MC培养基在乳酸菌菌落计数中的应用

MC培养基在乳酸菌菌落计数中的应用

MC培养基用途：

用于乳酸菌饮料中乳酸菌的菌落计数(GB/T 4789.35-2010)。 原 理：

大豆蛋白胨、牛肉膏粉和酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖和乳糖为可发酵糖类提供碳源;乳酸菌发酵糖产酸使菌落周围碳酸钙溶解，以辨别乳酸菌;琼脂是培养基的凝固剂;中性红为pH指示剂。 培养基配方(每升)： 大豆蛋白胨 牛肉膏粉 酵母膏粉 葡萄糖 乳糖 碳酸钙 琼脂 中性红 最终pH6.0±0.2 使用方法：

1、称取培养基76g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15-20min。

2、无菌操作将经过充分摇匀的检样25g(或25mL)，放入含有225mL灭菌生理盐水的灭菌广口瓶内，振摇均匀，即为1：10稀释液，依次做1：100、1：1000……稀释。

3、将MC培养基凉至50℃左右，注入平皿中约15mL(本品含有碳酸钙，摇匀后方可倾注平板)，待琼脂凝固。

4、选择2-3个合适的稀释度，分别在做10倍递增稀释的同时，吸取0.1mL稀释液于平皿上，用L型棒涂布，每个稀释度做2个平皿。翻转平板置于36±1℃兼性厌氧培养48h。

5g 3g 3g 20g 20g 10g 15g 0.05g

5、选择菌落数在30-300个之间的平皿进行计数，并乘以相应的稀释倍数，以10的指数表示进行报告。