实验四 蛋白质含量的测定
——考马斯亮蓝法（Brodford法）
原理
染料考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合后引起染料最大吸收波长的改变，从465nm变为595nm，光吸收增加，蛋白质-染料复合物具有高的消光系数，因此大大提高了测定蛋白质的灵敏度（1ug）
实验步骤
1. 求标准曲线方程：按下表配置，操作。
管号 1 2 3 4 5 6
BSA
（100μg／mL）
0 0.1 0.2 0.4 0.8 1.0
H2O （mL） 1.0 0.9 0.8 0.6 0.2 0
考马斯亮蓝 G-250（mL）
5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
Pr.含量 操 作 0 室 10 温 20 放 40 置 80 五 100 min
2. 样品pr.含量的测定
吸取小白菜提取液0.5mL，加入蒸馏水0.5mL（三次重复）；吸取血清（稀释800倍）1.0mL（三次重复），向以上各管加入考马斯亮蓝G-250 5.0mL，室温放置5分钟，测A595的值（一小时内完成）。 管 号
1
2 3
小 白 菜 T 或 A
管 号 1 2 3
血 清 T 或 A
☆ 小白菜用mg／g，血清用mg／mL。 要求r≥0.99
1