否产生ESBLs。
7、检测报告:按“确认”,系统进入打印报告模块,此时出现“选择打印药物”窗口按“确认”即可打印报告。
九、注意事项:
1、仪器需放臵在坚固台面上正常工作条件下运行,室内通风良好,避免强光直射。
2、随机试剂使用时应防止试剂液以及其他液体试剂溅到仪器上,避免污染和腐蚀。
3、检测托盘未有放随机试板,请勿检测使用。 4、仪器使用完毕需将仪器擦拭干净,仪器表面禁止用腐蚀性清洁剂清洗。
5、工作结束后应关闭电源,用软布或仪器套覆盖仪器防止灰尘进入。
6、用户使用仪器之前,请仔细阅读使用说明书。 十、维护和保养
1、定期用干净软布沾少量纯净水擦拭仪器表面,如有污迹,可用干净软布清洁膏清洁。
2、长时间不使用本系统,应用软布或仪器套覆盖仪器,防止灰尘进入并定期保养。
3、细菌鉴定系统为复杂精密仪器,在使用过程中出现严重误差需要校准的,其校准工作需由厂家专业工程师进行。
剑阁县人民医院检验科 革兰氏阴性杆菌(肠杆菌)鉴定操作规程
编号:JYC 037 编写时间:2012.1.1 编写人:薛俊太 校正人:邓翠华 一、产品名称:细菌测定系统随机体外试剂板
二、预期用途:适用于氧化酶试验阴性的革兰氏阴性杆菌的鉴定和抗菌药物MIC测定。
三、适用仪器:DL—96细菌测定系统。
四、检测原理:试剂板由生化反应孔和抗菌药物MIC测定试验孔组成,在生化反应孔中加入细菌悬液,抗菌药物MIC测定试验孔中加入培养基,经35—37℃孵育,生化反应在细菌代谢作用下直接产生颜色变化或经加入显色剂后产生颜色变化,抗菌药物MIC测定试验根据试验孔是否出现浑浊(沉淀)确定细菌是否生长,通过细菌测定系统分析从而将细菌快速、准确的鉴定以种属同时分析抗菌药物MIC值。
五、标本要求
使用本测试板的被测菌应符合以下三项要求: 1、氧化酶试验阴性;
2、无特殊营养要求的革兰氏阴性杆菌;
3、18—24小时时分离培养的单个纯菌落(或纯培养物); 六、检验方法
(一)生化试验试验方法
1、菌悬液制备:挑取纯培养单个菌落于稀释液瓶内壁研磨呈细菌悬液0.5麦氏单位。
2、用连续移液器(配无菌移液吸头)吸取该菌液加入试剂板A1—A12、B1—B12和C1—C4孔内,每孔100μl。
3、在A1-A7孔分别滴加无菌石蜡油2滴。 (二)抗菌药物MIC测定试验操作方法
1、吸菌悬液50μl,如至肉汤培养基内,混匀,继续加入测试板的其余各孔(所有抗菌药物MIC测定试验及生长以照孔C),每孔100μl。
2、撕开不干胶对齐贴于试剂,35-37℃孵育18-24h后判读结果。
(三)结果判读
1、先于A12孔(VP)滴加VP试剂A、B各1滴,20分钟后,再于A11孔(IND)滴加靛基质试剂一滴,数分钟后,于A10孔(PHE)滴加苯丙氨酸试剂一滴,立即判读结果。
2、将试剂板放进细菌测定系统分析,分析完毕后,自动判定细菌种属和抗菌药物MIC半定量结果,并打印报告单(细菌测定系统的详细操作另介绍)。
七、主要性能指标 1、准确率
试剂板对质控菌株鉴定的准确率为100%;试剂板对质控菌株抗菌药物MIC测定的准确率为100%。
2、重复性
试剂板对质控菌株鉴定的重复性为100%;试剂板对质控菌株抗菌药物MIC测定的重复性为100%。
3、批内不精密度
试剂板对质控菌株鉴定和抗菌药物MIC测定的批内不精密度无差异。
4、批间不精密度
试剂板对质控菌株鉴定和抗菌药物MIC测定的批间不精密度无差异。
八、注意事项
1、所有的操作过程应避免杂菌污染。
2、必须事先做好板外的鉴定试验,即氧化酶试验和革兰氏染色镜检(必要时还需观察动力),若未做,或做得不准确,板上的鉴定结果将可能出现根本性的错误。
3、沙门及志贺菌属的所有菌种、均应做血清凝集试验(玻片凝集)确定。
4、被测菌必须是新鲜的纯培养物,严格避免从平皿上刮取两种或两种以上的菌落或用陈旧的培养物进行试验。
5、孵育48小时以后的反应结果不能作为判断的依据。
6、本试剂板各孔底物在无菌条件下冷冻干燥,密封包装,临用时先臵室温预温再在无菌环境下打开,板盖不可随意掀启,以防空气杂菌污染。
7、操作过程必须有必要的防护措施以防止操作人员感染,废弃物应作为传染源处理。
8、本产品仅用于体外诊断,供一次性使用,试剂板包装出现漏气或破损一律禁用。
9、使用前请仔细阅读本说明书 九、检验方法的局限性
1、细菌确定系统是根据数据库的背景资料鉴定细菌,数据库资料的不完整将直接影响鉴定的准确性。
十、参考文献 1
、
Patrick
R.Murray,Mannal
of
clinical
Microbiology,7th edition.
2、闻玉梅,现代医学微生物学,第一版,上海医科大学出版社。