重要组成部分。
6．A解析：蛋白质的变性是个不可逆转的过程，高温 (热)和酒精(化学物质)都会使蛋白质发生变性，破坏其空间结构，起到灭菌的作用。
7．D解析：利用磷酸缓冲液模拟细胞内的pH环境，保证血红蛋白的正常结构和功能，便于分离观察(红色)和科学研究(活性)。
8．(1)去除血浆蛋白 (2)离心后的上清液没有黄色
(3)低速如500 r／min短时间如2 min(4)离心速度过高和时间过长会使白细胞和淋巴细胞一同沉淀，也得不到纯净的红细胞，影响后续血红蛋白的提取纯度
解析：这与DNA提取不同，哺乳动物的红细胞无核，恰恰为提取血红蛋白提供了方便。实验用红细胞是否洗涤干净，应以离心后的上清液无黄色为标准，离心时问的长短、离心强度都会对实验产生影响，应注意掌握。
9．(1)样品处理粗分离纯化纯度鉴定 (2)①防止血液的凝固②红细胞的洗涤血红蛋白的释放
(3)①去除相对分子质量较小的杂质 ②透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内
(4)①通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去②血红蛋白呈现红色，在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液，这使血红蛋白的分离过程非常直观，大大简化了实验操作
解析：血红蛋白提取实验中应注意材料的选择，及时加入柠檬酸钠，防止血液的凝固。分离纯化过程中可根据分子的大小采用不同的方法进行操作。